科研产出
基于非靶向代谢组学的茶树新品系'春绿'代谢物分析
《热带亚热带植物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探明茶树新品系‘春绿’叶片代谢物的成分，利用LC-MS和GC-MS分析‘春绿’和对照种(母本‘福云6号’)代谢物组成。结果表明，利用GC-MS鉴定出50种显著差异代谢物质(VIP>1.0)，主要包含糖类、氨基酸类等，其中9个上调，41个下调，绿原酸含量差异最大；而LC-MS鉴定出297个显著差异代谢物质(VIP>1.0),176个上调，121个下调，主要集中在多酚类、醇酸类、糖类等，其中咖啡碱差异最大。通路富集分析发现差异代谢物主要富集在黄酮和黄酮醇生物合成途径、精氨酸生物合成途径、不饱和脂肪酸生物合成途径、戊糖和葡萄糖醛酸的相互转化途径等。OPLS-DA的可变贡献分析表明，大多数潜在生物标志物与能量代谢和品质相关，亚麻油酸、油酸、叶绿醇、羟基哌扣立酸、核糖醇、木糖与能量代谢相关，绿原酸、色氨酸、咖啡碱、茶碱等与品质密切相关。这些代谢物质和代谢通路分析为‘春绿’品质形成和品种选育研究提供了理论依据。
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稻瘟病抗病基因分子标记的开发与育种利用
《分子植物育种 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：稻瘟病是水稻最重要的病害之一，给中国乃至全世界粮食安全生产带来了巨大隐患。近年来，随着生物技术与分子标记技术的快速发展，大量的水稻稻瘟病抗病基因被成功克隆。本研究首先对分子标记的发展过程进行了简要概述，然后对稻瘟病抗病基因的鉴定与克隆进行了分析与总结，并对抗病基因分子标记的开发进行了系统的归纳与分析，接着就分子标记在稻瘟病抗性育种中的应用现状进行了阐述，最后对稻瘟病分子育种存在的问题进行了分析和展望，以期为水稻抗稻瘟病分子育种研究提供参考。
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响应面法优化广叶绣球菌蛋白制备工艺及其体外抗消化道肿瘤活性评价
《菌物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：本研究制备广叶绣球菌Sparassis latifolia的乙醇提取物（SLEE）、粗多糖（SLCP）和总蛋白（SLTP）并分析各主成分含量,MTT法检测SLEE、SLCP和SLTP对HepG2、MGC-803和HT-29 3种不同人消化道肿瘤细胞生长的影响。响应面法优化SLTP的制备工艺,测定不同剂量（12.5、25、50、100和200μg/mL）的不同饱和度硫酸铵连续沉淀蛋白对HT-29细胞生长的抑制作用。结果表明SLEE的提取率为（22.75±0.27）%,总三萜含量为（11.40±0.20）%;SLCP的提取率为（7.29±0.23）%,总糖含量为（59.66±0.80）%;SLTP提取率为（8.80±0.57）%,总蛋白含量为（44.59±0.43）%。SLTP对消化道肿瘤细胞的生长抑制作用最强,对HepG2、MGC-803和HT-29细胞的半数抑制浓度IC50值（24 h）分别为44.18、34.27和28.93μg/mL。SLTP最佳提取工艺为:NaCl浓度0.15 mol/L,料液比（g/mL） 1:26,浸提时间13 h。在此条件下,SLTP的平均得率为（11.03±0.07）%。30%-50%饱和度的硫酸铵沉淀蛋白（SLSP-50）对HT-29细胞的生长抑制活性最强,半数抑制浓度IC50值（24h）为18.84μg/mL。广叶绣球菌蛋白具有显著的体外消化道肿瘤细胞生长抑制活性,是抗肿瘤的主要有效组分之一。本研究为广叶绣球菌资源的充分利用及深加工提供了重要的实验参考依据。
关键词： 绣球菌 蛋白 响应面法 工艺优化 抗消化道肿瘤活性
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栀子多糖的提取纯化及其体外抗氧化活性研究
《农业工程学报 》 2025 EI 北大核心 CSCD
摘要：为优化栀子多糖的提取工艺，对栀子多糖粗提物进行纯化并研究其体外抗氧化活性。采用单因素及正交试验优化超声波辅助法提取栀子多糖的工艺，利用阴离子交换树脂纯化栀子粗多糖。通过测定栀子多糖的还原力和自由基清除能力，以及栀子多糖对热应激鸡肝细胞中氧化损伤相关标志物水平的影响，评价栀子多糖的抗氧化作用。结果表明：1)栀子多糖最佳提取工艺参数为：料液比1∶20，提取时间50 min、提取温度80℃，提取次数1次，此条件下栀子粗多糖得率为11.5%。经初步纯化后的栀子多糖（命名为GP）的多糖含量为45.3%（以葡萄糖计）。2)5 mg/mL的GP最大还原力接近同等浓度下维生素C的一半；对·OH、DPPH·和ABTS+·的清除率分别为63.5%、96.6%、99.3%，半数有效浓度(EC50)分别为3.8、0.1、1.1 mg/mL。3)0.1～0.4 mg/mL的GP对鸡肝细胞存活率无显著影响（P>0.05）；与热应激组相比，GP组细胞的活性氧（reactive oxygen species,ROS）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量均显著降低（P<0.05），超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性及总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）水平均显著升高（P<0.05），并与阳性对照组和空白对照组相当或优于空白对照组。综上，该研究优选了栀子多糖的提取工艺，并验证了该工艺条件下提取得到的栀子多糖具有良好的体外抗氧化活性，为栀子多糖作为多糖类抗氧化剂深入开发利用提供理论依据。
关键词： 提取 纯化 栀子多糖 抗氧化活性 鸡肝细胞 热应激 氧化损伤
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溪黄草提取物对香蕉炭疽菌的抑制活性和抑菌机理
《热带亚热带植物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为开发防治香蕉炭疽病的天然抑菌剂，采用菌丝生长抑制和果实防治试验测定溪黄草(Isodon serra)提取物对香蕉炭疽菌(Colletotrichum musae)的抑制活性，通过研究提取物对菌丝细胞完整性、菌丝形态结构和能量代谢相关酶活性的影响探讨其抑菌机理。结果表明,溪黄草醇提物及其不同极性溶剂萃取部位对香蕉炭疽菌均具有显著抑制活性，其中以石油醚萃取部位的抑菌活性最强，其对菌丝生长的半数抑制浓度为0.18mg/mL。经不同浓度石油醚萃取部位处理的果实病斑直径均比空白对照显著下降(P<0.05)，浓度为4mg/mL时，其与阳性对照无显著性差异(P>0.05)。石油醚萃取部位处理可破坏菌丝的细胞完整性，使细胞通透性提高，还可使菌丝发生显著质壁分离、皱缩和裂解，且破坏程度呈浓度依赖性。菌丝经2 mg/mL石油醚萃取部位处理后，琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、ATP合成酶、ATP酶活性分别下降23.56%、60.51%、9.01%和32.01%。溪黄草提取物通过破坏细胞完整性和降低能量代谢相关酶的活性来抑制香蕉炭疽菌正常生长，其对于防治香蕉炭疽病具有良好应用潜力。
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新型鸭呼肠孤病毒p18蛋白多克隆抗体区分强弱毒株的研究
《微生物学通报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【背景】我们前期将新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus, NDRV)强毒株NP03在番鸭胚成纤维细胞(muscovy duck embryo fibroblast, MDEF)上进行传代，选育出NDRV弱毒株S，将强弱毒株p18蛋白进行比对发现弱毒p18蛋白C端缺失35个氨基酸。【目的】制备p18蛋白的多克隆抗体并鉴定NDRV强弱毒株p18蛋白的差异。【方法】采用RT-PCR方法扩增NDRV强弱毒株p18基因编码序列，克隆至原核表达载体pET-28a中诱导表达，用镍柱纯化目的蛋白，通过SDS-PAGE和Western Blot对纯化蛋白进行鉴定。进一步用纯化的蛋白免疫小鼠制备p18蛋白多克隆抗体，通过间接ELISA、Western Blot和间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, IFA)对制备的多克隆抗体进行检测鉴定NDRV强弱毒株。【结果】对目的蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定结果表明，分别获得了NDRV强弱毒株p18重组蛋白。对多克隆抗体进行间接ELISA检测，效价达1:51 200。Western Blot鉴定显示，制备的p18蛋白多克隆抗体能特异性检测NDRV强、弱毒株感染细胞后表达的p18蛋白，结果表明，强、弱毒株p18蛋白的分子量有明显差异，分别约为18 kDa和14 kDa。IFA结果表明，制备的p18蛋白多克隆抗体可以特异性识别NDRV强、弱毒复制时表达的p18蛋白。【结论】本研究制备的p18蛋白多克隆抗体可用于NDRV强弱毒株p18蛋白检测，并发现NDRV强、弱毒株p18蛋白存在明显差异，为深入研究NDRV p18蛋白生物学功能及致病机理奠定了基础。
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太子参皂苷对卵清白蛋白免疫小鼠肠道应答的影响
《动物医学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为研究太子参皂苷(pseudostellaria heterophylla saponins, PHS)对模式抗原卵清白蛋白(OVA)免疫小鼠肠道免疫应答的影响，将72只雌性小鼠随机分为6组，分别为空白组(CK组)、OVA免疫对照组(OVA组)、铝佐剂对照组(OVA+Al组)、PHS低剂量组(OVA+PHS-L,50 mg/kg)、PHS中剂量组(OVA+PHS-M,100 mg/kg)、PHS高剂量组(OVA+PHS-H,200 mg/kg)(在第1～5天和第16～20天，除PHS各剂量组按体重灌胃相应剂量PHS外，其余各组灌胃相应体积的双蒸水；在第6天和第21天，于腹股沟处对CK组每只小鼠进行皮下注射0.2 mL/只的无菌PBS,对OVA+Al组注射含100μg OVA和200μg Alum的PBS混合液，对PHS各剂量组小鼠注射含100μg OVA的PBS溶液)。第36天处死小鼠，检测各项指标。结果显示，与OVA组相比，OVA+PHS-L组可显著提高回肠绒隐比和十二指肠单位长度内淋巴细胞个数(P<0.05),显著提升十二指肠中IL-6、空肠中sIgA和回肠中TNF-α含量(P<0.05);OVA+PHS-M组可显著提高十二指肠绒毛高度、绒隐比以及单位长度内淋巴细胞个数(P<0.05),显著提升空肠和回肠中TNF-α含量(P<0.05);OVA+PHS-H组可显著提升空肠中sIgA含量(P<0.05)。上述结果表明，PHS能在一定程度上强化肠道组织形态，调节相关免疫球蛋白和细胞因子的分泌，增强肠道黏膜免疫功能，提高小鼠对OVA的免疫应答，具有成为佐剂的潜力。
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金线莲ArCRC基因的克隆、亚细胞定位和表达分析
《热带亚热带植物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为了解金线莲(Anoectochilus roxburghii) YABBY基因家族的CRABS CLAW(CRC)亚族基因在花和叶片发育中的功能，基于金线莲全长转录组数据RT-PCR克隆ArCRC基因，对其编码蛋白进行生物信息学、原核表达、亚细胞定位分析，采用qP CR技术对基因的表达模式进行分析。结果表明，金线莲ArCRC基因CDS长度为576 bp(GenBank登录号:OR394646),编码191个氨基酸，含有YABBY superfamily和HMG-box＿SF superfamily保守结构域，分子量为21.514 kD，理论等电点为9.16，不稳定系数41.12，属于不稳定蛋白。系统进化分析表明，ArC RC与水稻(Oryza sativa)的OsD L和拟南芥(Arabidopsis thaliana)的AtCRC聚为一类，属于CRC亚家族，且定位在细胞核。SDS-PAGE电泳和Western blot结果表明，ArCRC基因可在大肠杆菌中成功诱导表达。qR T-PCR分析表明，ArCRC基因在花的表达量最高，其次是叶，且在叶片中脉的表达量显著高于叶片外缘，因此，推测ArCRC基因主要在花器官发育中发挥功能，同时还参与调控叶片中脉的发育。
关键词： 金线莲 ArCRC基因 转录因子 基因克隆 亚细胞定位 基因表达分析
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闽双色6号籽粒发育中叶酸合成代谢基因挖掘与分析
《中国细胞生物学学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：叶酸是人体必需的维生素之一,甜玉米作为一种兼具果、蔬、粮3种特性的作物,其籽粒中叶酸含量变化及基因调控研究尚不清晰。以超甜玉米闽双色6号籽粒作为研究材料,测定籽粒发育不同阶段的叶酸含量及基因表达,进行Mfuzz基因时间聚类分析、基因集GO和KEGG富集分析,挖掘潜在的叶酸合成基因及分子调控通路。结果显示,甜玉米中叶酸含量随籽粒发育期的增长而逐渐下降,授粉后10天至20天叶酸含量在50μg/100 g以上, 20天后呈现迅速下降的特点。基因时间序列表达模式分析获得6个类型基因集,其中Cluster 3基因集表达趋势与叶酸含量变化相似;GO和KEGG富集分析也发现叶酸生物合成和代谢通路被Cluster 3基因集富集。19个参与甜玉米籽粒叶酸生物合成的基因被挖掘,其中7个基因涉及以鸟苷三磷酸(guanosine triphosphate, GTP)为底物进行新化合物加工的生化反应通路;此外,发现Zm00001d031995(DHNA)、Zm00001d018733、Zm00001d023817(DHFS)和Zm00001d026549表达模式与叶酸含量变化趋势一致, Zm00001d039264和Zm00001d016866表达与叶酸含量变化趋势相反,这表明了这6个基因可能在叶酸分子调控中起着关键作用,该研究结果为未来高叶酸玉米育种提供潜在的基因资源。
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营养添加剂对广叶绣球菌生长的影响
《河南农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为进一步提升绣球菌产量，选取复合蛋白质类、复合氨基酸类、糖类、有机酸类和腐植酸类添加剂，通过测定菌丝生长速度和菌丝生物量等指标，筛选对绣球菌生长有促进作用的添加剂，并进行原基诱导和出菇试验。结果表明，不同类别营养添加剂对菌丝生物量和菌丝生长速度影响差异较大，添加荞麦粉、黑苦荞粉、黄豆粉、黑豆粉、立信1号、丰菇王、甘蔗糖蜜、甜菜糖蜜、黄腐酸钾和矿源黄腐酸能显著提高菌丝体生物量，较空白对照组提高30.08%～36.67%，添加荞麦粉、黄豆粉、土豆粉、甘蔗糖蜜、甜菜糖蜜、酒石酸、柠檬酸、L-焦谷氨酸、腐植酸钾、矿源黄腐酸和腐植酸能显著提高菌丝生长速度，较空白对照组提高12.86%～22.98%。在栽培料中添加荞麦粉、黑全麦粉、丰菇王、立信1号、L-焦谷氨酸和腐植酸能提高原基形成率，较无营养添加剂的对照组分别提高10.00、10.00、7.78、5.00、10.00、7.78百分点，其中丰菇王、L-焦谷氨酸和腐植酸能提升绣球菌鲜菇产量，较对照组分别提高16.23%、16.83%和22.36%。
关键词： 绣球菌 营养添加剂 菌丝生长速度 原基形成率 产量
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