科研产出
金龟子绿僵菌菌株生长环境变量的优化
《生态学杂志 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae var.anisopliae)是一种广谱的昆虫病原真菌,提高菌株的生长速率及产孢量具有重要的意义。分别对2株金龟子绿僵菌菌株MA4与MAlm1的菌丝生长及次代产孢具有影响的培养温度、培养基初始pH、装液比、光照及微量元素等环境因素进行了测定。经过优化得到2菌株最佳培养条件分别为:MA4菌株在28℃、pH7、装液比为75ml/250ml、加入微量元素Mn全光照培养时生长最好、次代产孢量最高;MAlm1菌株在28℃、pH9、装液比为75ml/250ml、加入微量元素Cu、黑暗培养时生长最好、次代产孢量最高。
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红树林细菌Bacillus sp.次生代谢产物研究
《中国药物化学杂志 》 2008 CSCD
摘要：目的研究红树林细菌Bacillussp.发酵液中的化学成分。方法采用各种色谱方法进行成分分离,综合运用多种波谱学手段确定单体化合物的结构。结果从一株红树林细菌Bacillussp.的发酵物中分离得到6个单体化合物和一个混合物,单体化合物分别鉴定为N-oleoyl-threonine(1)、大豆素(2)、尿嘧啶(3)、胸腺嘧啶(4)、腺嘌呤核苷(5)、腺嘌呤脱氧核苷(6),混合物鉴定为环(脯-甘)二肽(7)和1,5-dideoxy-3-C-methyl-arabini-tol(8)。结论化合物1、8为首次从该属菌株中分离得到。
关键词： 结构鉴定 柱色谱法 红树林细菌 芽孢杆菌属 化学成分 发酵液
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AcNPV polyhedrin与cry3Aa基因的重组与重组融合蛋白在大肠菌中的表达
《中国生物工程杂志 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的:将cry3Aa基因与斜纹夜蛾多角体蛋白(AcNPV Polyhedrin)基因重组,构建重组蛋白原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:首先以PHT305a载体质粒DNA为模板,PCR扩增cry3Aa基因。再以PET30a-ph-1a载体质粒DNA为模板,PCR扩增多角体蛋白基因。将两基因片段分别连入PMD18-T克隆载体,测序鉴定。表达载体的构建分为两步,先将SacI和XhoI双酶切下来的cry3Aa基因连入表达载体pET30a,再将PMD18T-Ph经BglⅡ和SacI双酶切,所获得的ph基因片段与具有BglⅡ/SacI末端的pET30a-cry3Aa相连接,构建表达载体pET30a-cry3Aa-ph,表达载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导蛋白表达并纯化,SDS-PAGE分析结果。结果:cry3Aa和AcNPV Polyhedrin基因序列与报道完全一致。1mmol/LIPTG诱导4h表达的外源蛋白,经SDS-PAGE分析显示在大约103kDa处有表达产物特异条带。结论:获得cry3Aa与polyhedrine基因的重组蛋白工程菌株,为此基因应用于杀虫剂奠定了基础。
关键词： BT cry3Aa AcNPV polyhedrin 重组 表达
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Mineirao柱花草MSRA基因的克隆及其植物表达载体的构建
《热带作物学报 》 2008 CSCD
摘要：根据抗病柱花草中的1个AFLP特异片段SG2950-1设计引物,利用RACE技术从Mineirao柱花草中克隆到一个MSRA基因;经测序比对,该序列与细胞色素氧化酶系基因有较高的相似性。构建了植物表达载体,通过冻融法将该载体质粒转入根癌农杆菌LBA4404,为进行该基因的功能分析奠定了基础。
关键词： Mineirao柱花草 MSRA基因 植物表达载体
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氮磷钾肥配施对腰果植株抗寒力的影响
《生态环境 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：2008年3月1日调查海南省昌江县受严重寒害的4龄腰果无性系FL30L9(34)氮磷钾肥配施试验果园,观察受寒害植株的主干树皮和各级分枝树皮保持青绿色或变褐色状。根据植株受寒害程度,分析氮磷钾肥配施对植株抗寒力的影响。测定受寒害植株的株高、冠幅,分析植株受寒害程度与植株大小的相关性。结果表明,氮磷钾肥对腰果植株抗寒力的影响顺序是磷肥>钾肥>氮肥;高氮(N650g·a-1·株-1)、中磷(P2O5200g·a-1·株-1)、中钾(K2O250g·a-1·株-1)的施肥水平,有利于提高植株抗寒力,植株受寒害程度低;植株受寒害程度分别与植株的株高、冠幅呈直线极显著负相关和显著负相关。
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尘螨变应原Der fl全序列的原核表达及生物信息学分析
《四川动物 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的 构建尘螨变应原Der fl原核表达体系,并了解其分子特征.方法 提取粉尘螨总RNA,用RT―PCR合成Der fl编码基因,将其克隆至pMD19-T载体,亚克隆至表达载体pET-28a(+),转化至大肠杆菌并刚IPTG诱导表达.用生物信息学软件对测序结果进行分析并预测其空间结构.结果从粉尘螨总RNA中扩增获得Der fl cDNA片段,成功构建了表达质粒pET-28a(+)-Der fl,Western blotting显示原核表达获得成功.测序结果提交GenBank,臀陆号为EU095368,该基因长966bp,与参考序列同源性达99.9％,推测其编码氩基酸321个,属疏水蛋白,位于细胞外,信号肽位于1~18氨基酸处.同源性分析提示Der fl和Eur ml相似率为88％,而Der fl和Derpl的相似率为77％,分子进化树中粉尘螨和梅氏嗜霉螨聚成一簇.Derfl的二级结构由α-螺旋(109aa,33.96％)、延伸链(55aa,17.13％)、β-转角(18aa,5.61％)和随机卷曲(139aa,43.30％)组成:结论 尘螨变麻原Der fl原核表达获得成功,为进一步生产重组变麻原奠定了基础.生物信息学分析表明粉尘螨和梅氏嗜霉螨的亲缘关系可能更近,而与屋尘螨关系稍远,此与现行的形态学分类系统并不符合.
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不同地点的三种红树共附生微生物分离及生物活性差异的研究
《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探索红树共附生微生物及其生物活性在不同地点的差异。[方法]从海南文昌、广东深圳与湛江3个红树林区采集红树木榄、桐花与白骨壤3个品种的根与叶作样品,对样品分别进行微生物分离与抗金黄色葡萄球菌、抗白色念珠菌及B16细胞毒活性的测定。[结果]从18份红树样品中共分离出211株细菌、真菌和放线菌。不同采样地点的微生物组成、不同地点所分离到的菌株的生物活性差异极显著3、个品种的红树以及红树的根在3个不同地点的微生物的生物活性差异均极显著,而红树叶在3个不同地点分离到的微生物的生物活性差异不显著。[结论]该研究获得了一些具有生物活性的菌株,为通过微生物方法获得具有药物作用的化合物提供了可能性。
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马氏珠母贝EST微卫星的筛选
《水产学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：构建了马氏珠母贝的血液、足、鳃、胃、肝、心脏、外套膜、珍珠囊和感染多毛虫马氏珠母贝的血液(血感)等9个组织的cDNA文库,测序获得了6979个EST序列,从中查找到了268个重复序列,隶属于243个EST,含微卫星的EST数占EST总数的3.48%。珍珠囊cDNA文库含微卫星的序列所占比例最高,为6.16%,血感的最低,为1.65%。双碱基重复序列130个,占48.5%,(AT/AT)n类型最常见;三碱基类型的83个,占约31%,其中(AAT/ATT)n和(AAG/CTT)n较多;四碱基重复的有30个,占11.2%,(AAAT/ATTT)n占了该类型的约50%。一共能够设计151对微卫星引物,有130对可以扩增,占合成引物总数的86.09%,其中,多态性引物45对。多态性EST-SSR的筛选将为马氏珠母贝的分子遗传学研究、种质鉴定和野生资源保护等提供可靠的工具。
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