科研产出
小菜蛾中肠氨肽酶基因PxAPN5的克隆、原核表达及蛋白质同源建模分析
《昆虫学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】克隆和表达小菜蛾Plutella xylostella氨肽酶基因,并进行基因序列分析和同源建模分析。【方法】以小菜蛾中肠c DNA为模板克隆分析氨肽酶基因序列,原核表达氨肽酶蛋白并进行酶活性测定,应用配体印迹分析氨肽酶与Cry2Ab蛋白的结合,通过蛋白质建模对突变位点进行分析。【结果】从小菜蛾中肠c DNA扩增出氨肽酶基因,该基因全长2 853 bp,编码950个氨基酸,预测蛋白分子量为107.3871 k Da,等电点为5.24;进化树分析显示,克隆得到的氨肽酶基因属于APN家族5,将其命名为Px APN5(Gen Bank登录号:KM034756)。Px APN5蛋白具有鳞翅目昆虫氨肽酶蛋白的保守性特征,即含有N-糖基化位点、O-糖基化位点和GPI锚定位点,具有"HEXXH"锌蛋白酶结构域和C端跨膜区域。在大肠杆菌Escherichia coli中原核表达Px APN5,表达产物经SDS-PAGE电泳,在110 k Da附近出现特异性条带;酶活性测试显示菌体破碎上清液具有氨肽酶活性,比活力为1 047.2 U/g。配体印迹结果显示表达的Px APN5能与Cry2Ab蛋白特异性结合。多序列比对结果表明,与其他已报道的小菜蛾氨肽酶相比,Px APN5氨基酸序列有3个保守性位点发生了突变,并通过蛋白质建模的方式表征突变位点。【结论】本研究成功克隆和表达了具有氨肽酶活性的小菜蛾氨肽酶,并发现其能与Cry2Ab蛋白特异性结合;通过蛋白质建模对氨肽酶突变位点的特征及功能进行了预测。这些结果对小菜蛾氨肽酶的功能性研究提供了理论基础。
关键词： 小菜蛾 氨肽酶基因 基因分析 原核表达 酶活性 配体印迹 同源建模
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秋水仙素对文心兰离体诱变的影响
《福建农业学报 》 2014
摘要：以秋水仙素为诱变剂,结合组织培养技术,对文心兰丛生芽和原球茎进行诱变试验,并应用分子标记技术检测诱变后代的变异情况。结果表明:培养基添加秋水仙素混合培养法是文心兰丛生芽诱变的最佳途径,以添加500mg·L-1的秋水仙素诱导10d效果最佳,植株变异率高达26.7%,变异植株类型包括植株粗壮、多叶、叶片变宽、变厚、矮化、叶片线艺等;经5~6次继代培养,部分变异株系仍保持稳定遗传性状,其中筛选出的稳定绿叶金边、金叶绿边变异株系RAPD标记表明其在DNA水平上发生了变异,为文心兰育种提供了新的方法和思路。
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不同浓度氟对茶树幼苗叶片叶绿素荧光特性的影响
《热带亚热带植物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为探讨氟对茶树[Camellia sinensis(L.)O.Kuntze]叶片叶绿素荧光特性的影响,采用盆栽沙培法,用不同浓度的Na F溶液处理6周,对茶树叶片的叶绿素荧光特性进行研究。结果表明,用600 mg L–1的氟处理,茶苗叶片的OJIP曲线O相呈小幅度上升,P相下降得非常明显,IP相显著下降,出现清晰的L点(150μs)和K点(300μs);经过氟处理的茶苗叶片I点、J点的相对可变荧光和耗散能增加;荧光参数RC/CSo、ETo/ABS、PIabs、PIcs等明显下降,而DIo/RC、DIo/CSo和DIo/ABS等参数大幅度增加;叶片氟含量与ETo/TRo、REo/ABS、PICS呈负相关,与DIo/RC呈正相关。因此,氟胁迫处理削弱了茶树叶片的光合电子传递能力,影响了光合机构的作用,同时叶片以增加自身热耗散来防止受到光抑制和光破坏。
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“祥龙”火龙果引种表现及关键栽培技术
《中国南方果树 》 2014 北大核心
摘要：火龙果Hylocereus undatus Britt.et Rose是仙人掌科,量天尺属多年生攀缘性热带亚热带肉质植物,台湾20世纪90年代从国外引种驯化改良。近年来,广东、广西等省(区)先后从台湾引进"祥龙"火龙果种植,2007年福建省农业科学院果树研究所从广东引进该品种。经栽培观察,"祥龙"火龙果表现出适应性强、果大、质优、速生、早结、丰产、经济效益高、无大小年等优点。扦插苗4月定植后第2年开
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鸭传染性浆膜炎二价灭活疫苗制苗用菌株的筛选
《福建农业学报 》 2014
摘要：选取鸭疫里默氏菌血清1型和2型菌株各6株进行毒力比较,结果发现不同菌株的毒力略有差异。选择毒力较强的鸭疫里默氏菌血清1型和2型菌株各3株制备灭活油乳剂疫苗,免疫6日龄鸭后14d以同血清型菌株进行攻毒保护试验,RAf63株和RAf34株制备的疫苗免疫保护率最高,是理想的制苗用菌株。
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