科研产出
响应曲面法优化超声波提取白蒿总黄酮研究
《天津农业科学 》 2015
摘要：在单因素试验的基础上,利用曲面响应法对超声波辅助纤维素酶提取吕梁白蒿总黄酮提取工艺参数进行优化研究。首先利用正交试验优化纤维素酶解条件,然后选择超声波功率、超声波时间和超声波次数为自变量,总黄酮得率为响应值,采用Box-Behnken设计、Design Expert 7.0分析和二次回归多项式预测策略优化超声波条件。结果表明,超声波辅助纤维素酶提取白蒿总黄酮最佳工艺条件为超声波时间14 min,超声波提取3次,超声波功率396 W,酶解时间120 min,加酶量2.5%,酶解温度50℃,酶解p H值5.5,其中超声波时间与次数的交互作用较强。白蒿总黄酮得率理论值为2.43%,实际值为2.47%。此方法优化吕梁白蒿中总黄酮提取效果良好。
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糜子麸皮酚酸酶法提取工艺优化
《中国农学通报 》 2015 CSCD
摘要：为优化糜子麸皮酚酸提取工艺的关键参数,以‘赤糜2号-Ⅱ’麸皮为原料,利用纤维素酶水解细胞壁,用乙醇溶液制备麸皮酚酸。以总酚提取量为指标,在单因素试验的基础上,运用Plackett-Burman筛选试验结合Central Composite Design响应面设计确定加酶量、固液比和乙醇溶液pH 3个因素为显著因素,优化后得到最佳提取条件为:乙醇溶液pH 4.15,固液比1:42.5(g:m L),加酶量1.00%。在此条件下,总酚酸的最佳提取量为194.064 mg没食子酸/100 g样品,与预测值相近,二次回归模型预测性良好。
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小麦TaWRKY2基因组分析及在进化和育种材料中的检测
《麦类作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：小麦WRKY转录因子在抗旱抗逆等方面有重要作用。为小麦抗旱抗逆分子模块组装育种提供参考,本研究在已有小麦TaWRKY2基因cDNA序列(GenBank登录号:EU665425)的基础上,从小麦品种晋麦79号中克隆获得TaWRKY2基因全长序列,并对TaWRKY2的基因结构、基因组信息进行研究,同时检测其在部分小麦亲缘种、黄淮麦区水旱地代表品种、本课题组选育的高代品系及部分水旱地杂交组合F1代中的分布。结果表明,克隆所得到的TaWRKY2基因全长DNA序列包含4个外显子和3个内含子,其中,3个内含子长度变化范围为111~172bp;外显子和内含子的交接处序列符合GT-AG原则;与乌拉尔图小麦(Triticum urartu,AA)和粗山羊草(Aegilops tauschii,DD)中的片段序列同源性分别为93%和99%,与中国春小麦(AABBDD)1AS、1BS和1DS染色体的片段序列同源性分别为93%、88%和99%。除野生一粒小麦外,在小麦进化祖先种、黄淮海水旱地推广的代表品种、课题组选育的高代品系及F1代共78份材料中,都能够检测出该基因的普遍存在,说明该基因可应用于小麦抗旱抗逆分子设计育种中。
关键词： 小麦 TaWRKY2基因 基因结构 基因组比较 基因检测
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谷子C2H2型锌指蛋白基因SiZFP182的克隆及表达分析
《中国农业大学学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：以‘晋谷45’和‘晋谷42’2个品种作为试验材料,采用聚乙二醇(PEG-6000)模拟干旱胁迫处理谷子幼苗,检测不同处理时间下丙二醛(MDA)的含量,评价其抗旱性。此外,在2个品种中克隆获得SiZFP182基因的cDNA全长,分析比较它们之间的序列差异;通过定量RT-PCR的方法分析SiZFP182基因在受到干旱胁迫的谷子幼苗中的表达特性。结果表明,‘晋谷45’的抗旱性强于‘晋谷42’,2个品种中SiZFP182基因的序列存在5处单碱基差异,使得编码的氨基酸序列不同。此外,PEG胁迫处理后24h内,SiZFP182基因在2个品种中的表达水平均表现出先升高后降低的趋势,处理后6~12h,该基因在‘晋谷45’中表达水平高于‘晋谷42’。初步认为‘晋谷45’的抗旱特性与‘晋谷42’对干旱敏感的特性,可能与干旱胁迫下处于幼苗期的2个品种中SiZFP182基因序列差异及表达差异相关。
关键词： 谷子 C2H2型锌指蛋白 SiZFP182 抗旱性
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苦荞Ft4CL基因克隆、生物信息学及分子进化分析
《山西农业大学学报(自然科学版) 》 2015
摘要：与其他作物相比,苦荞中含有较高含量的黄酮类物质-‘芦丁’。4-香豆酸-辅酶A连接酶(4-coumarate:CoA ligase,EC 6.2.1.12)是植物苯丙烷代谢途径转向黄酮类物质代谢的关键酶之一。本研究利用已知的来源于‘九江苦荞’叶片的Ft4CL1(HQ654088)基因片段为探针序列,从苦荞叶片转录组数据库中序列拼接得到一个苦荞Ft4CL全长基因,命名为Ft4CL(GenBank登录号:KM362863)。生物信息学分析结果表明:该cDNA长度为2 007bp,具有完整的ORF,共1 743bp,编码580个氨基酸,具备4CL所有活性位点。与已公布的部分Ft4CL基因及蒺藜苜蓿(Pb4CL)、甜瓜(Cm4CL)和黄瓜(Cs4CL)基因相似度为100%、73%、73%和72%。遗传聚类结果显示,该基因归类于双子叶植物。研究结果为深入探讨苦荞黄酮代谢途径提供了基础,也为提高苦荞黄酮含量提供了定向靶基因。
关键词： 苦荞 4-香豆酸辅酶A连接酶 电子克隆 生物信息学分析
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分子标记技术及其在大白菜遗传育种中的应用
《安徽农业科学 》 2015
摘要：概述了分子标记的基本类型,综述了近年来分子标记技术在大白菜遗传多样性分析、种子纯度鉴定、遗传图谱构建、基因定位及分子标记辅助选择育种等方面的研究进展,并对存在的问题和应用前景进行了分析,以期促进分子标记技术能更好地应用于大白菜遗传育种中。
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利用RNA-Seq技术鉴定拟南芥不定芽再生相关的转录因子
《生物工程学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：转录调控是不定芽再生过程的主要调控方式之一,但具体机制尚需进一步研究。为此,利用基于Illumina Hi Seq?2000测序平台的RNA-Seq技术分析了不定芽再生缺陷突变体be1-3和野生型WS在愈伤形成和不定芽再生过程以及野生型WS从脱分化向再分化转变过程差异表达的转录因子(Transcription factor,TF)编码基因。结果表明:与野生型WS相比,be1-3在脱分化过程差异表达的TF编码基因有155个,其中表达量上调的97个,表达量下调的58个;在再分化过程差异表达的TF编码基因有68个,其中表达量上调的40个,表达量下调的28个;而在野生型WS从脱分化向再分化转变的过程,总共检测到231个差异表达的TF编码基因,包括160个表达量上调的基因和71个表达量下调的基因。其中,MYB-related(v-myb禽成髓细胞瘤病毒癌基因)家族的不定芽相关转录因子基因ART1在be1-3突变体脱分化阶段的表达量提高了3 217倍,是表达量上调最大的TF编码基因。进一步研究发现,该基因过量表达导致愈伤形成和不定芽再生缺陷,并抑制了幼苗特别是主根的生长发育,表明该基因是愈伤形成和不定芽再生过程的一个负调控因子。本研究不仅加深了人们对不定芽再生转录调控机制的认识,而且为今后不定芽再生相关转录因子的研究提供了大量候选基因信息。
关键词： 不定芽再生 愈伤组织形成 RNA-Seq 转录因子 转录调控 拟南芥
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