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钙网蛋白-N58在毕赤酵母中的表达及活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 周细南 1 ; 苏东晓 1 ; 潘英文 1 ; 张添元 1 ; 张爱联 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室

关键词： calreticulin-N58;毕赤酵母;分泌表达;生物活性

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2008 年 18 卷 03 期

页码： 13-15

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:利用毕赤酵母表达系统表达Calreticulin-N58蛋白。方法:利用重叠延伸PCR方法合成Calreticulin-N58基因,构建成分泌型的重组表达载体pPIC9K-CRT-N58。该重组表达载体经SacⅠ线性化后,电激转化入毕赤酵母GS115,经MD板和不同浓度G418筛选得到多拷贝重组菌株。经甲醇诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,在鸡胚中进行活性分析。结果:重组质粒pPIC9K-CRT-N58在毕赤酵母中经甲醇诱导能分泌表达CRT-N58蛋白,摇瓶表达量大约为60mg/L,纯化的目的蛋白有显著的血管生成抑制作用。结论:实验成功地在毕赤酵母表达系统中实现了Calreticulin-N58的分泌表达。为Cal-reticulin-N58蛋白的进一步药用研究奠定了基础。

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