科研产出
小豆抗病相关基因VaAC1的克隆与表达分析
《南京农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：利用简并引物从小豆中扩增出1条与植物几丁质酶基因高度同源的片段,命名为VaAC1,通过RACE技术延伸VaAC1基因的3'端和5'端,VaAC1基因完整ORF长度为885 bp,编码294个氨基酸,拥有几丁质酶蛋白家族典型保守结构域GH18_chitinase-like。RT-PCR分析表明,VaAC1基因在小豆根、茎和叶中均有表达,且在叶中的表达相对较高;大豆花叶病毒处理后,VaAC1基因在叶中的表达量显著增强,显示小豆VaAC1基因与病毒病密切相关。
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利用四引物扩增受阻突变体系PCR技术检测水稻低直链淀粉含量基因Wx-mq
《中国水稻科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：根据Wx-mq基因存在的单核苷酸变异,利用四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primer ARMS-PCR)的方法设计特异引物,对12个水稻品种(或品系)以及武育粳3号(不含Wx-mq基因)/关东194(含Wx-mq基因)的F2分离群体进行扩增,依据其PCR产物的带型,可以准确区分出Wx-mq基因纯合、非Wx-mq基因纯合以及杂合基因型三种类型,其电泳结果与成熟后对胚乳外观特性鉴定完全一致。因此,作为一种简单、低成本的实用技术,四引物ARMS-PCR可以广泛用于Wxmq基因水稻的资源鉴定和分子标记辅助育种。
关键词： 水稻 低直链淀粉含量 Wx-mq基因 四引物扩增受阻突变体系PCR
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太湖地区稻田不同氮肥管理模式下氨挥发特征研究
《农业环境科学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以减少氨挥发带来的面源污染问题为目的,通过调整氮肥管理模式,设置农户常规施肥处理、化肥减量施肥处理、缓控释肥处理、有机无机肥配施处理、按需施肥处理以及无氮处理6个管理模式试验,研究太湖地区施氮量与氮肥品种对氨挥发损失的影响。结果表明:氨挥发损失受施氮量的显著影响,施氮量减少22%~44%可降低氨挥发损失20.2%~35.3%。常规化肥处理下,基肥期与分蘖肥期氨挥发损失较为严重。同一施氮水平下,有机肥化肥配施可显著降低氨挥发;缓控释肥可明显减少基肥期氨挥发量,但后期效果不明显。氮肥用量由当前农户施氮水平减少22%时,不会对作物氮累积量与产量造成影响,可见适当降低施氮水平并搭配有机肥,是具产量可持续性及环境友好性的氮肥管理模式。
关键词： 稻田 氨挥发 产量 氮肥减量 有机无机配施 缓控释肥
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大豆中2个编码PR10蛋白新基因的克隆与分析
《华北农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：从抗大豆花叶病毒病(SMV)大豆材料科丰1号中克隆到2个编码PR10蛋白的新基因Glyma09g04530和Glyma15g15590,Glyma09g04530和Glyma15g15590基因的ORF全长均为477 bp,编码158个氨基酸。序列比对与系统发生树分析结果表明:Glyma09g04530和Glyma15g15590是大豆中2个编码PR10蛋白的新基因。Glyma09g04530和Glyma15g15590基因在大豆的根、茎及叶中均有表达;接种大豆SMV后,Glyma09g04530和Glyma15g15590基因在大豆科丰1号的叶片中的表达均被强烈诱导并高效表达,显示Glyma09g04530和Glyma15g15590基因与大豆SMV抗性密切相关。
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葡萄赤霉素受体基因VvGID1A的分离、亚细胞定位及表达分析
《园艺学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以'藤稔'葡萄(Vitis vinifera*V.labrusca'Fujiminori')的花序、茎尖、叶片以及果实为试材,应用RT-PCR结合RACE技术克隆得到GID1A同源基因全长cDNA序列,命名为VvGID1A(基因登录号:JQ669511),全长1681bp,含有1个1035bp的开放阅读框,编码344个氨基酸,该氨基酸序列还包含两个激素敏感酯酶家族保守的结构域HGG和GXSXG.系统进化分析表明,VvGID1A与蒺藜苜蓿、棉花和拟南芥之间的一致性分别为70.25%、70.08%和68.21%.荧光定量RT-PCR结果表明,VvGID1A在葡萄花序、老叶和卷须中表达水平高于茎尖和幼叶,而在GA处理果实中的表达水平低于未处理的对照样品.瞬时表达载体的构建及洋葱表皮细胞转化后,洋葱表皮细胞的瞬时表达结果显示,该基因的表达产物定位在细胞核上.
关键词： 葡萄 赤霉素 VvGID1A 亚细胞定位 表达水平
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沼液配施化肥对太湖地区水蜜桃品质及土壤氮素累积的影响
《植物营养与肥料学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：将沼液农田回用是有机废弃物资源化与循环利用的重要途径.以7年生蜜露桃树为供试材料,通过连续2年牛粪沼液和水葫芦沼液的果园田间施用试验,研究等氮量条件下不同比例沼液与化肥配施对水蜜桃果实大小、单重、产量和果实品质及土壤矿质氮积累状况的影响.结果表明,1)水葫芦沼液、牛粪沼液和化肥配施可提高水蜜桃的产量与品质,在水葫芦沼液25%配施比例、牛粪沼液50%配施比例下产量及果实的可溶性固形物、糖分含量分别为最高,水葫芦及牛粪沼液中的水分含量是影响桃树产量和品质的关键因子,其适宜用量为200kg/(plant·a);2)各施肥处理土壤NH4^+含量随土壤深度增加呈递减趋势;沼液比例过高(75%和100%)会导致土壤硝酸盐在表层和近地下水层的累积,比例低下则硝酸盐累积不明显;习惯施肥(过量施肥)和低比例沼液(相应的高化肥比例)处理硝酸盐主要累积于犁底层之上;3)连续2年在沼液灌溉条件下,25%的水葫芦沼液、50%的牛粪沼液配施比例处理其近地下水层土壤硝酸盐含量均低于15mg/kg,处于安全可控范围,但在该地区(高地下水水位)进行长期沼液灌溉尚需进一步观测和评价.
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水稻全生育期耐盐资源的初步筛选
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了筛选全生育期耐盐的水稻资源,本研究对500份不同来源的国内外地方品种和旱稻资源用0.3%的NaCl盐溶液进行了苗期筛选。对筛选到的34份苗期存活率和绿叶率大于50%的材料和前人报道的121份耐盐材料用0.3%和0.5%的NaCl进行了全生育期耐盐性筛选。结果发现,不同材料间耐盐性差异很大,同一材料不同个体间耐盐一致性亦存在差异。0.3%的NaCl共筛选到7个品种的11个全生育期耐盐存活单株,而0.5%的NaCl仅筛选到1个品种中的1个存活单株。在存活单株中,有4个单株产量超过18 g,最高的达21.8 g。以上表明,通过大规模筛选是可以筛选到全生育期耐盐水稻资源。这些材料为耐盐机理研究和耐盐育种研究提供了材料基础。
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枯草芽胞杆菌Bs916突变体库的构建和抑制水稻细菌性条斑病菌相关基因的克隆
《中国农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】采用转座子标签技术构建枯草芽胞杆菌Bs916突变体库,从突变体库中筛选对水稻细菌性条斑病菌抑菌效果发生显著变化的菌株并克隆插入位点的基因,获得生防菌Bs916中与抑制细菌活性可能相关的基因。【方法】携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA通过化学转化方法转化至枯草芽胞杆菌Bs916菌株,构建随机插入突变体库。通过平板抑菌试验从突变体库中筛选对水稻细菌性条斑病菌抑菌效果得到显著提高和下降的突变体;并采用PCR和Southern Blot验证转座子是否成功插入到Bs916染色体基因组上,利用反向PCR技术克隆转座子插入位点基因、测序并进行生物信息学分析。【结果】成功构建了枯草芽胞杆菌Bs916的转座子随机插入的突变体库;PCR和Southern Blot结果表明转座子成功的插入到染色体基因组上,约85%突变体以单拷贝形式插入;筛选出30株对水稻细菌性条斑病菌抑制效果发生显著变化的菌株,克隆到21个突变体插入位点的基因序列并测序。生物信息学分析结果表明这些基因与感受态形成、生物膜形成和次生产物代谢相关。【结论】成功构建了Bs916突变体库,克隆到该库中对水稻细菌性条斑病菌抑菌效果显著变化菌株的突变位点基因,这些基因推测可能与枯草芽胞杆菌Bs916中的抑制细菌化合物的合成代谢及调控相关。
关键词： 枯草芽胞杆菌 突变株 水稻细菌性条斑病菌 抑菌基因 克隆
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绿盲蝽对寄主转换的适应性及生理响应
《中国农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确绿盲蝽在不同寄主植物之间转换后的适应性与生理响应机制。【方法】采用昆虫试验种群生命表方法,系统测定用四季豆饲养2代后的绿盲蝽分别转换到豇豆、绿豆、鄂杂棉10号(Bt棉)和苏棉9号(非Bt棉)上的种群生长发育与繁殖等生命表参数,并分析不同供试寄主饲养的绿盲蝽成虫体内的淀粉酶、蛋白酶及海藻糖酶活性和海藻糖含量。【结果】绿盲蝽由四季豆转移到不同供试寄主植物上均可完成世代循环,但不同龄期若虫的发育历期与存活率、5龄若虫体重及成虫寿命与产卵量等差异显著。不同供试寄主饲养的绿盲蝽种群趋势指数值依次为:四季豆(16.56)﹥Bt棉-鄂杂棉10号(3.23)﹥常规棉-苏棉9号(2.14)﹥豇豆(1.67)﹥绿豆(1.31)。不同供试寄主饲养的绿盲蝽成虫体内的几种酶活性也存在较大差异。转基因棉(鄂杂棉10号)种群的海藻糖酶活性最高(3.74μg·mg-1·min-1),而海藻糖含量最低(3.03μg/adult)。【结论】绿盲蝽由四季豆转换到其它4种寄主后,其生长发育速率与种群趋势增殖指数等生命参数均有所下降,成虫体内的蛋白酶、淀粉酶、海藻糖酶活性及海藻糖含量也有显著差异。总体相对比较而言,绿盲蝽对棉花具有较高的适应性。
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猪肺炎支原体感染早期诱导猪呼吸道产生多种特异性IgA抗体分泌规律研究
《畜牧兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了研究猪感染猪肺炎支原体早期,呼吸道针对病原不同功能蛋白分泌特异性IgA抗体的差异与规律,本研究通过已建立的猪肺炎支原体各蛋白的特异性IgA间接ELISA方法,分别检测7头试验猪在感染后第1、2、4、6、8、12、16和21天鼻拭子中抗P36、P46、P97R1的特异性IgA抗体滴度,并经过样品总蛋白浓度校准后,比较3种特异性IgA抗体在感染后21d内的分泌规律。结果显示,在感染后第6天,呼吸道中抗猪肺炎支原体P36、P46、P97R1的3种特异性IgA抗体分泌量均开始上升,于感染后第12天达到高峰,并可持续到第21天,且同1d内3种特异性IgA抗体之间的分泌量差异不显著(P>0.05)。本研究说明在猪肺炎支原体感染的早期阶段,P36、P46、P97R1蛋白均可诱发猪呼吸道产生特异性IgA抗体,且分泌量与分泌规律较为相似,差异不显著。
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