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K88 ad ETEC菌毛蛋白亚基基因faeC的克隆、表达及多克隆抗体的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 申慧峰 1 ; 王玉炯 1 ; 黄亚红 2 ; 梁婉琪 3 ; 周智爱 4 ; 潘爱虎 3 ; 钱炳俊 5 ; 武爱波 6 ; 张大兵 3 ;

作者机构: 1.宁夏大学生命科学学院

2.南京大学生命科学学院

3.上海市农业科学院农业生物技术研究中心

4.上海市农业科学院畜牧兽医研究所

5.复旦大学生命科学学院

6.上海交通大学生命科学技术学院

关键词: K88adETEC;faeC;重组蛋白;纯化;多克隆抗体

期刊名称: 上海农业学报

ISSN: 1000-3924

年卷期: 2005 年 21 卷 02 期

页码: 7-12

收录情况: CSCD

摘要: 为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理,从K88adETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段faeC,然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,获得重组质粒pET30C,并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPTG诱导后,经过SDS PAGE分析表明该菌株可以表达FaeC蛋白(16.9kDa),且重组蛋白主要以包涵体形式存在,约占菌体蛋白的30%。用分离纯化的重组FaeC蛋白免疫小鼠,获得FaeC的鼠抗血清,经免疫学分析表明,利用此重组蛋白制备的抗血清与FaeC重组蛋白及K88adETEC的菌毛蛋白都能发生特异性抗原抗体反应。

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