科研产出
猪鼻支原体vlp重复区融合蛋白的构建表达及反应原性分析
《中国人兽共患病学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：目的猪鼻支原体(Mhr)是临床猪场常见病原菌之一,同时研究证实其与多种人类肿瘤有关。目前对Mhr的血清学检测尚无有效的方法。本研究以Mhr可变脂蛋白(vlp)家族为对象,设计vlp家族蛋白重复区片段融合蛋白,以作为检测用包被抗原使用。方法根据大肠杆菌的密码子偏嗜性,设计并构建串联表达7种Mhr可变脂蛋白vlpA、B、C、D、E、F、G重复区片段的重组蛋白vlpA-G基因。将该基因片段装入pET-32a(+)载体中转化大肠杆菌,筛选鉴定获得阳性工程菌。IPTG诱导表达,镍柱亲和层析获得纯化的重组蛋白vlpA-G。Western Blot鉴定该重组蛋白与Mhr阳性血清的反应能力,并利用该重组蛋白为包被抗原初步建立间接ELISA方法用于检测猪血清中的Mhr抗体。结果构建表达vlpA-G重组蛋白的基因工程菌,经PCR及DNA测序正确。IPTG诱导后出现明显蛋白条带,经镍柱亲和层析纯化获得vlpA-G重组蛋白。Western Blot试验证明重组蛋白vlpA-G能够和Mhr阳性兔血清产生明显的阳性杂交带;利用重组vlpA-G为包被抗原初步建立间接ELISA检测方法可成功检测Mhr阳性猪血清,证明该重组vlpA-G蛋白具有良好的反应原性。结论本研究构建了重组蛋白vlpA-G并证实该蛋白具有良好的反应原性,可作为Mhr血清学诊断方法研究的候选抗原,同时也为Mhr重组蛋白疫苗提供可选抗原。
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小麦根际土壤脱氢酶活性测定方法的改进
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为准确检测土壤脱氢酶活性,在传统TTC(氯化三苯基四氮唑)法基础上对萃取剂、测定波长、对照、培养时间、TTC浓度等条件进行了优化,并进行了标准曲线制作方法的创新。改进后的土壤脱氢酶活性测定方法为:用甲苯溶解TF(三苯基甲臜)制作标准曲线,以无土+无基质为试验对照,1.0%TTC溶液为基质,土壤中加入pH为7.4的Tris-HCl缓冲液和0.1 mol/L的葡萄糖溶液,在37℃下培养24 h,以甲苯为萃取剂萃取30 min,于492 nm波长下检测吸光值。利用优化后的方法测定转基因抗旱小麦各生育期根际土壤脱氢酶活性,结果表明:转基因抗旱小麦与对照(受体小麦)根际土壤脱氢酶活性没有显著性差异,均表现为先升高后降低趋势,于返青期达到最大值。试验结果进一步证实上述方法稳定可行。
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香橼精油的组成及香气活性成分的GC-MS-O分析
《食品与发酵工业 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用水蒸气蒸馏法提取香橼皮精油,运用气相色谱-质谱-嗅辨仪联机技术(GC-MS-O)对其成分组成及香气活性成分进行了研究.结果显示:香橼精油中柠檬烯的含量最高,为精油的50.53%,其次为对伞花烃(16.40%),其他含量较高的成分还有γ-萜品烯(8.70%)、罗勒烯(5.03%)、β-蒎烯(3.35%),α-蒎烯(2.66%)和β-月桂烯(2.30%).另外,检测出11种香气活性成分,其中已鉴定的9种为α-蒎烯、β-蒎烯、对伞花烃、柠檬烯氧化物、里那醇、4-萜品醇、反-对-薄荷-2,8-二烯醇、丙酸松油酯、乙酸橙花酯、巴伦西亚橘烯.嗅闻结果显示,伞花烃和丙酸松油酯可能对香橼的特征香气起重要作用.
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稻曲病菌突变体B-726生物学性状分析及其T-DNA插入位点侧翼序列的克隆
《中国农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析稻曲病菌T-DNA插入突变体库中致病力减弱突变菌株B-726的生物学性状,分析其T-DNA插入位点的侧翼序列,克隆因外源基因插入被破坏正常表达的基因,为明确该基因在稻曲病菌致病过程中的作用奠定基础,并为稻曲病防治新途径的制定提供理论依据。【方法】通过测定突变菌株B-726生长速率、产孢能力及致病力检测,分析其生物学性状;Southern杂交分析B-726外源基因插入的拷贝数;利用HiTail-PCR获得T-DNA插入位点的侧翼序列;运用RACE-PCR技术,克隆与插入位点毗邻的基因全长;用半定量RT-PCR分析该基因表达情况。【结果】突变菌株B-726与野生菌株P1相比致病力极显著下降,产孢能力、生长速率显著下降。Southern杂交结果显示T-DNA在菌株B-726中以单拷贝形式插入。经过序列分析发现,T-DNA插入在1个命名为Uvt-726上游344 bp处,半定量PCR结果表明,Uvt-726在B-726表达量较P1显著下降。【结论】克隆了1个可能与稻曲病菌致病力相关的基因,推断该基因在稻曲病菌致病过程中起着重要的作用。
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高赖氨酸小麦转基因新品系的获得与选择
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：提高小麦籽粒中赖氨酸的含量能够有效提高蛋白质的整体利用率,在很大程度上增加小麦的营养价值。转基因技术的发展和新的高赖氨酸蛋白基因的发现使培育优良的高赖氨酸小麦品种成为可能。为选育长江中下游麦区高赖氨酸转基因小麦新品系,以15个导入辣椒高赖氨酸蛋白基因Cflr的转基因株系为供体,以长江中下游农艺性状优良的扬麦13、扬麦15、扬麦17、扬麦20、宁0569、扬辐麦4号为亲本进行杂交、回交或滚动回交,对后代进行分子鉴定、总蛋白含量和赖氨酸含量测定。结果显示,从鉴定为阳性的40个转基因株系中选育出13个株系,其蛋白质和赖氨酸均有所提高,其中6个株系与改良亲本对照差异达极显著水平,赖氨酸含量较改良亲本对照提高了22%以上,最高达41.67%,蛋白质含量提高10.37%~29.13%。对这6个株系进行了产量比较试验,2个株系(2-3和3-6)表现优异,其主要农艺性状均达到或优于当地大面积推广品种扬麦15,平均产量分别达7 380kg/hm2和7 456 kg/hm2,比对照扬麦15分别增产3.2%和4.3%。可见,转基因株系为该地区高赖氨酸的优质小麦新品种选育提供了重要的种质资源。
关键词： 小麦 高赖氨酸蛋白Cflr基因 杂交 回交 赖氨酸含量 蛋白质含量
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秸秆还田与耕作方式对稻麦轮作农田土壤碳库及结构的影响
《南京农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：通过三季连续的大田试验,研究秸秆还田与耕作方式及其交互效应对稻麦轮作农田土壤碳库及土壤结构的影响。结果表明:秸秆还田对稻麦轮作农田土壤碳库具有显著影响,秸秆还田各处理的总有机碳、微生物生物量碳、水溶性有机碳和水稳性团聚体有机碳含量从高到低依次是:三季秸秆均还田、两季稻秸还田、一季麦秸还田,且均显著高于秸秆不还田处理;旋耕处理下土壤总有机碳、微生物生物量碳、水溶性有机碳的含量均高于翻耕,但差异不显著;旋耕和翻耕对不同粒径水稳性团聚体有机碳含量的影响无明显差异;旋耕稻麦秸秆均还田和翻耕稻麦秸秆均还田处理土壤总有机碳、微生物生物量碳、水溶性有机碳和水稳性团聚体有机碳的含量均显著高于其他处理。
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水葫芦青贮日粮对扬州鹅生长性能、屠宰性能及消化道发育的影响
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：选用120只4周龄扬州鹅,随机分为3个日粮组,每个日粮组4个重复,试验共42 d。对照组鹅饲喂基础日粮,试验组鹅饲喂低水平水葫芦青贮日粮(水葫芦鲜质量占36.58%)和高水平水葫芦青贮日粮(水葫芦鲜质量占54.87%)。育肥5~8周龄,水葫芦青贮日粮组鹅平均日增质量显著高于对照组(P<0.05),育肥9~10周龄,高水葫芦组和对照组鹅的平均日增质量显著小于低水葫芦青贮组(P<0.05),说明在扬州鹅生长发育中后期低水葫芦组生长性能最好。高水葫芦青贮组鹅全净膛率、半净膛率、腹脂率显著低于对照组和低水葫芦组(P<0.05),说明高纤维水平日粮虽然减少了脂肪沉积,但一定程度上降低了鹅的屠宰性能。高水葫芦组因其纤维量增大及营养浓度稀释使得鹅消化道质量及长度代偿性增大,显著高于对照组和低水葫芦组(P<0.05)。表明与对照组和高水葫芦青贮组相比,低水葫芦青贮日粮对鹅表现出了较好的饲喂效果。
关键词： 水葫芦 鹅 生长性能 屠宰性能 消化道质量 消化道长度
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高山杜鹃叶片再生和试管苗生长对不同LED光质的响应特征
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用LED红光、LED蓝光以及红蓝光不同配比组合为光源,以荧光灯光质为对照,探讨高山杜鹃组织培养中叶片不定芽再生和试管苗生长对不同LED光质的响应特征。结果显示:红蓝光组合(3∶1)处理与荧光灯对照相比,高山杜鹃叶片不定芽再生率、平均再生芽数均显著增加,而单色红光或单色蓝光处理下高山杜鹃叶片不定芽增殖效果均较差。单色红光处理下高山杜鹃试管苗有一定的徒长现象,株高、叶长和叶宽均最大,茎粗最低,另外,生根率高但根系活力较低;而单色蓝光处理下则相反。在红蓝复色光处理下,高山杜鹃试管苗较健壮且叶片叶绿素含量均高于对照。以上结果说明,红蓝复色光有利于高山杜鹃试管苗的形态建成和叶绿素的合成,是具有明显优势的植物组织培养光源。
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苏南地区农业现代化进程中的门槛效应分析
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了分析苏南地区(苏州、无锡、常州、镇江和南京)工业化和城镇化在农业现代化进程中的促进作用,采用内生农业技术增长模型和门槛效应模型,研究了苏南地区工业化和城镇化在促进农业现代化进程中的门槛效应。结果表明,苏南地区工业化和城镇化对农业现代化的促进作用均具有一门槛效应。当工业化率和城镇化率跃过一门槛值时,对农业现代化的作用效果显著提升,尤其是工业化和城镇化较高的地区农业现代化进程也较快。通过对工业化率、城镇化率的计算及对农业现代化率的模拟预测发现,苏南地区城镇化进程相对滞后于工业化进程,而农业化进程相对落后于城镇化进程。因此,苏南地区工业化、城镇化和农业现代化"三化"同步的发展目标仍需加强统筹、协调。
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