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芒果SSR-PCR反应体系的优化

热带作物学报 2010 CSCD

摘要:通过正交实验,以芒果品种金煌芒为材料,对影响芒果SSR-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs、Taq酶、模板DNA、引物这5个因素进行了优化。结果表明,各因素水平变化对PCR反应影响的显著性依次为:模板DNA>dNTPs>引物>Mg2+>Taq酶。最终确立SSR反应体系的最优条件为:20μL体系中,10×buffer2μL,模板DNA80ng,dNTPs0.4mmol/L,引物0.2μmol/L,Mg2+1.8mmol/L,Taq酶0.75U。

关键词: 芒果 SSR 正交设计 体系优化

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乙烯刺激橡胶树胶乳黄色体蛋白差异初析

热带作物学报 2010 CSCD

摘要:巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)胶乳中的黄色体作为乳管细胞的一种细胞器,其稳定性受乙烯刺激影响。该试验从蛋白差异角度,选取未开割胶树,应用双向凝胶电泳技术(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE),比较在乙烯刺激与未刺激条件下,黄色体蛋白的变化情况。结果表明,按蛋白表达量变化差异3倍及以上分析,胶树在乙烯刺激24h后,上调蛋白5个,下调蛋白2个;在乙烯刺激48h后,上调蛋白7个,下调蛋白1个;综合3个处理,先上调后下调的蛋白8个;先下调后上调的蛋白2个。应用质谱技术鉴定了其中部分差异表达蛋白,并进行初步功能分析,表明未开割橡胶树胶乳黄色体受乙烯刺激后,黄色体蛋白发生不同程度复杂变化,各组处理间变化明显。

关键词: 橡胶树 黄色体蛋白 差异表达 乙烯

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巴西橡胶树的脂酰辅酶A还原酶cDNA克隆及其序列分析

植物生理学通讯 2010 北大核心 CSCD

摘要:从巴西橡胶树差减cDNA文库中筛选到一个与脂酰辅酶A还原酶同源性较高的基因片段,根据该基因片段序列信息,设计特异引物,采用RACE进行差异片段的5'和3'端的扩增,获得长度为1365bp的cDNA克隆R28(GenBank登陆号:AY461413)。序列分析表明,该基因包含1149bp的开放阅读框,5'-UTR为96bp,3'-UTR为128bp,编码382个氨基酸,推测其蛋白质的分子量为43.5kDa,等电点为8.97,有一个跨膜螺旋区(187至215位氨基酸)和1个由17个氨基酸组成的信号肽(1至17位氨基酸)。R28含有脂酰辅酶A还原酶的保守区(NADP结合蛋白保守区),推测该基因是一个脂酰辅酶A还原酶基因。

关键词: 巴西橡胶树 胶乳 酰基辅酶A还原酶

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DNA分子标记及其在木薯遗传育种中的应用

广东农业科学 2010 北大核心 CSCD

摘要:介绍了RFLP、RAPD、AFLP和SSR等4种常用的DNA分子标记技术,以及DNA分子标记技术在木薯育种中的应用,包括基因标记与定位、遗传图谱构建、QTL分析、标记辅助选择等,简要分析了分子标记在木薯辅助育种中存在的问题并对其应用前景进行了展望。

关键词: DNA分子标记 木薯 遗传育种

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合成甘蓝型油菜中双隐性雄性核不育材料的发现及遗传规律分析

热带亚热带植物学报 2010 北大核心 CSCD

摘要:从甘蓝型油菜与白菜型油菜的种间杂交获得的甘蓝型油菜(Brassica napus)中发现了雄性不育单株,兄妹交株系和不育株与甘蓝型油菜常规杂交F1和F2株系的育性分离分析表明,该不育材料属于双隐性雄性核不育类型。利用育性分离株系的可育株自交和可育株与不育株间兄妹交等方法筛选出7个纯合可育株系,等位测验表明这7个纯合可育株系(B1~B7)中存在两种基因型:Ms1Ms1ms2ms2和ms1ms1Ms2Ms2。该材料对油菜核不育基因定位和杂种优势利用研究有重要意义。

关键词: 杂种优势 种间杂交 育性分离 基因型

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我国主要木薯品种AFLP多态性分析

西南农业学报 2010 北大核心 CSCD

摘要:采用扩增片段长度多态性(AFLP)分子标记技术,利用筛选出的6对多态性较强的引物组合(GAA/CAC、GAA/CAG、GAA/CTT、GAG/CTC、GAT/CTC、GAT/CTT)对11个木薯品种进行遗传基础分析,初步建立了11个木薯品种的AFLP指纹图谱。经PCR扩增,6对引物共获得3560个片段,其中,多态性条带2438个,特异性条带90条,平均多态性条带比率0.68。其遗传相似性系数变化范围在0.578~0.774,多样性水平属中等。通过UPGMA聚类分析表明,在遗传距离0.345处可以将11个木薯品种处分为3类,其中华南8号、华南205和华南6068木薯为一类,GR911和华南124为一类,其他为第三类。

关键词: 木薯 AFLP标记 遗传多样性

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菜心苯丙氨酸解氨酶基因克隆与序列分析

西北植物学报 2010 北大核心 CSCD

摘要:通过同源克隆和RACE相结合的方法,首次从菜心中克隆了苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因的全长cDNA,命名为BcPAL1(GenBank登录号为GU245694)。BcPAL1全长2 476 bp,开放阅读框2 166 bp,编码721个氨基酸。经氨基酸序列多重比较发现,BcPAL1编码的氨基酸序列与拟南芥、烟草、甘蓝型油菜等植物的PAL氨基酸序列同源性大于90%,BcPAL1编码的氨基酸序列包含与拟南芥、烟草PAL蛋白质相同的脱氨基位点和催化活性位点。基于氨基酸序列的PAL系统进化树分析结果显示,BcPAL1编码的氨基酸序列与十字花科类植物(如拟南芥)的PAL聚为一支,说明两者的亲缘关系较近。

关键词: BcPAL1 苯丙氨酸解氨酶 菜心 基因克隆 序列分析

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根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立

作物学报 2010 北大核心 CSCD

摘要:为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不影响转化效率。2.2万个花药愈伤组织经EHA105菌株侵染后,转入未添加AS的培养基,22℃共培养6d,通过50mgL-1卡那霉素抗性筛选、叶片GUS染色、uidA和NptII基因PCR特异扩增、PCR产物测序及NptII基因Southern检测,鉴定出11株转基因植株,并通过嫁接和次生体胚发生,获得来自8个转基因株系的681株转基因植株,移栽成活253株。

关键词: 橡胶树 根癌农杆菌 花药愈伤组织 遗传转化 次生体胚发生

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橡胶树PR107气刺微割排胶影响面胶乳生理分析

林业科学 2010 北大核心 CSCD

摘要:研究未刺激、乙烯利刺激、乙烯气体刺激胶树微割排胶影响面内不同高度部位胶乳的蔗糖、无机磷、总固形物含量和水势,并比较分析同种处理割胶前后及不同处理间割胶前后胶树胶乳中这些生理参数的差异变化,结果表明:乙烯气体刺激较其他2种处理能够较明显扩大胶树排胶影响面,有利于增加胶树胶乳产量。并提出用开割前和停排后的胶乳干含差来指导割胶生产。

关键词: 橡胶树 微割 排胶影响面 生理参数

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纳米细菌纤维素的生物合成

材料导报 2010 北大核心 CSCD

摘要:采用木醋杆菌菌株A.xylinumHN001,以椰子水为培养基,生物合成了纳米细菌纤维素(NBC)。研究了影响纳米细菌纤维素合成的几个主要因素:培养时间、培养基初始pH值和培养方式。实验所得NBC的产率为1.2g/L。采用凝胶渗透色谱仪(GFC)测定了相对分子质量及其分布,其相对分子质量分布指数(MMD)约为1.0,说明相对分子质量均匀。采用透射电镜测试了形貌,证明NBC分子近似球形,直径约100nm。NBC冷冻干燥后采用红外光谱确证了结构。

关键词: 纳米细菌纤维素 生物合成 相对分子质量

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