一种快速简便的植物病原真菌基因组DNA提取方法

刘少华; 陆金萍; 朱瑞良; 戴富明; 《植物病理学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：尿素提取法是最新报道的一种植物拟南芥基因组DNA的提取方法,但是还没有应用于植物病原真菌DNA的提取。本研究采用改进的4种不同的方法(尿素提取法、CTAB提取法、氯化苄提取法以及SDS-CTAB提取法),分别对5种分类地位不同的植物病原真菌(草莓疫霉病菌、西瓜蔓枯病菌、草莓炭疽病菌、西瓜枯萎病菌和水稻纹枯病菌)的基因组DNA进行提取和比较。结果表明,尿素提取法和SDS-CTAB法均能提取到所有5种真菌的基因组DNA,而尿素提取法提取DNA的效率更高、质量更好,操作步骤更为快速简单。

关键词： 植物病原真菌 基因组DNA 尿素提取法

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基因体外定向分子进化技术在农业中应用的研究进展

熊爱生; 姚泉洪; 章镇; 彭日荷; 庄静; 徐芳; 刘金戈; 朱宏; 《中国农学通报 》 2005

摘要：农业生物工程在农业生产中发挥着重要的作用,已经在除草剂抗性,抗虫,抗病和饲料添加剂 等方面取得了良好的成绩。体外定向分子进化技术是改造基因的有效手段,通常可以用来提高酶的比 活,改变酶动力学特征,产生新的底物特异性,产生新的产物和改变酶的最适条件。该技术已经成功的 应用在农业的各个领域。主要从除草剂抗性,抗虫,抗病和饲料添加剂4个方面对基因体外定向分子 进化技术在农业中的应用作一综述。

关键词： 体外定向分子进化技术 DNA改组 农业应用

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K88 ad ETEC菌毛蛋白亚基基因faeC的克隆、表达及多克隆抗体的制备

申慧峰; 王玉炯; 黄亚红; 梁婉琪; 周智爱; 潘爱虎; 钱炳俊; 武爱波; 张大兵; 《上海农业学报 》 2005 CSCD

摘要：为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理,从K88adETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段faeC,然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,获得重组质粒pET30C,并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPTG诱导后,经过SDS PAGE分析表明该菌株可以表达FaeC蛋白(16.9kDa),且重组蛋白主要以包涵体形式存在,约占菌体蛋白的30%。用分离纯化的重组FaeC蛋白免疫小鼠,获得FaeC的鼠抗血清,经免疫学分析表明,利用此重组蛋白制备的抗血清与FaeC重组蛋白及K88adETEC的菌毛蛋白都能发生特异性抗原抗体反应。

关键词： K88adETEC faeC 重组蛋白 纯化 多克隆抗体

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农业图书馆人力资源管理模式探讨

谢坤生; 《农业图书情报学刊 》 2005

摘要：文章从现代图书馆人力资源管理的特征谈起 ,分析了目前农业图书馆人力资源管理上存在的问题 ,构建农业图书馆人力资源KEPB模式 ,突出了人力资源管理中的人性化管理

关键词： 农业图书馆 人力资源管理 人性化 模式

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丹麦养猪业考察报告

苏明申; 郭娟; 张忠明; 谈永松; 刘东亮; 陈波; 《长江大学学报(自科版)农学卷 》 2005

摘要：介绍了丹麦猪品种、生产、疾病防治、价格、饲料与服务组织的一些概况。原种猪主要是兰德瑞斯(LL)、大约克夏(YY)、杜洛克(DD)与汉普夏(HH),兰德瑞斯与大约克夏正反交生产的优质二元杂交母猪作为种母猪用,以杜洛克、汉普夏或大约克夏公猪为父本与杜洛克为母本生产的优质一元或二元杂交公猪作生产中的终端父本,三元杂交猪或四元杂交猪是主要的生产性内猪。露天猪场多用杜洛克为母本,兰德瑞斯或大约克夏为父本,杂交生产的 LD 或 YD 作为内猪。用购买的精液或自行采精稀释成的备用精液人工授精在猪生产中应用普遍。用接种疫苗法与抗生素防治法防止猪场疾病的发生。依据市场情况,猪价每周变动一次。猪场的饲料有购买与自制两种方式。农业服务体系较为发达。

关键词： 养猪业 猪场 猪品种 疾病防治 价格 丹麦

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耐热甘蓝“早夏-16”的选育

任云英; 陈绵秀; 童尧明; 《当代蔬菜 》 2005

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RT-PCR检测犬粪便中的冠状病毒

王权; 张建武; 李建; 潘饶霖; 刘佩红; 陈燕军; 顾惠明; 胡永强; 周锦萍; 《畜牧与兽医 》 2005 北大核心

摘要：根据犬冠状病毒(caninecoronavirus, CCV) 的S基因序列, 用计算机设计并合成了1对引物P1、P2, 以此引物及以从美国进口的CCV疫苗的反转录产物为模板, 初步建立了检测CCV的RT PCR。将纯化的PCR产物成功地克隆到pGEM T easy载体中, 鉴定、测序并进行同源性分析。结果表明, 与1 71和UCD 1株同源性分别为91 5%和94 3%。该RT PCR能对疫苗中CCV及CCV参考株USCV B1的S基因进行特异性地扩增,长度为575bp, 对犬的其他病毒及CRFK细胞未能扩增出任何片段, 该RT PCR能检测出0 5μLCCV培养液/2g粪便。用建立的RT PCR在上海对50条犬粪便进行检测, 结果表明CCV阳性6例。本研究建立了检测犬粪便中的CCV的RT PCR, 能用于犬冠状病毒流行病学调查。

关键词： 犬冠状病毒 RTPCR 粪便

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毛头鬼伞富铬深层发酵条件的优化

刘艳芳; 张劲松; 杨焱; 唐庆九; 《微生物学通报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：在筛选出最佳发酵培养基的基础上,对毛头鬼伞富铬深层发酵培养条件进行了优化。以有机铬产量为主要指标,筛选出的最佳发酵培养条件为:CrCl3·6H2O的添加量为200mg/L,培养基初始为自然pH,接种量为8%~10%,装液量为80mL/250mL三角瓶,转速100r/min,26℃恒温培养5d,有机铬的产量达1597·88μg/100mL发酵液,铬富集率达9·09%。

关键词： 毛头鬼伞 富铬 深层发酵

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猪卵母细胞、胚胎玻璃化冷冻初步研究

张德福; 刘东; 王邵凯; 王少兵; 芮荣; 汤琳琳; 《中国畜禽种业 》 2005

摘要：本试验研究了不同冷冻承载工具,玻璃化溶液处理时间和不同发育阶段对猪卵母细胞超低温冷冻保存的影响。(1)比较凝胶上样管(gel-loadingtip;GLT)、开放式拉长麦管(openpulledstraw;OPS)、玻璃微细管(glassmicropipette;GMP)保存法对卵母细胞冷冻效果的影响。(2)比较在EFS40中处理30s,1min,2min对卵母细胞冷冻效果的影响。(3)比较MII期和GV期的卵母细胞冷冻效果。结果表明,(1)GLT法体外存活率为52.8%略优于OPS法(50.5%)和GMP法(51.1%)。(2)解冻后30s组和1min组的体外存活率分别为48.82%、43.9%,显著优于2min组的18.8%(p<0.05)。(3)解冻后MII期体外存活率为53.6%,显著优于GV期的22.0%(p<0.05)。(4)冷冻对猪卵母细胞的发育潜能影响较大,用新鲜精液进行体外受精,仅有4.9%的受精卵分裂,极显著低于对照组的49.5%(P<0.01);并且发育至4细胞期的比例为1.7%,未能发育至8细胞期。胚胎在25%VS1冷冻液中平衡20分钟后将胚胎在65%VS1冷冻液中平衡20秒,然后将胚胎再放入到100%VS1冷冻液中在30秒的时间内装入GLT管投入到液氮中进行保存。扩张囊胚的冷冻效果要明显优于孵化囊胚。

关键词： 猪 卵母细胞 胚胎 玻璃化冷冻

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小菜蛾危害引起的秋花菜产量损失及其防治指标研究

赵胜荣; 袁永达; 於文俊; 张沪同; 王冬生; 《上海农业学报 》 2005 CSCD

摘要：利用笼罩接虫的方法,测定了秋花菜不同生育期小菜蛾幼虫数量与产量损失率(%)的关系。结果表明,在花菜的还苗期、莲座期、球花始期、球花中后期,随着接入虫数的增加,花菜产量均逐渐下降。还苗期、莲座期、球花始期和球花中后期小菜蛾幼虫的数量(X)与产量损失率(Y)的关系分别为:Y=-0.7969+1.0880X+2.0234X2、Y=-2.4489+7.4585X-0.2433X2、Y=-1.4557+7.6682X-0.2470X2、Y=0.8668-0.3096X+0.0905X2。花菜在不同的生育阶段对小菜蛾危害的敏感性不同,以球花初期最为敏感,其次为莲座期和还苗期。在球花初期,低虫量的小菜蛾就可能引起花菜产量明显的损失,因而此期的防治最为关键。当球花初期单株虫量达到0.5～1头,球花中后期单株虫量达到4～6头时需要进行防治。

关键词： 小菜蛾 花椰菜 产量损失 防治指标

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