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秋石斛遗传转化筛选标记基因及筛选剂的筛选

广西植物 2025 北大核心 CSCD

摘要:秋石斛(Phalaenopsis-type Dendrobium hybrids)是热带地区重要观赏植物,其因花形奇特、花色丰富,在花卉市场中具有极高的产业价值。分子育种是突破传统育种局限性的重要手段,筛选标记基因辅助转化可以加速转基因进程。为获得适合于秋石斛遗传转化的筛选标记基因和筛选剂,该研究以‘三亚阳光’和‘诺贝尔’的胚性愈伤组织(ECs)和原球茎为外植体,将其置于含不同浓度卡那霉素、遗传霉素(G418)、潮霉素和双丙氨膦的培养基中,测试其对不同筛选剂的敏感性,观察其生长状态,统计存活率,并以最优筛选标记基因和筛选剂进行遗传转化测试。结果表明:(1)2个品种的外植体对不同筛选剂的敏感性表现一致,即对潮霉素、G418、双丙氨膦较为敏感,而对卡那霉素不敏感;在卡那霉素浓度为700 mg·L-1的培养基中,外植体仍能正常生长。(2)潮霉素、G418和双丙氨膦的最低致死浓度分别为30、50、7 mg·L-1。(3)当以潮霉素作为筛选剂、hpt作为筛选标记基因时,初次筛选采用30 mg·L-1的浓度效果最佳;随着筛选周期的延长,适当提高筛选剂浓度有利于获得转基因株系。该研究明确了秋石斛2个栽培种对不同筛选剂的敏感性及其最低致死浓度,验证潮霉素抗性基因(hpt)、新霉素磷酸转移酶基因(npt)和除草剂抗性基因(bar)都可以作为秋石斛遗传转化体系构建的筛选标记基因,对应筛选剂分别为潮霉素、G418和双丙氨膦。此外,在遗传转化筛选过程中采用筛选剂浓度梯度递增策略,有利于转基因外植体的获得。

关键词: 秋石斛 筛选标记基因 筛选剂 遗传转化 筛选浓度

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基于CMIP6气候模式的华南区域荔枝成花诱导预估

果树学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:【目的】在全球气候变暖趋势下,低温积累不足和异常高温是导致荔枝成花不稳定和低产的重要因素,深入开展未来气候变化对荔枝成花诱导演变趋势的预估研究有助于提前谋划选育气候适宜性品种,及时合理调整种植布局。【方法】基于连续5年物候期观测试验和CMIP6的4种气候模式平均集合,构建荔枝成花气候指数模型,评估华南区域基准期和未来时期两种气候情景下荔枝商业化种植界限和成花诱导的时空变化特征。【结果】早熟妃子笑成花诱导需冷量小,≤20℃低温可促进诱导;中晚熟紫娘喜和无核荔枝需冷量大,诱导低温需≤15℃;≥25℃高温对成花诱导有抵消作用。基于诱导积寒和有害积热构建了荔枝成花气候指数(FCI),FCI与成花率有较强相关性,可作为衡量荔枝成花难易程度的参考。基准期(1979—2014年)极端低温≥0℃的区域集中在云南南部、广西和广东中南部、福建南部以及四川盆地,这是当前中国荔枝推广种植的主要区域,未来时期0℃分界线呈现北移,≤0℃区域的范围逐渐碎片化并缩小,SSP_585情景相比SSP_245情景演变更快,在2080年潜在种植区已覆盖除西北高海拔(纬度26.5°N,海拔1500 m)外的所有区域。在未来气候情景下极端高温呈显著上升趋势,SSP_585情景升温幅度明显更快,在2080年华南沿海区域极端高温普遍在27℃以上,海南西北部和南部沿海甚至逼近30℃,荔枝成花逆转风险增大。基准期成花难区域仅限于海南岛,未来时期将向更高纬度地区迁移,在SSP_585情景下,2080年和2100年成花难区域北扩面积最大,逼近北纬25°。【结论】未来气候情景下华南荔枝种植界限将向更高纬度地区扩张,低纬度沿海区域中晚熟荔枝成花稳定性将面临较大风险。

关键词: 荔枝 成花诱导 气候变化 预估

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甲氧基丙烯酸酯杀菌剂在芒果中的累积性膳食风险评估

热带作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:为探明芒果中残留的甲氧基丙烯酸酯杀菌剂可能存在的累积性膳食摄入风险,提出芒果质量安全风险管理建议,本研究基于超高效液相色谱-串联质谱技术,建立了同时测定吡唑醚菌酯等6种甲氧基丙烯酸酯杀菌剂的方法,并运用相对效能因子法和蒙特卡罗(Monte Carlo)模拟评估了目标人群通过芒果摄入甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的累积急性及慢性暴露风险.结果表明:采集的126份来自海南、广西和云南的芒果样品中,吡唑醚菌酯、嘧菌酯和醚菌酯的检出率分别为31%、37%和14%,啶氧菌酯、肟菌酯和氟嘧菌酯均未检出.单样品中甲氧基丙烯酸酯杀菌剂检出1种、2种和3种的分别占22%、22%和5%,共残留比例最高的是吡唑醚菌酯与嘧菌酯组合.评估结果表明,芒果中残留的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂对不同年龄段、不同性别人群的累积急性膳食暴露风险商为0.1%~10.2%,累积慢性膳食暴露风险商为0.1%~1.2%.芒果中甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂残留的累积急慢性膳食暴露风险在可接受范围内,对我国目标人群健康产生不可接受的风险极低.

关键词: 甲氧基丙烯酸酯 杀菌剂残留 芒果 膳食暴露评估 累积性风险

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施用不同有机肥对贝莱斯芽孢杆菌SD13防控豇豆枯萎病的影响

中国农业科学 2025 北大核心 CSCD

摘要:【目的】研究不同有机肥对贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)SD13防控豇豆枯萎病效果的影响,为豇豆枯萎病生物防控技术应用提供理论依据。【方法】通过盆栽试验,评价添加10%羊粪肥、10%蚯蚓粪肥及羊粪肥+蚯蚓粪肥各5%混合有机肥作为肥料载体对贝莱斯芽孢杆菌SD13防控豇豆枯萎病的影响,具体包括空白对照(CK)、病原菌对照(F)、病原菌+SD13(FB)、病原菌+10%蚯蚓粪肥(FW)、病原菌+SD13+10%蚯蚓粪肥(FBW)、病原菌+10%羊粪肥(FS)、病原菌+SD13+10%羊粪肥(FBS)、病原菌+SD13+5%蚯蚓粪肥+5%羊粪肥(FBWS)共8个处理。每处理设3次重复,每重复3盆。于设施大棚中培养45 d后,测定各处理豇豆枯萎病发病率、植株生物量(地上与地下部干重)及防御酶(过氧化氢酶)活性,并采集根区土壤样品,利用16S rRNA高通量测序分析土壤细菌群落结构、多样性及关键微生物类群组成情况。【结果】羊粪肥、蚯蚓粪肥及混用有机肥联合贝莱斯芽孢杆菌菌株SD13对豇豆枯萎防治效果均达75%以上;羊粪肥联合SD13显著增加土壤全氮(30%),土壤优势菌以厚壁菌门(Firmicutes)为主,且与其他菌群呈负相关关系;蚯蚓粪肥联合SD13显著提高罹病豇豆植株地上部干重29%和地下部干重30%,提升豇豆过氧化氢酶(CAT)活性10%,并显著增加土壤细菌丰富度和多样性,使群落结构恢复至健康水平;混合有机肥联合SD13显著增加了罹病豇豆植株地下部干重155%,土壤群落结构被蚯蚓粪肥及羊粪肥微生物群落互相影响。【结论】有机肥类型影响贝莱斯芽孢杆菌SD13在土壤中对枯萎病的防控,蚯蚓粪肥较羊粪肥更适合与SD13联用,在保障较高防治效果下其进一步提高豇豆生物量、过氧化氢酶活性以及土壤细菌丰富度与多样性,增加有益菌群丰度,细菌群落结构和组成恢复到豇豆健康土壤水平,可作为生防菌SD13土壤防控豇豆枯萎病应用的配套有机肥。

关键词: 豇豆枯萎病 贝莱斯芽孢杆菌 有机肥 微生物多样性 生物防治

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可印刷柔性传感器在人体健康监测中的研究进展

材料导报 2025 EI 北大核心 CSCD

摘要:随着可穿戴技术的迅速发展,可印刷柔性传感器作为一种创新的传感器制备方法,已在人体健康监测领域取得了显著的研究进展。本文综述了可印刷柔性传感器在人体健康监测中的研究现状,从印刷方式、传感机制以及材料性质等角度出发,并结合可印刷柔性传感器的灵敏度、稳定性、重现性等方面对目前的可印刷柔性传感器展开了系统的总结。最后,进一步讨论了可印刷柔性传感器在新型可穿戴电子设备和人体疾病防控等领域的应用,并展望了可印刷柔性传感器在实际应用和发展过程中面临的一些挑战。

关键词: 柔性传感器 健康监测 导电材料 可穿戴设备

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南海羽毛藻共附生放线菌分离鉴定及其活性测定

热带作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:病原细菌是造成水产养殖业损失的主要因素,目前生物防治被认为是一种很有前途的防治策略。海藻是海洋生态系统的重要组成部分,海藻藻际有丰富多样的微生物群落。为探究南海海藻共附生放线菌资源的多样性及潜在的应用价值,对海南陵水羽毛藻共附生放线菌进行分离、鉴定与抗菌活性测试。采用稀释涂布法对采集的羽毛藻进行放线菌分离,并进行16SrRNA基因测序、序列比对及系统发育树构建。结果表明:分离获得链霉菌属(Streptomyces)20株、拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)1株以及微杆菌属(Microbacterium)1株;采用滤纸片法以欧文斯氏弧菌(Vibrio owensii)等9种病原细菌为靶标对菌株发酵粗提物进行抗菌活性测试,结果显示,所有菌株至少对1种细菌表现出抑制作用;通过高效液相色谱分析菌株粗提物的化学多样性,结果显示,菌株HZ057具有更丰度的次级代谢产物;为了进一步研究菌株盐胁迫耐性,进行了耐盐性测试,结果显示,所有菌株在0%~4%NaCl条件下生长良好,菌株HZ054和HZ057在12%NaCl浓度下仍有孢子生长;对菌株HZ057进行全基因组测序并通过antiSMASH预测各基因簇功能,结果显示,其基因组含有29个次级代谢产物基因簇且结构类型多样,有待进一步深入发掘。本研究从南海羽毛藻中分离获得链霉菌属、拟诺卡氏菌属以及微杆菌属菌株,并且发现它们具有一定程度的抗菌活性和较丰富的次级代谢产物产生能力,具有潜在的研究价值。本研究结果为推进羽毛藻共附生微生物的开发利用,以及为南海海藻共附生放线菌资源的研究奠定基础。

关键词: 羽毛藻 共附生放线菌 分离鉴定 抗菌活性 次级代谢产物

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不同碳源、氮源对菠萝果醋品质及风味的影响研究

热带作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:针对菠萝果醋在液态发酵过程中底物利用率低,易失去典型风味,且滋味寡淡等不足之处,本研究拟探究添加不同碳源(蔗糖、菊粉)、氮源(富铬酵母、大豆蛋白)对菠萝果醋发酵过程中理化指标(总酸、还原糖、总多酚、总黄酮)、抗氧化性(DPPH自由基清除率及ABTS+清除率)以及挥发性成分的影响,以期提高菠萝果醋发酵过程底物利用率和最终果醋品质。结果表明:不同碳源、氮源均可显著提高醋酸菌的产酸量,并且添加氮源促进醋酸菌利用还原糖、产酸的能力优于碳源。氮源对菠萝果醋总多酚、总黄酮含量以及清除DPPH、ABTS自由基的能力均高于碳源。4组处理的菠萝果醋中共检出37种挥发性成分,主要为酯类、醇类、酸类、酚类、酮类等。添加氮源组的菠萝果醋挥发性成分总浓度高于碳源组,其中,添加富铬酵母的果醋中酯类、酸类化合物的质量浓度最高,分别为3712.37、972.97μg/L,分别是蔗糖组的6.39倍、8.76倍;与蔗糖处理相比,其他处理组的菠萝果醋中各类挥发性成分总浓度增加了3.78~5.19倍。蔗糖处理组的关键挥发性化合物有2种(癸酸乙酯、苯乙醇),菊粉处理组关键挥发性化合物有4种(己酸乙酯、乙酸异戊酯、癸酸乙酯、苯乙醇),氮源处理组关键挥发性化合物有5种(乙酸异戊酯、己酸乙酯、癸酸乙酯、芳樟醇、苯乙醇)。适量添加有机氮源可促进醋酸发酵过程,最大限度发挥醋酸杆菌的发酵潜力,增强菠萝果醋的抗氧化性,提升总酚、总黄酮含量和菠萝果醋风味。

关键词: 菠萝果醋 碳氮源 发酵 理化指标 风味物质

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巴西橡胶树病程相关蛋白:抗逆、乳管堵塞、过敏原性及转基因育种

热带作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins,PR蛋白)是植物响应胁迫的重要功能蛋白,在巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)中具有多重生物学作用.本文系统综述了橡胶树PR蛋白的研究进展,重点探讨其在抗逆机制、乳管堵塞及过敏原性方面的功能特性,特别关注了 PR蛋白与乳管堵塞的重要关系.PR蛋白通过复杂的分子网络参与橡胶树的防御反应,可能通过乳管堵塞过程影响胶乳产量;部分PR蛋白具有较强的过敏原性.PR蛋白的转基因研究已取得初步进展,但需进一步优化表达调控策略以平衡抗逆性、产量和过敏原性等性状.未来研究应加强PR蛋白作用机制的解析,特别是深入探究几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶这2种病程相关蛋白的表达水平与橡胶产量之间的关联性,同时重视对PR-14等尚未充分研究的蛋白类别的功能研究,开发精准的分子育种技术,为橡胶树品种改良提供理论依据和技术支撑.

关键词: 巴西橡胶树 病程相关蛋白 抗逆 乳管堵塞 过敏原性 转基因育种

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木薯MeVINV1互作蛋白的筛选及验证

热带作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:木薯(ManihotesculentaCrantz)作为“淀粉之王”,是一种重要的热带粮食作物,是全球十亿人的主食。木薯液泡转化酶(MeVINV1)通过将蔗糖不可逆地分解为葡萄糖和果糖,参与植物的生长发育和逆境防御。为探究MeVINV1的基因功能和分子调控网络,本研究利用酵母双杂交实验从木薯SC8cDNA酵母文库中筛选出与MeVINV1互作的8个候选蛋白。进一步利用酵母点对点验证发现MeVINV1与MeUN-3、MeMTP1、MeCASP4A3、MePIRL3存在互作关系,且与MeMTP1的互作更强,后续通过双分子荧光互补和荧火素酶互补实验,验证了木薯MeVINV1与MeMTP1的互作关系。因此推测,MeVINV1与MeMTP1协同调控液泡蔗糖代谢和金属离子的转运,参与调控木薯对金属离子胁迫的响应。本研究结果为木薯抗逆育种提供新的基因资源和逆境调控分子机制提供科学依据。

关键词: 木薯 MeVINV1 酵母双杂交 互作蛋白验证

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MeERF6-MePAP2模块响应低温胁迫的分子机制研究

作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:以木薯品种SC124的自交一代分离群体为研究对象,通过集团分离分析法(BSA)和基因组重测序,定位并克隆了MYB类转录因子基因MePAP2。研究发现, MePAP2启动子区域存在一段84 bp的插入缺失,该插入缺失与紫色叶柄和绿色叶柄性状的分离显著相关,并与植株在低温环境下的生长势密切相关。进一步以MePAP2启动子为诱饵利用酵母单杂交试验,筛选到AP2/ERF家族转录因子基因MeERF6,并通过双荧光素酶试验和活体成像技术确定MeERF6能够直接结合MePAP2启动子并正向调控其转录活性。MeERF6在低温胁迫下的响应时间早于MePAP2,且其在叶柄组织中的转录活性显著高于其他部位。本研究揭示了MeERF6-MePAP2模块在木薯低温胁迫响应中的分子调控机制,为培育耐低温木薯新品种提供了重要的理论依据和基因资源。

关键词: 木薯 低温胁迫 MePAP2 MeERF6 酵母单杂

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