科研产出
柑橘木虱酵母双杂交cDNA文库的构建及评价
《昆虫学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了探索研究柑橘木虱Diaphorina citri与柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)病原菌的相互作用蛋白,本研究运用RNA转录中5'末端转换机制(Switching Mechanism at 5'End of the RNA Transcript,SMART)技术构建了柑橘木虱的酵母双杂交cDNA文库。以实验室饲养的柑橘木虱为材料,提取总RNA,经反转录后合成ds cDNA,两端添加同源重组序列,并用层析柱纯化;ds cDNA与文库质粒pGADT7-Rec在酵母Y187感受态细胞内发生同源重组,柑橘木虱cDNA重组到文库质粒上,完成酵母双杂交cDNA文库的构建。结果表明,文库容量达到106,扩增文库滴度为2.23×107cfu/mL,cDNA插入片段的平均长度大于750bp,达到试剂盒建库要求。另外,我们利用构建的酵母双杂交文库,以HLB病原菌Candidatus Liberibacter asiaticus(CLas)的两个膜蛋白ORF420和ORF3420作为诱饵进行筛选试验,但是并没有得到阳性克隆。柑橘木虱酵母cDNA文库的构建为开展柑橘木虱与柑橘黄龙病病原菌互作机制的研究奠定了基础。
关键词： 柑橘木虱 柑橘 黄龙病 酵母双杂交cDNA文库 膜蛋白 蛋白质互作
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加强农业科研单位财会队伍建设的思考
《农业科研经济管理 》 2013
摘要：随着财政对农业科研投入逐年加大以及国家财政管理体制改革不断深化,对农业科研单位财会人员素质也提出了更高要求。文章首先总结了浙江省农业科学院在财会队伍建设过程中在管理体制改革、素质能力培养、考核评价机制建设等方面的实践及取得的成效。同时分析了在财会队伍建设中仍面临的主要问题,并从转变财会工作职能、制定财会人才规划、实施轮岗制度、建设"两型"队伍、完善业绩考评以及提高职业素质等方面提出进一步加强财会队伍建设的思路。
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不同花粉授粉对玉环柚品质及裂果的影响
《中国南方果树 》 2013 北大核心
摘要：采用土柚、琯溪蜜柚、异源四倍体体细胞杂种Zj(甜橙类+柠檬)、永嘉早香柚、永嘉早香柚+梨形文旦(1∶1)等5种不同花粉对采前易裂果的玉环柚进行了异花授粉试验。结果表明,5种花粉异花授粉后玉环柚的裂果率都显著降低,除琯溪蜜柚花粉授粉裂果率仍高达38.4%外,其余异花授粉处理的裂果率在10%～16%之间。Zj授粉后基本保持了玉环柚的无核性状,其他4个处理授粉后果实均含有种子。Zj、永嘉早香柚+梨形文旦授粉的果实风味最佳,酸甜适口、汁多、化渣。综合考虑各个指标,供试花粉中Zj花粉是玉环柚最理想的授粉花粉,其次为永嘉早香柚+梨形文旦混合花粉。
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水稻幼苗叶色温敏感突变体的鉴定及其基因定位
《中国水稻科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：在粳稻嘉花1号水稻品种经60 Coγ辐照后代中筛选到一个幼苗叶色温敏感突变体tsl11。与野生型嘉花1号相比,该突变体在20℃下,幼苗叶色呈黄色;叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量分别下降94.6%、88.2%和91.5%;且电镜结果显示叶绿体内部结构不完整。而在高温(32℃)条件下突变体的叶色表型、光合色素含量和叶绿体发育与野生型基本一致,显示出明显的温度敏感性。遗传分析表明,该突变体叶色性状受1对隐性核基因控制,暂命名为tsl11(thermo-sensitive leaf-color11)。以该突变体与籼稻培矮64S杂交,构建4928株突变型F2,利用SSR和InDel分子标记将tsl11基因定位于水稻第11染色体上的ID14506与ID14653之间的147kb的区间内。
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木屑栽培秀珍菇培养料配方筛选试验
《食用菌 》 2013
摘要：秀珍菇的名称来源于我国台湾,取其秀气而珍贵的意思。秀珍菇不仅营养丰富,而且味道鲜美,蛋白质含量比香菇、草菇更高,接近肉类,比一般蔬菜高3～6倍,秀珍菇含有17种以上氨基酸,更为可贵是,它含有人体自身不能制造,而食物中通常又缺乏的苏氨酸、赖氨酸、高氨酸等。秀珍菇是
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呋喃西林代谢物酶联免疫检测方法的建立
《安徽农业科学 》 2013 北大核心
摘要：[目的]建立动物性食品中呋喃西林代谢物ELISA检测方法。[方法]通过制备特异性强的单克隆抗体,采用间接竞争ELISA法建立动物性食品中呋喃西林代谢物ELISA检测方法,并研制出对动物性食品中呋喃西林代谢物残留检测的试剂盒。[结果]该试剂盒标准曲线的IC50值为0.267 7μg/L,最低检测限为0.1μg/kg,样本加标回收率范围为79.5%～95.6%,变异系数为7.6%～9.7%。在交叉反应试验中,对呋喃西林的交叉反应率为25%,与其他药物的交叉反应率均小于1%,表明该方法具有很强的特异性。[结论]该方法灵敏度、准确度、精密度均较高,能满足兽药残留的检测要求,且检测时间短(45 min),样本前处理简单、检测成本低,适合于大量样本中呋喃西林代谢物残留检测的快速筛选。
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兔波氏杆菌fimN蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立
《中国预防兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为建立兔波氏杆菌(Bb)的快速检测方法,本研究采用纯化重组兔Bb fimN蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA抗体检测方法。通过优化反应条件,确定其检测临界OD450nm值为0.295。检测结果显示,该方法对兔Bb标准阳性血清检测的敏感性为1∶216;而与兔巴氏杆菌、兔出血症病毒阳性血清无交叉反应。重复性试验表明,其组内和组间变异系数均小于10%。采用建立的间接ELISA方法对浙江省5家兔场采集的150份兔血清样品的检测阳性率为55%。该方法的建立为进一步研发兔Bb ELISA诊断试剂盒提供了实验依据。
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