科研产出
橡胶延长因子基因的原核表达及其多克隆抗体的制备
《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:[目的]制备橡胶延长因子重组蛋白及其多克隆抗体。[方法]用RT-PCR法扩增橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)编码区基因,将其克隆到原核表达载体pDEST17中,转化大肠杆菌BL21-AI,用L-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达,并采用亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫小鼠制备多克隆抗体,并用ELISA和W estern blot对抗体效价和特异性进行鉴定。[结果]高效表达和纯化了橡胶延长因子重组蛋白,用其免疫家小鼠,获得了高效价的特异性多克隆抗体,W estern blot检测显示该抗体可识别胶乳中的天然橡胶延长因子。[结论]成功获得橡胶延长因子重组蛋白,制备了效价高、特异性好的鼠抗橡胶延长因子抗体,为进一步橡胶延长因子及其他橡胶粒子膜蛋白的生物学功能研究奠定了基础。


反相高效液相色谱法测定龙眼中阿维菌素残留量
《分析仪器 》 2008 CSCD
摘要:建立了利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定龙眼中阿维菌素残留量的方法。以乙腈为提取溶剂,用碱性氧化铝固相萃取小柱进行净化,经N-甲基咪唑和三氟乙酸酐衍生化后,用高效液相色谱法-荧光检测器(激发波长为365nm,发射波长为470nm)进行测定。在0.05 mg/L~4.0 mg/L浓度范围内,阿维菌素标准工作溶液的色谱峰高与质量浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.9997,方法的添加回收率为88.0%~94.0%,相对标准偏差RSD在1.81%~3.55%之间,检出限为0.001mg/kg。实验证明,该方法简便、快速、准确,可用于龙眼中阿维菌素残留量的测定。


澳洲坚果花芽分化期间内源激素的变化
《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:[目的]研究澳洲坚果内源激素对其花芽分化的影响。[方法]以5年生澳洲坚果品种Own Choice(O.C.)和Beaumont(695)为试材,调查2个品种的花芽分化物候期,并测定其花芽分化期间细根、枝条、叶片中的内源激素含量。[结果]O.C.的花芽出现时间、花序伸长时间及盛花期均比695早;在10月中旬,O.C.叶和枝中的GA3含量较低(213.78、250.00 ng/g),而695含量较高;O.C.叶和枝中的ABA、ZT含量在10月中旬达到高峰(132、48、178、111 ng/g),而695叶中的ABA和枝中的ZT含量在9月到10月下旬较低;O.C.各器官中ABA/GA3、ABA/IAA、ZT/GA3、ZT/IAA的值在10月中旬均高于695。[结论]在澳洲坚果的细根、叶片及枝条中,低水平的GA3、高水平的ABA、ZT、ABA/GA3、ABA/IAA、ZT/GA3和ZT/IAA有利于其花芽分化。


海南东寨港海莲群落林隙结构及其更新特征
《热带作物学报 》 2008 CSCD
摘要:海南东寨港河港海莲群落最主要的干扰类型是树木的大量枯死,约占57%;以20~40m2面积大小的林隙最多,平均每个20m×20m样方中有2.5个,占样方内林隙总数的37.1%;河港海莲群落中林隙绝大多数是由1~4株枯立木所形成;最大围径集中分布在50~60cm、60~70cm2个径级内,约占调查样方林隙枯立木总数的45%;林下幼苗密度高于林隙幼苗密度,而林隙的幼苗高度比林下幼苗高度高,适当的林隙能促进更新;海莲对林隙面积大小的更新反应强于尖瓣海莲。


高效液相色谱法测定鸡肉中己烯雌酚
《理化检验(化学分册) 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:采用高效液相色谱法(HPLC)测定鸡肉中己烯雌酚残留量,将碎鸡肉用甲醇超声提取,合并提取液浓缩近干,用甲醇溶解残渣,所得溶液用于HPLC测定。Symmetry C18用作色谱柱,甲醇与0.0128 mol.L-1磷酸二氢钠溶液以63比37(体积比)混合后作为流动相,流速为1.0 mL.min-1。在230 nm波长处,用二极管阵列检测器检测。对鸡肉样品作了分析,测定结果的相对标准偏差(n=5)均小于10%,回收试验给出回收率在87.5%~92.3%之间。测得方法的检出限(S/N=3)为20μg.kg-1。


钙网蛋白-N58在毕赤酵母中的表达及活性分析
《生物技术 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:目的:利用毕赤酵母表达系统表达Calreticulin-N58蛋白。方法:利用重叠延伸PCR方法合成Calreticulin-N58基因,构建成分泌型的重组表达载体pPIC9K-CRT-N58。该重组表达载体经SacⅠ线性化后,电激转化入毕赤酵母GS115,经MD板和不同浓度G418筛选得到多拷贝重组菌株。经甲醇诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,在鸡胚中进行活性分析。结果:重组质粒pPIC9K-CRT-N58在毕赤酵母中经甲醇诱导能分泌表达CRT-N58蛋白,摇瓶表达量大约为60mg/L,纯化的目的蛋白有显著的血管生成抑制作用。结论:实验成功地在毕赤酵母表达系统中实现了Calreticulin-N58的分泌表达。为Cal-reticulin-N58蛋白的进一步药用研究奠定了基础。
关键词: calreticulin-N58 毕赤酵母 分泌表达 生物活性

