根结线虫拮抗放线菌菌株DA07118的筛选与鉴定及其发酵条件的优化

曾庆飞; 李传浩; 黄惠琴; 方哲; 鲍时翔; 《中国生物防治 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：从海南东寨港红树林、尖峰岭等原始森林及黄流地区发病蕉园采集土壤样品,分离得到215株放线菌菌株。以根结线虫为靶标线虫对215株放线菌进行筛选,获得18株对根结线虫校正死亡率在80%以上的菌株。菌株DA07118抗线虫活性最强,校正死亡率达100%;经5次继代培养,仍具有稳定产生杀线虫活性物质的能力。通过形态学、生理生化反应和16S rDAN分类鉴定,将该菌株归类为链霉菌属Streptomyces。进一步的发酵条件优化试验,确定该菌株产活性物质的最佳培养基配方为(g/L):麦芽糖10g、蔗糖25g、酵母膏20g、蛋白胨20g、K_2HPO_4 0.5g,初始pH7.0。发酵优化后,菌株发酵液的10倍稀释液处理后24h对根结线虫的校正击倒率从优化前的75.0%提高到93.7%。

关键词： 根结线虫 放线菌 筛选 菌株鉴定 发酵条件优化

 全文链接 请求原文

hGH-双精氨酸C肽人胰岛素原基因的克隆表达及纯化研究

胡兵; 黄超; 李文静; 邓柳红; 肖苏生; 张春发; 《生物技术通报 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：旨在提高基因重组人胰岛素在大肠杆菌中表达的稳定性及表达包涵体蛋白的复性水平。在人胰岛素原N端前融合人生长素N端的一段序列来充当前导肽,同时将C肽设计为两个精氨酸,分10段合成长链寡核苷酸链,利用重叠延伸PCR技术(SOE PCR)扩增得到该基因片段。与表达载体PET-30a连接,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白采用Ni-NTA亲和层析纯化,纯化后的蛋白经复性、冻干等步骤后用胰蛋白酶,羧肽酶B双酶切再过DEAE Sepharose FastFlow阴离子交换柱,收集洗脱峰。对制备所得的胰岛素用SDS-PAGE,Western blot进行性质鉴定,及皮下注射小鼠测定生物活性。结果显示,目的蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了表达,表达产物以不溶性包涵体形式纯在,约占大肠杆菌总蛋白的30%。经Ni-NTA亲和层析得到的重组蛋白纯度为85%,DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换纯化得到单组分胰岛素。Western Blot显示制备所得的胰岛素具有胰岛素免疫原性,皮下给药注射小鼠活性测定表明具有明显的降血糖活性。获得了一种高效生产基因重组人胰岛素的方法,为研究胰岛素类似物奠定了前期基础同时也为今后探索胰岛素的非注射给药途径提供了原料。

关键词： hGH-双精氨酸C肽人胰岛素原 重叠延伸PCR 融合蛋白表达 纯化 活性测定

 全文链接 请求原文

香蕉镰刀菌枯萎病4号生理小种研究进展

麦明晓; 黄惠琴; 鲍时翔; 《中国生物防治 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：尖孢镰刀菌古巴专化型是引起香蕉镰刀菌枯萎病的病原菌,它有4个生理小种,其中4号生理小种出现最晚,但其危害性最大。本文就近年来香蕉镰刀菌枯萎病4号生理小种的分布与危害、生物学特征、致病机理、分子生物学研究、生物学防治等方面国内外的研究进行综述,并提出展望和设想。

关键词： 香蕉枯萎病 生理小种 研究进展

 全文链接 请求原文

斑翅食蚧蚜小蜂对寄主龄期的选择性

张方平; 符悦冠; 张敬宝; 韩冬银; 彭正强; 《中国生物防治 》 2009 北大核心 CSCD

关键词： 斑翅食蚧蚜小蜂 橡副珠蜡蚧 寄主龄期选择性

 全文链接 请求原文

红绒蝎尾蕉的组织培养和快速繁殖(简报)

黄海杰; 梁李宏; 《亚热带植物科学 》 2009 CSCD

摘要：以红绒蝎尾蕉笋芽为材料,在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上诱导出芽,在MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基上进行增殖培养,一个月后能分化大量芽,在1/2MS+NAA 0.02 mg/L培养基上进行生根培养后移栽至营养土中,成活率可达95%。

关键词： 红绒蝎尾蕉 笋芽 组织培养

 全文链接 请求原文

毛细管柱气相色谱法测定地瓜酒中甲醇、异丁醇和异戊醇

尹桂豪; 刘春华; 李春丽; 徐志; 《理化检验(化学分册) 》 2009 北大核心 CSCD

 全文链接 请求原文

国营阳江农场橡胶园土壤有机质与全氮时空变异分析

王博; 张培松; 林清火; 茶正早; 罗微; 《热带作物学报 》 2009 CSCD

摘要：运用GIS和地统计学相结合的方法研究了1983年和2007年国营阳江农场橡胶园土壤有机质与全氮的时空变异。结果表明,20多年间土壤有机质和全氮含量有所降低。土壤有机质和全氮含量的空间差异缩小,含量水平基本上有朝均衡化发展的趋势,空间变化趋于平均。这些变化主要是由人为生产管理和施肥造成。同时随着生产管理、施肥等人为活动影响的增加与积累,使得土壤有机质和全氮的空间变异减弱,朝均衡化方向发展。

关键词： GIS 地统计 有机质 全氮 时空变异

 全文链接 请求原文

土壤产嗜铁素拮抗细菌CAS15的分离鉴定

余贤美; 郑服丛; 林超; 贺春萍; 张修国; 《植物保护学报 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：采用CAS检测平板法,从海南岛橡胶树根际土壤分离到一株产嗜铁素能力较强的菌株CAS15,并通过室内平板对峙试验研究CAS15对15个常见病害病原菌的拮抗作用。结果显示,CAS15具有较强的拮抗作用,其菌液过滤液对病原菌抑制作用较强,抑制率为19.26%～94.07%。根据菌株形态特征、培养性状、生理生化特性及16S rDNA序列分析结果,将CAS15鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。质谱分析和嗜铁素分析表明,CAS15产生的嗜铁素为儿茶酚型嗜铁素(DHB-Gly-Thr)3,分子质量为881.25,且嗜铁素的产生受到铁离子的抑制,当培养基中含有50μmol/L FeCl3时,其吸光度比值(OD510/OD600)为0.001～0.01。

关键词： 嗜铁素 拮抗作用 枯草芽孢杆菌 质谱分析 嗜铁素分析

 全文链接 请求原文

蛇足石杉的形态学及不同光照处理下气孔特征的研究

黎有有; 唐源江; 李菁; 周毅; 黄衡宇; 《植物研究 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：对蛇足石杉的形态学特征进行了重新描述,并对不同光照处理下蛇足石杉叶片的气孔特征进行比较。结果表明:在一定范围内,随着环境中光照强度的增加,气孔长度和宽度、单个气孔面积、气孔密度及气孔总面积都呈增加的趋势。当光照强度超过某一阈值时其气孔指数和气孔密度仍呈增加的趋势,但气孔长度、宽度和单个气孔面积呈变小趋势。小而密的气孔是其适应旱生环境的表现,表明其具有一定的生态适应能力,但进行人工栽培时应避免光照过强。

关键词： 蛇足石杉 形态特征 光照强度 气孔特征

 全文链接 请求原文

橡胶树两个品种的核型分析

高和琼; 庄南生; 王英; 邱海燕; 《武汉植物学研究 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：热研7-33-97(Hevea brasiliensis,热研7-33-97)和RRIM600(Hevea brasiliensis,RRIM600)都是大规模推广种植的优良橡胶树品种,对其核型研究在橡胶树育种中有着重要的意义。采用去壁低渗方法对热研7-33-97和橡胶栽培品系RRIM600的染色体数目与核型进行了研究。结果表明:热研7-33-97的染色体核型公式为2n=36=34m(4sat)+2sm,核型为2B型。RRIM600的染色体核型公式为2n=36=28m(4sat)+8sm,核型为2B型。热研7-33-97和RRIM600的核型在进化上属于比较原始的类型。该研究可为橡胶树育种、种质资源鉴定及基因定位提供细胞学基础。

关键词： 橡胶树 热研7-33-97 RRIM600 核型分析

 全文链接 请求原文