科研产出
异烟酸甲酯/α-环糊精微胶囊制备及其对蓟马的引诱效果分析
《植物保护学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为研制环境友好型和可控释放的蓟马信息化合物新剂型，通过饱和溶液搅拌法制备异烟酸甲酯/α-环糊精微胶囊，采用L9（34）正交试验确定最佳包埋条件，通过红外光谱、X-衍射和扫描电镜对微胶囊结构进行分析，探讨微胶囊的释放动力学，并应用于田间大棚诱集蓟马明确其引诱效果。结果显示，微胶囊最佳包埋条件是温度为40℃、搅拌速率为800 r/min、芯壁质量比为0.3∶1.0、反应时间为3 h，该条件下的包埋率为53.16%；制备的微胶囊呈球状结构，分散均匀；微胶囊释放动力学符合Korsmeyer-Peppas模型，其释放机制由Fickian扩散控制。微胶囊诱集瓜蓟马Thrips palmi的平均数量达到475.5只/板，分别是对照和异烟酸甲酯原药诱集数量的2.58倍和1.96倍，，说明微胶囊具有良好的缓释性能、持效期和引诱效果。表明蓟马引诱剂微胶囊化可提高其稳定性和持久性，可用于昆虫信息素缓释载体产品研发。
关键词： α-环糊精 异烟酸甲酯 微胶囊 释放动力学 蓟马 引诱效果
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变形假单胞菌免疫刺激复合物对大黄鱼口服免疫效果的评价
《农业生物技术学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是大黄鱼(Larimichthys crocea)内脏白点病的主要病原，可导致巨大经济损失。前期研究表明免疫刺激复合物(immune stimulating complexes, ISCOMs)具有较好的口服免疫效果。为了评价口服变形假单胞菌ISCOMs免疫大黄鱼的效果，本研究制备具有笼格状纳米颗粒结构的变形假单胞菌ISCOMs疫苗(Pp-ISCOMs)，检测口服免疫后21 d大黄鱼头肾的各免疫因子的基因表达水平，通过菌体血清凝集方法测定免疫后大黄鱼血清效价，并测定其免疫保护力。结果显示，与灭活变形假单胞菌(Pp)和空白对照(CK)相比，口服免疫Pp-ISCOMs的大黄鱼头肾的髓样分化因子88 (myeloid differentiation factor 88, MyD88)(P<0.05)和白介素2 (interleukin 2, IL-2)(P<0.001)等免疫相关因子表达显著提高；受免21 d的大黄鱼血清凝集效价为2～2；用5.0×10～2 CFU/g剂量的变形假单胞菌腹腔注射攻毒后，Pp-ISCOMs和Pp受免鱼的相对免疫保护率分别为73.3%和40%。研究表明变形假单胞菌ISCOMs口服免疫可提高大黄鱼抗变形假单胞菌感染能力，具有良好的应用前景。本研究为大黄鱼内脏白点病的免疫防控提供了技术支撑。
关键词： 变形假单胞菌 免疫刺激复合物(ISCOMs) 口服 大黄鱼 免疫效果
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摩氏假单胞菌环脂肽合成基因簇xtlABC的功能研究
《中国生物防治学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：摩氏假单胞菌Pseudomonas mosselii Pt A1是对多株青枯菌均有良好抑制作用的生防菌，基因组中含有完整的环脂肽合成基因簇xtlABC。为了探明摩氏假单胞菌PtA1中xtl ABC基因簇的功能，本研究利用同源重组技术获得缺失突变体ΔxtlA、ΔxtlBC和Δxtl ABC，通过Southern blot验证突变体正确后，分析其对菌株生长速率、游动性、生物膜及生防相关性状等表型的影响。研究结果显示，与野生型菌株Pt A1相比，突变体ΔxtlA、ΔxtlBC和ΔxtlABC在LB培养基中的生长速度变慢，在游动培养基上的迁移直径分别减少了12.6、12.5和13.5mm，生物膜形成量分别降低了30.41%、29.16%和30.70%，对4种青枯菌的抑菌圈直径显著减小。盆栽试验表明，接种青枯菌GMI1000后4d，处理组PtA1+GMI1000、ΔxtlA+GMI1000、ΔxtlBC+GMI1000和ΔxtlABC+GMI1000对番茄青枯病的防效分别为44.93%、9.49%、10.46%和7.66%，第10 d的防效分别为42.43%、19.56%、31.40%和24.79%，处理组PtA1+GMI1000防治效果最好，与xtlABC突变体处理组差异显著。综合分析表明xtlABC基因簇影响菌株自身的生长及生防相关性状，该基因及其合成的次生代谢产物在抑制青枯菌中起重要作用。
关键词： 摩氏假单胞菌 环脂肽 基因簇xtlABC 青枯菌 抑菌作用
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福建省"稻萍鱼"模式推广潜力评价指标体系研究
《中国农业大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为评估"稻萍鱼"模式在福建省稻区的推广潜力,以"稻萍鱼"模式为研究对象,采用文献分析法、理论分析法、德尔菲法和界值法,从自然因素和社会经济因素2个维度构建福建省"稻萍鱼"模式推广潜力评价指标体系,并采用层次分析法和变异系数法确定指标的组合权重,运用综合评分法构建推广潜力的评价模型.结果表明:1)"稻萍鱼"模式推广潜力评价指标体.系包括2个一级指标,12个二级指标.2)明晰了评价指标的内涵,建立了指标的数据收集与标准化方法.3)基于推广潜力的评价模型,"稻萍鱼"模式的推广优先级分为推广优先级最高、推广优先级较高、推广优先级较差、不适合推广等4个等级,并制定相应的推广策略.综上,评价指标的筛选方法和确定权重系数的方法合理,构建的指标体系较全面,涵盖了影响推广潜力的水资源、气候不稳定性、土壤条件、稻田资源、推广便利性和经济水平6个方面.本研究可为福建省因地制宜推广"稻萍鱼"模式提供科学依据.
关键词： 稻萍鱼模式 推广潜力 评价指标体系 德尔菲法 层次分析法
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转录组和蛋白质组关联分析解析巴西蕉幼苗响应低温的分子机制
《中国农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】低温是导致香蕉减产的主要自然灾害之一。基于转录组与蛋白质组关联分析参与香蕉抗寒的相关基因、蛋白及信号、代谢通路调控网络，探讨香蕉抗寒的分子机制。【方法】以巴西蕉为试材，在7℃低温下处理1 d（Cold1）和3 d（Cold3），以28℃培养的巴西蕉为对照（CK），基于笔者课题组前期获得的蛋白质组数据，利用转录组测序技术检测巴西蕉在低温胁迫下基因调控网络的变化，同时与蛋白质组学数据进行关联分析，共同解析巴西蕉响应低温胁迫的分子机制。【结果】转录组分析结果显示，Cold1 vs CK、Cold3 vs CK和Cold1 vs Cold3三个对比组分别鉴定出11 370、15 460和9 619个差异表达基因，对这些基因的KEGG富集分析发现，差异表达基因在光合作用信号、谷胱甘肽代谢、α-亚麻酸代谢途径和苯丙素生物合成等多个低温胁迫关键信号代谢通路中富集。对部分差异表达基因进行实时荧光定量（qRT-PCR）分析，其中DREB、MAPK和MYB等低温调控关键基因的表达量在低温处理后显著上升，所选20个基因的表达变化趋势与RNA-seq基本相符，证实了RNA-seq的准确性。转录组与蛋白质组关联分析结果显示，共鉴定到6 211个与转录本相对应的蛋白，转录组与蛋白质呈现正相关关系，共有105个转录本及其对应的蛋白表达量共同上调，有218个转录本及其对应的蛋白表达量共同下调。GO富集分析显示，差异表达基因和蛋白在光响应、叶绿体、氧化还原酶活性等功能大量富集。此外，对差异表达基因和蛋白KEGG通路的关联分析发现，低温处理抑制了苯丙素生物合成和光合作用信号途径相关基因及蛋白的表达，促进了α-亚麻酸代谢和谷胱甘肽途径的表达。【结论】运用转录组结合蛋白质组学技术绘制了基因和蛋白质水平上的香蕉抗寒调控网络，并发现香蕉响应低温的信号通路主要涉及光合作用信号、谷胱甘肽代谢、α-亚麻酸代谢途径和苯丙素生物合成等途径。
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西番莲种质资源花粉活力鉴定方法探究
《福建农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确西番莲属植物花粉最佳离体培养基、离体培养最适观测时间、花粉的最适染色法和花粉贮藏条件，快速精准鉴定西番莲属种质资源的花粉活力，为其种质资源利用与新品种选育提供科学依据。【方法】以6份西番莲属种质资源的花粉为试验材料，设计正交试验，探究不同浓度的蔗糖、H3BO3、Ca（NO3）2和聚乙二醇-4000（PEG-4000）对花粉离体萌发率的影响；利用最佳花粉离体培养基，筛选花粉离体培养最适观测时间；采用I2-KI染色法、TTC染色法与亚历山大染色法，探究最适的西番莲花粉染色法；通过不同贮藏温度与时间处理，筛选花粉的最佳贮藏条件。【结果】正交试验筛选出最佳培养基配方为100 g·L-1蔗糖+0.04 g·L-1 H3BO3+0.01 g·L-1Ca（NO3）2+150 g·L-1 PEG-4000+200 mg·L-1 MgSO4·7H2O+100 mg·L-1 KNO3,pH值5.5；花粉离体培养1 h为最适观测时间；TTC染色法染色效果好且结果与离体萌发率无显著差异，可有效检测西番莲花粉活力；花粉贮藏24 h以内，25℃与4℃的贮藏温度下花粉活力分别为30.48%、26.69%，花粉贮藏时间在1～7 d,4℃下花粉活力仍保持在26.54%～27.05%。【结论】筛选出西番莲属植物花粉离体萌发的最佳培养基组合、离体培养最适观测时间、花粉最适染色法与花粉贮藏最佳条件，为西番莲属植物花粉活力的快速筛选和品种改良提供理论依据。
关键词： 西番莲 花粉活力 花粉培养基 花粉离体萌发 染色法 花粉贮藏
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巨峰葡萄半乳糖醛酸转移酶基因GAUT克隆及在摘心处理下的表达分析
《核农学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：半乳糖醛酸转移酶（GAUT）是果胶合成过程的关键酶，对植物茎和叶的细胞壁等组织器官生长发育具有重要调控作用。为探究摘心处理下GAUT在葡萄茎和叶中的表达，以巨峰葡萄（Vitis labrusca×Vitis vinifera Kyoho）为材料，进行VvGAUTs克隆，利用生物信息学方法预测分析基因结构与功能，并通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析其在巨峰葡萄摘心处理下的表达模式。结果表明，本研究克隆得到4个巨峰葡萄GAUTs，开放阅读框（ORF）长度分别为1 056、1 167、1 038和1 071 bp，分别编码351、388、345和356个氨基酸，与葡萄基因组相应基因序列同源性均达到98%以上，分别命名为VvGAUT1a、VvGAUT1b、VvGAUT3、VvGAUT4a。VvGAUT1a编码稳定蛋白，其余3个基因编码不稳定蛋白；VvGAUTs与纤维素、木质素和糖代谢等相关蛋白密切互作。VvGAUTs在不同摘心处理的巨峰葡萄茎、叶中表达模式差异显著，2叶摘心处理总体上抑制茎VvGAUTs基因表达，而VvGAUTs在叶中的表达呈现生长前期增强、生长后期受抑制的趋势。此外，在巨峰葡萄生长前期VvGAUT1a、VvGAUT1b和VvGAUT3在茎、叶的表达明显高于生长后期，而VvGAUT4a在巨峰葡萄茎生长后期表达增强，在叶中表达变化较平缓。综上，摘心调控巨峰葡萄VvGAUTs基因表达，可能在控制其茎、叶生长，平衡营养生长和生殖生长过程中发挥重要作用。本研究结果为探究摘心调控葡萄树体生长的分子机制提供了理论依据。
关键词： 巨峰葡萄 半乳糖醛酸转移酶 基因克隆 摘心 基因表达
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福建省农作物种质资源调查收集与多样性分析
《植物遗传资源学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：2017-2022年，福建省在第三次全国农作物种质资源普查与收集行动中，共收集作物地方品种和野生近缘植物种质资源6235份，蔬菜、粮食、果树、经济作物、牧草绿肥分别占33.57%、25.91%、24.35%、14.59%、1.57%；所有资源隶属于83科，229属，313种，其中豆科种质资源份数最多，占总数的16.04%。不同地区和海拔是影响收集农作物种质资源种类和数量的重要因素。全省9个地级市中，三明市收集种质资源数量最多，占20.65%。全省收集农作物种质资源数量随着海拔升高而下降，不同海拔收集数量随着市辖县（市、区）、乡（镇）、村（街道）的数量减少呈现减少趋势。沿海地区如漳州、福州、宁德、泉州、莆田、厦门等6个地级市，海拔0～200 m是种质资源Shannon-Wiener多样性指数和Brillouin丰富度指数最高的海拔区间；闽西北山区，如龙岩、三明、南平等3个地级市，海拔200～400 m、400～600 m、600～800 m种质资源的Shannon-Wiener多样性指数和Brillouin丰富度指数较高。不同地级市、不同海拔区间与收集种质资源的物种多样性指数的相关性分析发现，三明和龙岩市与Shannon-Wiener多样性指数呈极显著正相关，莆田和龙岩市与Pielou均匀度指数呈现极显著负相关，这与全省农业经济分区有密切关系。通过梳理全省农作物种质资源的多样性，为因地制宜地开发、利用、挖掘全省地方农作物种质资源提供参考和科学依据。
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生物炭用量对烟草青枯病及土壤细菌群落的影响
《核农学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探究生物炭用量对烟草青枯病发生及土壤细菌群落结构和功能的影响，以植烟病圃土壤为研究对象，设置5个炭/土比0、1.5%、3.0%、4.5%、6.0%（记为TS0、TS15、TS30、TS45、TS60）的盆栽试验，研究烤烟青枯病发病情况、土壤农化性状、细菌群落结构与功能。结果表明，生物炭可有效减轻烟草青枯病发病情况，以炭/土比3.0%效果最佳。生物炭处理均可显著增加土壤pH值及有机质含量、改善土壤养分比例。冗余分析（RDA）结果表明，土壤pH值及养分是影响烟草青枯病的重要因子，提升土壤pH值及养分含量可有效减轻青枯病发生程度。进一步分析发现，生物炭可提高土壤细菌Alpha多样性，与对照相比，炭/土比1.5%～6.0%处理Chaol指数提高了8.24%～26.50%，变形菌门丰度分别增加了2.28、9.70、5.40、5.28个百分点，而酸杆菌门丰度分别降低了5.48、7.05、8.09、7.06个百分点。表型预测结果表明，生物炭可通过提高变形菌门丰度及降低酸杆菌门丰度来减少潜在致病菌丰度；与对照相比，炭/土比3.0%处理的芽孢杆菌属、鞘氨醇单胞菌属、出芽单胞菌属丰度分别增加5.77、0.24、0.36个百分点，罗河杆菌属丰度降低1.70个百分点，且雷尔氏菌属丰度随着施炭量的增加而逐渐减小。此外，生物炭可提高土壤氨基酸代谢、细胞生长与死亡功能类群丰度，且土壤pH值、有机质、速效钾、全素养分含量与氨基酸代谢、细胞生长与死亡功能具有正向效应，而罗河杆菌属与其具有负向效应。综上，生物炭可显著改善土壤养分比例，进而改善土壤细菌群落结构和功能特性、激发细菌群落氨基酸代谢等功能，提升烟株抗病性，减少青枯病的发生程度，以炭/土比3.0%～4.5%防控烟株青枯病效果较好。本研究结果为烟草种植中的病害防控和土壤改良提供了技术参考。
关键词： 生物炭 烟草青枯病 土壤农化性状 土壤细菌群落结构 功能预测
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鸽微RNA病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：旨在建立鸽微RNA病毒（pigeon megrivirus, PiMeV）实时荧光定量RT-PCR检测方法。本研究根据GenBank中PiMeVs序列特征设计特异性检测引物，从信鸽粪便中检测到PiMeV阳性（命名为PiMeV-CHN001株）,并对其3C基因进行核苷酸同源性比较和遗传进化分析，明确其基因特征后，设计特异性实时荧光定量RT-PCR检测（RT-qPCR）引物组，建立检测PiMeV的RT-qPCR方法。结果显示：PiMeV-CHN001株3C基因全长为591 bp,编码197个氨基酸，和其他2株野鸽源PiMeV（MeV-B1株和MeV-B2株）核苷酸相似性分别为89.5%和92.0%。建立的检测PiMeV的RT-qPCR方法的标准曲线Y轴截距为37.93,斜率为-3.335,相关系数为1.00,扩增效率为99.4%。特异性强，仅PiMeV出现特异性扩增信号和特异性峰值[Tm值为（81.69±0.22）℃],对鸽源禽流感病毒（avian influenza virus, AIV）、鸽源禽I型副黏病毒（pigeon paramyxovirus type I,PPMV-1）、鸽输血传播病毒（pigeon torque teno virus, PTTV）、鸽腺病毒（pigeon adenovirus, PiAd）及鸽圆环病毒（pigeon circovirus, PiCV）检测均未见特异性扩增信号；敏感性优，最低检测限为54.0拷贝·μL-1;重复性好，批内和批间变异系数均低于1.5%。用建立的检测方法对42份信鸽粪便样品进行检测，发现2份阳性样品（阳性率为4.76%）。本研究首次证实我国大陆地区信鸽中存在PiMeV,丰富了PiMeV宿主谱信息；建立的RT-qPCR方法为后续开展PiMeV流行病学研究提供支撑。
关键词： 信鸽 鸽微RNA病毒 3C基因 序列分析 实时荧光定量RT-PCR方法
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