科研产出
江苏玉米矮花叶病病原鉴定
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要：可以感染玉米引起花叶症状的病毒有玉米矮花叶病毒(MDMV)、甘蔗花叶病毒(SCMV)、约翰逊草花叶病毒(JGMV)和高粱花叶病毒(SrMV)等4种,目前国内主要认为是SCMV。为明确江苏发生的玉米矮花叶病的病原,2011年从姜堰田间采集自然发生的呈现玉米矮花叶病典型症状的玉米病叶,初提纯物电镜观察可见750 nm×13 nm线状病毒粒子。根据已经发布的SCMV设计特异性引物,通过RT-PCR扩增获得预期的CP、HC-Pro、NIb和Vpg基因片段,而用MDMV、JGMV和SrMV特异性引物未扩增到预期目的片段。序列测定和同源性分析表明,扩增到的基因片段序列与SCMV对应基因片段序列的同源性在90%以上,与SCMV亚组中另外3个株系MDMV、SrMV和JGMV相应基因片段序列的同源性在80%以下。由此判断姜堰玉米矮花叶病的病原为SCMV。
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花生辐照杀虫防霉工艺剂量确定
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要：以散装花生为材料,经不同剂量的γ射线辐照处理后在室温下贮藏,定期观察害虫侵染程度及霉菌感染程度。结果表明:未经辐照的花生贮存2个月开始生虫,贮存4个月害虫侵染率随贮存时间延长而提高,贮存6个月时害虫侵染率达58%~100%,经辐照处理的花生始终未受害虫侵染。未经辐照的花生贮存3个月后出现霉变,辐照剂量为0.3~0.5 kGy的花生贮存6个月后出现霉变,辐照剂量为1.0、4.0 kGy的花生在辐照后12个月内都未发生霉变。结合相关国际、国内标准以及国内外学者的研究结果,确定花生辐照杀虫的最低有效剂量为0.3 kGy,辐照防霉最低有效剂量为1.0 kGy,最高耐受剂量为4.0 kGy。
绿盲蝽水溶性海藻糖酶ALTre-1基因原核表达、纯化与酶学特性
《中国农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】在前期克隆了绿盲蝽水溶性海藻糖酶(ALTre-1)基因的基础上,以获得具有酶活性的重组蛋白,明确酶促反应的最佳pH值及最适温度,为绿盲蝽海藻糖酶分子调控机制及其抑制剂的应用研究奠定基础。【方法】将含有绿盲蝽ALTre-1基因的T载体经Nde I和Not I双酶切,构建ALTre-1基因原核表达载体(pET28a-ALTre-1),表达载体经诱导表达和蛋白纯化,获得ALTre-1功能区纯化蛋白。在蛋白浓度为0.3 mg·mL-1的条件下,以海藻糖为底物,对纯化得到的重组Tre-1蛋白进行活性检测,确定其酶促反应的最佳pH值和最佳温度。【结果】ALTre-1基因在大肠杆菌中BL21中能够高效表达,纯化获得的重组蛋白在试验条件下有较高的海藻糖酶水解活性((184.83±13.39)nmol·μg-1·min-1)。重组ALTre-1蛋白活性最适pH值为7.0(酶活性为(202.04±13.76)nmol·μg-1·min-1),表明重组ALTre-1蛋白是1个在中性环境中具有最佳活性的海藻糖酶,同时重组ALTre-1蛋白酶活性最适温度为55℃(酶活性为(228.59±4.62)nmol·μg-1·min-1)。【结论】本研究克隆得到了ALTre-1全长基因,获得了具有海藻糖酶活的重组蛋白,该重组蛋白在pH 7.0、温度55℃条件下酶活性最高。
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鸭源坦布苏病毒株NJX-4的分离鉴定及部分生物学特性
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要：采用vero细胞与鸡胚传代接种法,从江苏省南京市某肉鸭场发病鸭(临床表现为瘫痪、卧地不起、全身多器官出血)肝脏、脾脏病料组织中分离出1株病毒。RT-PCR结果排除了分离病毒为禽流感、新城疫、鸭减蛋综合征、传染性支气管炎、鸭病毒性肝炎、鸭瘟等病毒的可能性;禽坦布苏病毒特异引物扩增结果呈阳性。序列测定与分析结果显示,分离病毒与GenBank上登录和实验室保存的坦布苏病毒E基因序列同源性在99%以上;部分生物学特性结果显示,该分离病毒不能凝集鸡红细胞,且对乙醚、三氯甲烷敏感,可引起试验鸭感染发病。分离毒株NJX-4是一种新的坦布苏病毒,属于黄病毒科坦布苏病毒属,暂称为鸭坦布苏病毒。
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4株猪肺炎支原体脂膜蛋白对猪肺泡上皮细胞生长抑制作用的比较
《畜牧兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：比较不同毒力猪肺炎支原体的脂膜蛋白(LAMPs)对猪肺泡上皮细胞生长抑制作用的差异。使用Trion-X114从猪肺炎支原体培养物中提取LAMPs,采用MTT法检测LAMPs对细胞生长的抑制率,观察其对细胞生长状况的影响,并使用Griess试剂对细胞培养物中NO的浓度变化进行测定。结果表明,4株猪肺炎支原体的LAMPs均对猪肺泡上皮细胞SJPL有抑制作用,其抑制作用的强度与猪肺炎支原体的毒力强弱基本相符,即NJ株与168株的抑制作用较强,而168致弱株及J株对SJPL细胞的抑制作用较弱。其中,NJ株的IC50最低,为0.13mg·mL-1;而J株的IC50最高,为0.56mg·mL-1,并且LAMPs可以诱导细胞产生NO。猪肺炎支原体LAMPs对猪肺泡上皮细胞的抑制作用与支原体的毒力相关,强毒株LAMPs的抑制作用较大,而弱毒株的抑制作用较小。
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转基因棉花再生幼苗简易移栽方法
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要：对影响转基因棉花再生幼苗移栽的因素进行了研究,结果表明,在再生幼苗具有健壮根系的基础上,移栽基质是否无菌对移栽成活率无明显影响;5 mg/L NAA水溶液蘸洗再生幼苗根系后移栽,可使移栽成活率提高5百分点;移栽过程中对再生幼苗的温度和湿度控制是棉花再生幼苗移栽成活的关键,温度控制在25~30℃的相对稳定范围有助于再生幼苗快速生长;幼苗移栽后保湿14 d左右再缓慢透气7 d可使再生幼苗从高湿环境向正常空气湿度环境过渡,保证移栽成活率。在此基础上,建立了转基因棉花再生幼苗移栽方法,利用该方法可使80%以上再生幼苗移栽成活。
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樱桃番茄新品种‘金陵美玉’
《园艺学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：樱桃番茄‘金陵美玉’是以‘JSCT10’为母本,‘JSCT17’为父本育成的有限生长类型一代杂种,生长势强,叶色深绿,果实圆形,亮粉色,酸甜可口,单果质量20~25 g,果皮薄但韧性强,不易裂果,耐贮运,抗枯萎病、ToMV等,适于保护地栽培。
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低磷胁迫下水稻苗期根长性状的QTL定位
《华北农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：磷素缺乏限制作物产量的提高,水稻低磷胁迫下根系伸长性状的遗传研究,对选育耐低磷品种具有指导意义。利用一套以9311为遗传背景携带日本晴置换片段的染色体片段置换系为材料,对低磷胁迫下水稻苗期主根伸长性状及相对性状进行了QTL定位。结果表明,两亲本及置换系群体对低磷反应存在明显差异。共定位到9个QTLs,其中正常水平下2个,低磷胁迫水平下4个以及3个相对性状QTLs。9个QTLs中有5个QTLs的加性效应值为负,效应来源于低磷敏感亲本日本晴,其余4个QTLs的加性效应值为正,效应来源于耐低磷亲本9311。在低磷根长和相对性状中共同检测到一个QTL,位于水稻第5染色体上,该位点没有磷相关QTL的报道。以上结果将为准确鉴定水稻耐低磷胁迫的遗传位点及分子标记辅助选育耐性品种提供依据。
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