科研产出
H9亚型禽流感广谱亚单位疫苗抗原设计及其免疫效力
《江苏农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：H9N2 亚型禽流感病毒(AIV)变异快、传染性强,由病毒流行株制备而成的灭活疫苗达不到完全保护的效果,导致H9N2 亚型禽流感时有发生.为研发具有广谱保护性的H9 亚型禽流感疫苗,本研究利用生物信息技术,对H9 亚型AIV HA基因序列进行分析,设计获得HA基因序列.将HA基因构建于杆状病毒表达系统,表达的重组HA蛋白血凝效价为1×212,与不同分支H9 亚型AIV阳性血清具有良好的交叉反应活性.将重组蛋白制备成疫苗(rHA疫苗)免疫 10 日龄雏鸡,免疫后 28d将不同亚分支的H9 亚型AIV流行毒株 115 和YZ株分别以1×106 EID50(半数鸡胚感染量)感染试验鸡,rHA疫苗组交叉保护效力明显优于商品苗组.本研究结果表明H9 亚型禽流感广谱型亚单位疫苗具有较好的应用前景,可以用于防控H9 AIV感染.
关键词： H9亚型禽流感 HA基因 杆状病毒表达系统 广谱亚单位疫苗 免疫
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基于电子舌和人工感官评价的菜用大豆食用品质特性分析
《江苏农业科学 》 2023 北大核心
摘要：以江苏省不同城市6种特色菜用大豆为研究对象，定性定量分析了与食用品质相关的化学组成（糖组分、游离氨基酸）,利用人工感官评价结合电子舌智能感官技术分析不同品种的味觉属性，以多元统计学方法探究其相关性及差异性。结果表明，蔗糖（75.32～108.56 mg/g）是菜用大豆中最主要的糖组分，通7-391-1的蔗糖含量最高。菜用大豆中共计检测出15种游离氨基酸，总含量范围720.02～838.82 mg/100 g,其中通7-391-1中15种氨基酸均检出且总游离氨基酸含量最高，为838.82 mg/100 g。人工感官评价中，通7-391-1甜味值最高，为5.50,但苏豆18号的综合平均得分最高，为6.25。电子舌结果显示，苏豆18的鲜味响应值最高，为2 947.47,甜味响应值最高的品种是通7-391-1,为3 472.11。主成分分析显示，电子舌技术能很好地区分不同品种菜用大豆。电子舌鲜甜味与人工感官评价的鲜甜味关联度较高，呈极显著正相关，鲜味相关系数达0.926,甜味相关系数达0.983。本研究结果能充分了解地方特色菜用大豆品种的化学组成，同时为菜用大豆甜味和鲜味等味觉属性的智能化评判提供有效参考和技术支撑。
关键词： 菜用大豆 食用品质 化学组成 感官评价 电子舌 相关性
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硝化抑制剂对水稻秧苗生长及土壤养分变化的影响
《江苏农业科学 》 2023 北大核心
摘要：为解决传统育秧肥料后期供肥不足现象，通过2年的水稻育秧试验，探究不同用量硝化抑制剂（双氰胺，DCD）对水稻育秧肥料养分释放的影响。试验于2019年设3个处理：CK（不添加DCD）、NI1（添加0.05%DCD）、NI2（添加0.1%DCD）;2020年额外增加1个处理：NI3（添加0.2%DCD）。结果表明，与CK相比，NI1处理和NI2处理总体提高了水稻育秧后期（28～35 d）秧苗素质（株高、叶龄、叶长、茎基宽）;而NI3处理水稻秧苗素质则和CK无显著差异。添加硝化抑制剂可以明显提高水稻叶绿素含量（SPAD值）,随着育秧时间延长和硝化抑制剂用量增加，对SPAD值提升效果越明显。添加硝化抑制剂会减少水稻育秧前期（10 d）土壤铵态氮（NH+4-N）含量，但是会增加育秧后期（25～35 d）土壤NH+4-N含量，并在育秧结束时显著提高土壤全氮含量。因此，添加硝化抑制剂在水稻育秧后期能够明显增加土壤氮素残留，低用量硝化抑制剂在一定程度上还可以提高水稻秧苗素质。但是，在实际应用中需要注意高用量硝化抑制剂对水稻秧苗素质的负面效果。
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通过遗传转化Rfo获得青花菜Ogura CMS恢复系
《中国农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】将来自萝卜的胞质不育恢复基因Rfo导入到青花菜Ogura细胞质雄性不育（cytoplasmic male sterility,CMS）主栽商业品种‘耐寒优秀’（命名为SFB45）中，获得Ogura CMS恢复系，打破Ogura CMS材料在生产上无法再利用的现状，为优异种质的创制和改良提供新途径。【方法】利用基因合成的方法克隆萝卜Rfo的CDS及其启动子序列，构建表达载体pRfo::Rfo。通过农杆菌介导的遗传转化方法侵染SFB45的具柄子叶和下胚轴，进行再生、抗性苗筛选和PCR鉴定获得阳性植株，开花期观察转基因植株的育性恢复情况；用亚历山大染液分析对照组及阳性株的花粉活力；分别提取对照组及阳性株<3 mm和>3 mm花蕾的RNA并反转录成单链cDNA，设计特异引物，利用RT-PCR分析Rfo及绒毡层和花粉壁发育相关基因在SFB45及对应的育性恢复材料花蕾中的表达差异。【结果】通过遗传转化共获得10个阳性株系，其中8个株系育性得到不同程度的恢复，花粉活力为84.2%—90.4%。RT-PCR分析结果表明，育性恢复植株花蕾中Rfo表达，绒毡层发育关键调节因子DYT1和TDF1及花粉壁主要成分孢粉素合成所必需的基因ACOS5在育性恢复植株<3 mm花蕾中上调表达。绒毡层降解相关基因AMS、四分体胼胝质壁及花粉外壁发育所必需的基因CalS5和CYP703在育性恢复植株>3 mm花蕾中上调表达。分析阳性株系R-1、R-3和R-6自交及杂交后代发现转入的Rfo能稳定遗传，符合孟德尔遗传。【结论】通过遗传转化Rfo获得了优良青花菜Ogura CMS商品种SFB45的育性恢复系，且Rfo的转入使绒毡层及花粉壁发育相关基因恢复正常表达。
关键词： 青花菜 遗传转化 Ogura CMS Rfo 绒毡层和花粉壁发育相关基因
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提高奶牛受胎率的免疫抑制素技术研究初报
《畜牧与兽医 》 2023 北大核心
摘要：试验旨在研究免疫抑制素结合同期发情对奶牛受胎率的影响，并形成基于抑制素免疫的奶牛繁殖新技术。本研究以不同剂量抑制素α亚基(inhibin α, INHα)抗原结合CIDR-同期发情(CIDR-ovsynch, CO)和双同期(double-ovsynch, DO)2种同期发情方案处理奶牛，同时设立对照组开展3个批次试验：(1) 1 mg抑制素抗原+DO(n=147);(2) 1 mg抑制素抗原+CO (n=252);(3)不同剂量(1 mg和1.5 mg)抑制素抗原+CO (n=104)。结果显示，免疫抑制素显著提高了CO奶牛的配种受胎率(对照组为38.4%,免疫组为52.1%),P<0.05,对DO奶牛的受胎率无显著影响(对照组为41.9%,免疫组为34.2%),P=0.19。对于CO的奶牛，妊娠奶牛的受胎数与免疫剂量显著性相关(P<0.05),1.5 mg免疫组受胎率71.1%,显著高于1 mg免疫组47.1%,P<0.05,1.5 mg组发生15.6%的双胎。上述结果表明，免疫抑制素可以显著提高CO奶牛配种受胎率；在奶牛生产中，可采用1 mg抑制素免疫与CO联用，达到有效提高奶牛配种受胎率同时避免双胎发生的目的。
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一种水溶性佐剂CS-GTA-ML对H7N9亚型禽流感灭活疫苗免疫效果评价
《中国兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：旨在合成一种直接溶解在生理缓冲溶剂中、可注射的功能化修饰的壳聚糖衍生物作为兽用佐剂，用于替代铝盐佐剂。壳聚糖中的氨基与环氧丙基三甲基氯化铵(GTA)中的环氧基团发生加成开环反应，偶联成CS-GTA中间体；再与4-(2-氯乙基)吗啉(ML)发生氮烷基化反应生成终产物CS-GTA-ML。产物通过FI-IR、~1H NMR、Zeta电位等表征手段检测其结构及重要成分的嫁接率；通过溶血试验、细胞活性计数(CCK-8)和组织病理分析(HE)方法评估了CS-GTA-ML的生物安全性，为注射剂型的使用提供了安全保障；配伍H7N9亚型流感灭活病毒，对雌性ICR小鼠和SPF鸡进行皮下免疫，测定对其血凝抑制(HI)效价，并通过流式分析仪初步探索脾淋巴细胞活化能力。结果显示，作为抗原递送系统，CS-GTA-ML在不同pH值的水溶液中均可溶解，其中GTA和ML的嫁接率分别约为53%,15%,且带有15.8 mV的正电荷。当质量浓度在1 g/L以下时，体外脾细胞存活率在88%以上，且对机体重要组成器官无损伤；当质量浓度高达10 g/L时，体外红细胞溶血率仅0.5%左右，具有良好的生物相容性。与单一的H7N9疫苗和ISA206+H7N9疫苗对比，CS-GTA-ML有显著的血凝抑制作用。通过相关细胞因子及流式细胞分析发现CS-GTA-ML倾向于CD4~+T细胞分化趋势，具有体液免疫和细胞免疫双重免疫效力。
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氮磷钾施肥对温室菜用大豆生长与糖类含量的影响
《江苏农业科学 》 2023 北大核心
摘要：为明确不同水平氮磷钾肥对温室菜用大豆生长状况与糖类含量的影响,以菜用大豆苏新6号为材料,采用三因素三水平进行正交试验.氮肥水平为N0(0 kg/hm2)、N1(75 kg/hm2)、N2(150 kg/hm2),磷肥为P0(0 kg/hm2)、P1(120 kg/hm2)、P2(240 kg/hm2),钾肥为K0(0 kg/hm2)、K1(120 kg/hm2)、K2(240 kg/hm2).结果表明,施肥处理对荚长宽、百粒鲜质量影响甚微(CV<10%),对单荚质量、单株结荚数、始花叶片数、花期时长、籽粒含水量影响较大(CV>10%).氮肥是影响菜用大豆开花期SPAD值的主效因子,磷肥则是影响鼓粒盛期SPAD值的主效因子.对于菜用大豆籽粒中果糖、葡萄糖、蔗糖含量,N、P、K、N×P、N×K、P×K、N×P×K各因素的影响达到了极显著水平.蔗糖含量在施氮肥、磷肥后显著提高,随氮肥的增加先增后降,随磷肥的增加则表现为上升趋势.27个处理组中,N2 P2 K0具有最高的蔗糖含量,达到37.47 mg/g.建立了以蔗糖为目标,肥料为变量的数学模型,经模型预测最适施肥量N肥为137.25 kg/hm2,P肥为240 kg/hm2.本研究可为菜用大豆氮磷钾肥的合理施用提供理论指导.
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野生灵芝生物学特性及种子液发酵时间对出芝的影响
《食品工业 》 2023 北大核心
摘要：为选育出可用于食品工业的优质灵芝菌株,从野生灵芝子实体中分离获取纯培养物,对其进行ITS分子鉴定、培养基配方正交试验、菌株生物学特性分析和种子液发酵时间对出芝的影响研究。结果表明:分离获得的灵芝菌株lynk2103具有锁状联合,具备子实体形成条件;液体培养基最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为蛋白胨;液体发酵的最佳转速150 r/min,最佳接种量10%,最佳装液量100 mL和最佳发酵温度30℃,最佳培养基配方为葡萄糖40 g/L、酵母浸粉10 g/L、蛋白胨15 g/L、磷酸二氢钾1 g/L和无水硫酸镁1 g/L;灵芝菌株液体发酵最佳时间为120 h,不同发酵时间的种子液对出芝情况影响较小。选育的灵芝菌株生物学特性良好,具备应用于食品工业的潜质,可进一步开发利用。
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高效液相色谱法分析干旱胁迫下烟草中游离氨基酸的含量变化
《分析科学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：建立了柱前衍生-高效液相色谱高灵敏、快速测定新鲜烟叶中21种游离氨基酸的新方法。新鲜烟叶样品经0.1 mol/L的盐酸超声提取30 min后，以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）作为衍生试剂，反向色谱柱分离，二极管阵列检测器测定。在最佳实验条件下，21种氨基酸在9 min内实现完全分离，在低、中、高3个浓度水平下的加标回收率在84.7%～104%之间，相对标准偏差（RSD）为1.8%～5.1%,定量限在0.02～0.10 mg/g之间。基于该方法，探讨了干旱胁迫下游离氨基酸含量的变化趋势。研究表明，在干旱胁迫下，总游离氨基酸、脯氨酸、天冬酰胺等含量明显升高，且大部分氨基酸在旺长期时变化最大，对明晰游离氨基酸参与烟草抗逆的调控机制提供了数据基础和技术支撑。
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