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用P.pastoris表达L-阿拉伯糖异构酶及其酶活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 陈丽萍 1 ; 崔艳艳 2 ; 张爱联 2 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： L-阿拉伯糖异构酶;毕赤酵母;基因表达;酶活性;D-塔格糖

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2013 年 23 卷 01 期

页码： 34-37

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:用毕赤酵母表达L-阿拉伯糖异构酶。方法:用PCR法扩增大肠杆菌的L-阿拉伯糖异构酶基因,构建含L-阿拉伯糖异构酶基因的毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K-ai。通过电转法将pPIC9K-ai转化毕赤酵母GS115基因组。先筛选出高G418抗性的克隆,然后再从高拷贝的克隆中筛选出高表达重组L-阿拉伯糖异构酶的重组子作为工程菌GS115(pPIC9K-ai)。结果:在甲醇诱导下,摇瓶发酵GS115(pPIC9K-ai)3d,分泌表达L-阿拉伯糖异构酶32 mg/L。结论:毕赤酵母表达的L-阿拉伯糖异构酶具有转化D-半乳糖为D-塔格糖的生物活性。每升GS115(pPIC9K-ai)发酵液能转化D-半乳糖生成30 mgD-塔格糖。

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