科研产出
抗恩诺沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及竞争ELISA试剂盒的研制
《核农学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:利用合成的完全抗原(BSA-ENR)免疫小鼠,通过细胞融合技术和间接竞争ELISA筛选出了能分泌恩诺沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以此为基础研制恩诺沙星残留检测的竞争ELISA试剂盒(competitive ELISA ENR-Kit),并测定其性能。结果表明:筛选出的2株杂交瘤细胞,单抗亚类均为IgG1型,其中4G1-B3株的ENR mAb间接ELISA效价为1:1.024×106,亲和常数(Ka)为9×1010L/mol;竞争ELISA试剂盒的线性检测范围为0.05~101.6μg/L、灵敏度0.05μg/L、半数抑制浓度(IC50)1.1μg/L,与其他化合物的交叉反应率(CR%)均小于0.01%,鸡肉样、鸡肝样、鱼肉样和牛奶样的平均添加回收率分别为81.5%8、7.6%、84.3%和95%,不同基质添加恩诺沙星标准品做竞争ELISA对ENR-Kit检测结果影响小,试剂盒保存期6个月以上。结果说明该竞争ELISA试剂盒具有快速、敏感、特异、简便等特点,适用于ENR残留的快速检测。
关键词: 恩诺沙星 杂交瘤细胞 竞争ELISA试剂盒


豫东潮土长期定位施肥对设施番茄肥料利用率的影响
《河南农业科学 》 2008 北大核心
摘要:通过8年9个不同施肥方式处理的定位试验,研究了大棚番茄对氮磷钾肥的当季和累积利用率。结果表明:在施氮量相同的情况下,常量施用有机肥配合化肥的处理(MNPK)番茄肥料利用率最高,N,P,K利用率分别为60.0%,29.8%,50.3%。氮肥利用率大小顺序为:MNPK(有机无机肥配合)>NPK(氮磷钾化肥)>NP(氮磷配合,不施钾肥)>1.5MNPK(高量有机无机肥配合)>NK(氮钾肥配合,不施磷肥)>N(单施氮肥,不施磷钾肥)。养分不均衡处理N,NK,PK(磷钾配合,不施氮肥)对肥料的利用率最低。磷肥的当季利用率要小于氮肥利用率,8年中有一定的累加效应。磷肥利用率大小顺序为MNPK>NPK>NP>1.5MNPK>PK。钾肥利用率大小顺序为MNPK>1.5MNPK>NPK>NK>PK。肥料用量愈大,肥料利用率愈低,MNPK处理的肥料使用量是1.5MNPK处理的67%,而该处理的N,P,K的平均当季利用率分别是1.5MNPK处理的1.5倍、1.6倍、1.2倍。


猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因的克隆、表达及纯化
《中国预防兽医学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:利用RT-PCR技术克隆了猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2蛋白基因,测序结果表明:序列长度为270bp,包含258bp的编码区,编码85个氨基酸,与GenBank中西班牙分离株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均为99%;将该基因成熟肽部分亚克隆至原核表达载体pGEX-6p-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后,进行SDS-PAGE初步分析,在34ku位置有1条蛋白条带,与预期结果一致。通过GST亲和纯化获得了较高纯度的重组融合蛋白,Western blot结果表明,纯化后的重组融合蛋白可与兔抗全囊囊尾蚴血清发生特异性反应。排泄分泌抗原Ts8B2的成功表达、纯化为进一步研究该蛋白在抗体检测中的应用奠定了基础。


游离小孢子培养育成早熟大白菜新品种‘豫新58’
《园艺学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:‘豫新58’是采用游离小孢子培养双单倍体育种技术育成的大白菜一代杂种。该品种早熟,生育期58~60d。叶球矮桩叠抱,单球质量1.5~2.0kg。叶质柔嫩,口感略甜,风味佳,生食、熟食皆宜。净菜产量68.8t·hm-2。抗病性好。


猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h基因的克隆及原核表达
《中国病原生物学杂志 》 2008 CSCD
摘要:目的研究猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h基因的克隆及原核表达。方法利用RT-PCR技术从猪囊尾蚴中扩增排泄分泌抗原M13h蛋白去除信号肽序列的基因,对其进行序列分析,并亚克隆至原核表达载体pET43a上,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组菌株表达融合蛋白,并用Western blot对纯化后的融合蛋白进行鉴定。结果从猪囊尾蚴中克隆到去除信号肽序列的M13h的基因,其序列长度为204 bp,包含198 bp的编码区,与GenBank中西班牙分离株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均为100%,与韩国的M13h蛋白的核苷酸与氨基酸序列同源性分别为95.7%和95.3%;经SDS-PAGE电泳鉴定,重组质粒表达产物分子质量单位约74 ku,其中M13h基因表达蛋白的分子质量单位为7.87 ku,与预期结果一致;经Western blot检测,纯化后的复性蛋白质可与兔抗全囊囊尾蚴血清发生特异性反应。结论pET43M13h重组质粒表达产物具有较高的保守性和特异性,可用于猪囊尾蚴病的免疫诊断。


河南小麦托起中国粮食安全的希望
《种业导刊 》 2008
摘要:河南省重大科技专项"小麦新品种郑麦366、矮抗58优质高产集成技术研究与示范"于2008年7月启动,这是"河南省中长期科技发展规划"和"十一五"发展纲要的一项重要内容,也是农业科研领域的

