科研产出
噬菌体PZL-Ah1的生物学特性及其治疗嗜水气单胞菌感染的效果评价
《中国预防兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：噬菌体利用细菌作为天然宿主,可以特异性杀死宿主菌,尤其是治疗耐药菌株的感染有着巨大潜力。为了研究嗜水气单胞菌（A. hydrophila）噬菌体PZL-Ah1的生物学特性,评价其治疗A. hydrophila感染的效果,本研究以耐药性A. hydrophila（A-L138）作为宿主菌,从污水中分离获得了噬菌体PZL-Ah1,并重点研究了PZLAh1的生物学特性和PZL-Ah1治疗A. hydrophila感染的效果。电镜观察可见该噬菌体属于有尾病毒目（Caudovirales）短尾噬菌体科（Podoviridae）。将噬菌体和宿主菌以不同比例混合时,得出PZL-Ah1的最佳感染复数（MOI）为0.1,平板点滴法试验表明PZL-Ah1可以裂解7株气单胞菌,其中包括4株A. hydrophila和3株维氏气单胞菌（A. veronii）。结晶紫染色结果显示,PZL-Ah1对A. hydrophila已经形成的生物被膜（BF）有较强的破坏作用。该噬菌体潜伏期和爆发期均为20 min,PZL-Ah1在温度为20℃～40℃均有较好的活性,在pH4～pH10范围内非常稳定,对鲫鱼腹腔注射治疗剂量噬菌体PZL-Ah1的安全性试验显示,7 d观察期内,实验组鲫鱼均未出现游动缓慢、食欲减退、体质量下降等临床症状及死亡。治疗试验结果显示,宿主菌（A-L138）对鲫鱼最佳感染剂量为106cfu/尾,感染鲫鱼经PZL-Ah1治疗后存活率为100%,对照组全部死亡。结果表明PZL-Ah1有严格的宿主特异性,裂解能力强,能够显著提高感染A. hydrophila鲫鱼的存活率。本研究分离的噬菌体PZL-Ah1具有较高的裂解效率,能够有效清除宿主菌形成的BF;为噬菌体制剂治疗A. hydrophila感染提供了重要实验依据,也为噬菌体疗法的临床应用奠定了基础。
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不同类型氮肥对东北春玉米土壤N2O和CO2昼夜排放的影响
《中国农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探明不同类型氮肥对高纬度春玉米土壤N2O和CO2昼夜排放的影响,以期为高纬度地区农田氮肥高效利用管理和温室气体减排提供参考依据.[方法]通过田间微区施用缓释肥(SLN)、尿素添加硝化抑制剂+脲酶抑制剂(NIUI)和普通尿素(OU)试验,采用静态箱-气相色谱法,分别在苗前(S1)、苗期(S2)、拔节期(S3)、灌浆期(S4)、蜡熟期(S5)和休闲期(S6)6个时期取样测定,比较分析农田N2O和CO2的昼夜排放特性.[结果]施用不同类型氮肥,田间N2O和CO2昼夜排放均呈单峰变化趋势,S1—S6时期,土壤N2O排放高峰出现在12:00—19:00,排放低谷出现在下半夜(0:00—6:00),而S2—S5同一时期白天或夜晚各观测时段之间CO2排放通量差异不显著.S1和S2时期,N2O和CO2白天排放量分别占全天总排放量的56.2%—82.3%和53.6%—66.5%,而S3—S6时期,白天排放比例分别为40.6%—59.6%和43.7%—55.4%.SLN处理减少了S1时期土壤N2O的全天总排放量,而NIUI处理减少了S1、S2和S5时期土壤N2O的全天总排放量,其主要减排时段为S1时期的4:00—16:00和S2时期的12:00—22:00,其中S2时期18:00—19:00减排量占所有减排时段总量的57.3%,S5时期昼夜各时段均表现为减排作用,且昼夜减排比例相当;SLN对土壤CO2的主要减排时段为S1时期的全天和S3时期的15:00—4:00,其中S1时期12:00—23:00减排比例高达76.8%,S3时期夜晚减排比例占所有减排时段总量的68.1%;NIUI处理在玉米生长季5个测定日都表现出对CO2的减排作用,但昼夜减排比例存在差异,白天平均减排46.9%,最高减排达73.2%.同时发现,N2O和CO2排放通量日均值与9:00—10:00观测值存在极显著正相关关系(rN2O=0.938**,rCO2=0.977**),9:00—10:00可作为东北春玉米农田N2O和CO2昼夜排放研究的代表性取样时段.[结论]不同类型氮肥对土壤N2O和CO2昼夜排放通量的影响在不同时期表现各异.与常规施氮相比,缓释氮肥抑制了玉米苗前期土壤N2O昼夜排放,减排时段主要在9:00—22:00,而在其他测定日均促进了土壤N2O昼夜排放;尿素添加硝化抑制剂和脲酶抑制剂抑制了玉米苗前白天、苗期夜晚以及收获期白天和夜晚的土壤N2O排放,对拔节期至灌浆期土壤N2O的昼夜排放均表现为促进作用.在苗前测定日全天和拔节期测定日的夜晚,缓释肥对土壤CO2表现出减排作用;尿素添加硝化抑制剂和脲酶抑制剂降低了6个测定日土壤CO2的排放.
关键词： 不同氮肥;春玉米农田;N2O和CO2排放通量;昼夜变化
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miR1320表达水平与水稻白叶枯病抗性的关联性分析
《植物保护 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：水稻白叶枯病是由稻黄单胞菌水稻致病变种Xanthomonas oryzae pv.oryzae（Xoo）引起的一种细菌性病害,严重影响水稻的产量和品质。miR1320是水稻与Xoo互作中重要的调控因子。本研究在接种Xoo后的0、12、24 h分别检测了10个粳稻和8个籼稻品种中miR1320的积累和4个防卫基因的转录水平,测量了各品种叶片上的病斑长度,分析了miR1320的积累和防卫基因的表达与水稻白叶枯病抗性之间的相关性。结果表明:接种Xoo后,miR1320的表达模式在不同品种中有所不同;籼稻和粳稻对白叶枯病的抗性分别与接种后24 h和12 h时miR1320的表达量呈紧密负相关;且相对于防卫基因,miR1320更能反映品种间的抗病性。因此,miR1320可应用于评估水稻品种对白叶枯病的抗性,辅助水稻抗病种质的鉴定。
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我国北方香型粳稻资源遗传多样性及其香味基因Badh2的等位基因分析
《吉林农业大学学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了解我国北方香型粳稻资源遗传背景,利用SNP分子标记对54份香型粳稻和8份非香稻资源进行遗传多样性分析,并对香味基因Badh2进行等位基因分析。1K SNP分子标记基因分型结果共检测出2 244个等位位点,62份材料的相似系数为0.18～0.99,平均系数为0.81。聚类分析结果表明:62份材料共分为3个类群（相似系数为0.82）,然而类群并未按不同地域完全分开,其中只有第一类群材料大多来自吉林省。利用已开发的香味关联分子标记,鉴定54份香稻资源的Badh2基因等位变异类型,发现2份资源具有新等位变异,大部分材料为第7外显子和第2外显子变异类型。以上结果表明,我国北方香型粳稻资源的遗传距离较近、遗传多样性较低,这可为北方香型粳稻资源研究及香稻育种亲本选配提供参考依据。
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东北玉米耕作制度存在的主要问题与新型耕作制度展望
《玉米科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：东北是中国重要的商品粮生产基地,对确保国家粮食安全具有重要的战略意义.长期"重用轻养"的利用方式导致土壤严重退化,生产能力下降,如何实现东北黑土保护性利用是当前农业领域研究热点.玉米是东北第一大粮食作物,长期传统耕作制度不仅加速土壤退化,同时导致玉米秸秆"过剩".因此,如何通过耕作制度改革来解决东北现行耕作制度中存在的主要问题已迫在眉睫.本文从土壤结构、土壤肥力、土壤侵蚀和秸秆还田4个方面总结传统耕作制度存在的主要问题,分析主要新型耕作制度模式的优缺点,最后展望东北耕作制度发展方向,为黑土地保护和国家粮食安全提供借鉴.
关键词： 玉米;土壤;耕作制度
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大豆种子颜色遗传调控机制研究进展
《作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：大豆种子颜色是重要的形态标记和进化性状,在驯化过程中种皮从黑色逐渐演变成黄、绿、褐及双色,子叶从绿色进化出黄色.深色种子中含有较多的天然色素——花色素,具有药用和营养价值.因此,种子颜色的遗传调控机制研究对进化理论和实际应用均具有重要意义.种子中色素含量及组分构成导致多样的种皮颜色,其分子调控机制复杂.本文主要阐述了控制大豆种子颜色的遗传位点、相关基因与调控机制、类黄酮生物合成途径三方面的研究进展.具体介绍了9个经典遗传位点I、R、T、O、W1、K1、G、D1、D2和相关分子标记,以及位点间的相互作用;23个调控种子颜色的相关基因,与部分基因等位变异的调控机制;相关基因参与的类黄酮生物合成途径和主要代谢产物的生理功能.通过综述归纳了大豆种皮、种脐、子叶颜色的遗传调控研究进展,利用遗传位点、基因、等位基因调控机制及类黄酮代谢途径绘制出调控网路,以期为种子外观品质及花色苷组分遗传改良等研究提供参考.
关键词： 大豆;种子颜色;遗传调控;相关基因;类黄酮生物合成途径
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应用多重荧光PCR快速筛查作物中转基因成分研究
《玉米科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：通过对我国批准进口的和获得农业转基因生物安全证书的转基因玉米转化体的序列分析发现,除DAS40278-9和BLVA430101外,CaMV35s启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因和pat基因覆盖了21种玉米转基因转化体。通过引物组合筛选、反应体系优化、灵敏度测试、适用性测试等实验,建立了基于4个通用筛选元件及zSSIIb内源基因的五重荧光PCR和基于转化体特异性序列的二重荧光PCR检测转基因成分方法体系。方法参数测定结果表明,此方法特异性强、稳定性好,检测灵敏度达到0.05%。同时,此方法体系不仅适用于转基因玉米成分筛查,对大豆、水稻等多种作物进行转基因成分筛选鉴定也有良好的适用性。
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马铃薯卷叶病毒衣壳蛋白原核表达及多克隆抗体的制备
《东北农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本研究克隆马铃薯卷叶病毒（Potato leafroll virus,PLRV）衣壳蛋白（Coat Protein, CP）基因,改造其密码子,使其偏好原核表达,构建pCzn1-PLRV CP重组表达载体,通过大肠杆菌表达纯化,经Western Blot方法鉴定为PLRV CP蛋白,纯化后的蛋白免疫日本大耳兔,成功制备PLRV CP蛋白多克隆抗体,识别重组蛋白效价为128 000倍,识别PLRV叶片的效价为32 000倍,经Western Blot方法分析,其特异性良好。本研究为PLRV检测方法的建立及脱毒种薯的检测提供了必需的生物材料。
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马铃薯地方主栽品种"春薯4号"遗传转化体系的建立
《吉林农业大学学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以吉林省马铃薯主栽品种"春薯4号"（Solanum tuberosum cv. Chunshu 4）无菌试管苗为材料,以茎段为外植体,采用L9（33）正交试验设计,研究植物激素对愈伤组织诱导和分化的影响;通过对遗传转化体系中的筛选剂浓度、抗生素种类及浓度等影响因素的优化,初步建立了马铃薯"春薯4号"的遗传转化体系。结果表明:最适合愈伤组织诱导的培养基配方为MS+2.0 mg/L 6苄氨基嘌呤（6-BA）+0.2 mg/L萘乙酸（NAA）+0.3 mg/L 2,4-二氯苯酚代乙酚（2,4-D）,"春薯4号"茎段的愈伤组织诱导率最高,为98.57%,愈伤组织为淡绿色,呈致密的哑铃形;最适合愈伤组织分化的培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L吲哚乙酸（IAA）+1.0 mg/L玉米素（ZT）,愈伤组织的分化出苗率最高,为54.1%,幼苗粗壮,畸形苗少;在遗传转化体系中,筛选剂双丙氨膦浓度为6.0 mg/L时,为愈伤组织最适筛选压,为4.5 mg/L时,为再生苗最适筛选压;农杆菌抑菌剂最适组合为500 mg/L头孢霉素+200 mg/L羧苄青霉素。
关键词： 马铃薯 农杆菌介导法 遗传转化体系 正交试验 植物激素
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