科研产出
西瓜鸟氨酸氨甲酰转移酶基因克隆及原核表达
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：从西瓜叶片中克隆瓜氨酸合成途径的关键酶鸟氨酸氨甲酰转移酶(OCT)基因。OCT基因由1 137个碱基组成,编码378个氨基酸,蛋白分子量约为41.8 k D,等电点为8.61。氨基酸序列比对分析表明,西瓜OCT与香瓜和黄瓜等物种的OCT基因同源性较高,分别为93%和92%;进化树分析发现,西瓜与黄瓜亲缘关系最近,而与狭刀豆亲缘关系最远。构建p ET-30a-OCT原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导和SDS-PAGE检测,表达的融合蛋白与预期蛋白大小相符合。本研究为进一步研究其酶学特性和瓜氨酸合成代谢中的作用提供技术支持。
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杧果与Fusarium mangiferae在转录水平上的互作机制
《植物病理学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：基于Illumina HiSeq~(TM)2000平台,对健康与感病杧果顶芽的转录组进行测序,采用BLAST软件将获得的Unigene与NCBI-nr、Swiss-Prot、KEGG和COG数据库进行比对,根据基因功能注释后分析杧果病健组织的差异表达基因(DEGs),并对DEGs进行GO和Pathway富集分析。结果表明:2个样品共获得119 815条Unigene,N50为1 546 bp,平均片段长度为880 bp;鉴定了29 878个DEGs,对随机挑选的11个差异表达基因进行了qRT-PCR验证,结果与转录组一致。以corrected P-value≤0.05为阈值的代谢途径有22条,其中大多数代谢途径与植物的抗逆响应密切相关;153个DEGs参与了淀粉和蔗糖代谢途径,DEGs主要是编码糖类异构酶、水解酶和转移酶等,参与葡萄糖水解、细胞碳水化合物、丙酮酸盐和核苷酸代谢等生物进程;在抗氧化生物过程中,编码活性氧代谢相关酶且log_2Ratio>10或<-10以上的DEGs有20个,14个属上调表达,表明活性氧代谢在杧果与病原互作过程中起到重要的调解作用;F.mangiferae侵染杧果后,以log_2Ratio>10或<-10为筛选条件,共获得酚类代谢相关差异表达基因53个,其中40个DEGs上调表达,推测杧果可能是通过合成加固细胞壁的木质素或生成抑菌作用的酚类化合物来提高对病原菌的抵抗能力;杧果与F.mangiferae互作过程中,钙信号传导、SA信号途径和丝裂原活化蛋白信号传导途径相关基因表达下调,造成了下游植物抗病基因RPM1的表达受到抑制,这可能是杧果畸形病的主要成因之一。
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甘蔗新基因ShHXT4克隆亚细胞定位及表达特征
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：以甘蔗品种新台糖22号为材料,利用同源克隆技术从甘蔗中分离出ShHXT4基因,以GADPH基因为内参,并采用实时定量RT-PCR分析该基因在甘蔗组织中的表达,同时构建亚细胞定位载体,通过农杆菌侵染洋葱表皮的方法对ShHXT4编码的蛋白进行亚细胞定位。研究分析发现该基因CDS序列长度为1 632 bp,编码540个氨基酸,蛋白的等电点(p I)为9.16,理论分子量为56.64 k D,命名为ShHXT4,基因编码多肽链中包含信号肽和12次跨膜结构域,且亚细胞定位于质膜,编码一种转运蛋白。洋葱表皮瞬时表达该基因GFP融合载体表明,ShHXT4定位于细胞膜,组织表达分析显示ShHXT4基因在根、茎和叶中均有表达,叶片中的表达量较高,暗示ShHXT4基因可能在甘蔗叶片糖分转运过程中扮演重要角色,研究结果为进一步研究ShHXT4基因的功能及应用提供帮助。
关键词： 基因定位 实时荧光定量 ShHXT4 基因克隆 甘蔗
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果实裂果机理研究进展与展望
《广东农业科学 》 2017
摘要：裂果现象在多种果实中存在,外界环境条件、果皮组织力学性能、果皮结构特点、矿质营养、遗传因素及栽培方式等与裂果密切相关,从水分、赤霉素、脱落酸、钙和细胞壁等5个方面综述了国内外与裂果的研究进展。果皮所受膨压受水分以及赤霉素和脱落酸含量的影响,果皮力学强度受钙和细胞壁组分的影响,果皮延伸性受细胞壁松弛基因的影响。过多的水分以及赤霉素和脱落酸含量变化会使果皮所受膨压增加,钙含量的降低以及细胞壁组分的变化使果皮的力学强度降低,细胞壁松弛基因表达量的降低使果皮延伸性减弱。当果皮所受膨压、果皮力学强度和果皮延伸性3个因素处于平衡时不发生裂果,但当果皮所受膨压增加、果皮力学强度和果皮延伸性降低时导致裂果发生。
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一种全自动腰果脱壳机的脱壳试验研究
《食品与机械 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了进一步提高腰果脱壳机的脱壳效果,分别研究了推果速度、切刀装置中弹簧压缩距离及进果时腰果的状态等因素对脱壳过程中整仁率、滑果率及躺果率的影响。结果表明:推果速度对腰果脱壳机的脱壳效果(整仁率、滑果率及躺果率)影响极显著(P<0.01);弹簧压缩距离对腰果脱壳过程中整仁率的影响极显著(P<0.01),对滑果率及躺果率影响不显著(P>0.05);进料时腰果的状态对脱壳过程中整仁率和滑果率影响极显著(P<0.01),对躺果率影响不显著(P>0.05);当刀口距离9.1 mm,推果速度19.8r/min,弹簧压缩距离16.70mm,采用方式a1进果时,整仁率为69.76%。
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杧果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B克隆与敲除载体构建
《中国南方果树 》 2017 北大核心
摘要：为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与杧果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides致病力的关系,本试验以杧果炭疽病菌DNA为模板,利用同源克隆技术扩增CgEg1B,对其序列特征、蛋白保守结构域进行分析,并借助In-Fusion HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明,该基因DNA和cDNA全长分别为1 077bp、1 020bp,编码区有内含子(57bp)1个,推测编码339个氨基酸,其分子量约为37.13kDa,等电点PI为5.11。与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对,发现该序列与鳄梨炭疽菌C.gloeosporioides(EQB54542.1)的内切葡聚糖酶基因相似性为99%;该基因的敲除载体pCgEg1BGH-1构建成功。CgEg1B基因具备真菌内切葡聚糖酶基因家族的序列特征,推测CgEg1B基因可能与杧果炭疽病菌的侵入、定殖和致病性有关。
关键词： 杧果 胶孢炭疽菌 内切葡聚糖酶CgEg1B基因 克隆 敲除载体
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日本六次产业化对中国农村三产融合的借鉴和启示
《中国经贸导刊 》 2017
摘要：随着农业供给侧结构性改革的深入推进,如何培育农村发展新业态、激活发展新动力,促进农村一二三产业的融合发展,是中国农业现代化发展进程中必须解决的问题.本文在分析日本六次产业化的内涵、特征、发展背景和相关政策制度的基础上,结合我国的实际情况和客观需求,得出促进中国农村三产融合的政策建议.
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QuEChERS-气相色谱/串联质谱法同时测定杨桃中37种农药残留
《分析科学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：建立了QuEChERS-气相色谱/三重四极杆串联质谱(GC-MS/MS)测定杨桃中37种农药残留量的方法。样品以1%乙酸乙腈为提取溶剂,采用QuEChERS净化,在质谱多反应监测(MRM)模式下进行定性,基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明:在0.01~0.5mg/L范围内,37种农药的线性关系良好,方法定量限均低于0.01mg/kg;在低、中、高3个添加水平范围内平均回收率在72.9%~117%之间,相对标准偏差(RSD)≤9.6%。该方法简单、快速、溶剂用量少、灵敏度高,适用于分析杨桃样品中37种农药残留量的检测和确证。
关键词： 气相色谱-串联质谱 QuEChERS 杨桃 农药残留
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寄主大小对副珠蜡蚧阔柄跳小蜂产卵选择及繁殖的影响
《环境昆虫学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为明确寄主体型大小对副珠蜡蚧阔柄跳小蜂产卵选择及繁殖的影响,在室内观察了副珠蜡蚧阔柄跳小蜂在不同大小的橡副珠蜡蚧上的产卵量、寄生率、发育历期及性比。结果表明:在选择性和非选择性的产卵试验条件下副珠蜡蚧阔柄跳小蜂对中型个体寄主(长4.0 mm,宽3.4 mm)的寄生率最高;小蜂的产卵量在选择性试验时,以大型寄主(长4.8 mm,宽4.0 mm)体内的最高(67.0粒),非选择性试验时,以中型寄主(长4.0 mm,宽3.4 mm)体内的最高(131.0粒),小型寄主(长3.2 mm,宽2.9 mm)体内产卵量最少(61.5粒);副珠蜡蚧阔柄跳小蜂后代出蜂数与寄主体型的大小呈显著正相关,雌性比则随寄主体型的增大而增减小,发育历期则受寄主体型的影响不明显。综上所述,副珠蜡蚧阔柄跳小蜂雌蜂能够根据寄主质量来调整产卵量及后代性比,以使后代适应度最大化。
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