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镰刀菌Q7-31T内切葡聚糖酶Egn20的分离纯化鉴定及酶学特性

微生物学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:【目的】从镰刀菌Q7-31T燕麦秸秆诱导发酵的粗酶液中分离、纯化并鉴定内切葡聚糖酶,研究其酶学特性。为丰富和完善镰刀菌的酶系信息提供理论支持。【方法】以燕麦秸秆为碳源诱导发酵培养菌株,采用Sephacry S-100凝胶柱层析和DEAE琼脂糖弱阴离子交换柱层析对粗酶液进行分离纯化得到内切葡聚糖酶Egn20,随后对其进行了酶学性质分析和串联质谱鉴定。【结果】分离纯化得到内切葡聚糖酶Egn20,其分子量为55.37 k Da,等电点为7.44;酶学特性结果表明:Egn20对羧甲基纤维素的最适反应温度为40℃,最适p H为6.0,该酶在45℃和弱酸性环境下较稳定,Fe2+对其有激活作用,Na+、Ca2+、Mg2+、Zn2+和K+抑制该酶活性,Hg2+使该酶失活;酶学特性和串联质谱鉴定的结果表明Egn20属于GH7家族。【结论】从镰刀菌Q7-31T粗酶液中分离纯化得到内切葡聚糖酶Egn20,并对其进行了酶学性质的研究和串联质谱鉴定,结果表明Egn20为GH7家族内切葡聚糖酶。本研究为丰富和完善镰刀菌的酶系信息提供了理论和数据支持。

关键词: 镰刀菌 内切葡聚糖酶 分离纯化 鉴定 酶学特性

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双单倍体马铃薯DM再生体系的构建

江苏农业科学 2015 北大核心

摘要:以双单倍体马铃薯(Solanum tuberosum)DM1-3-516-R44的无菌茎段、叶片作为材料,构建马铃薯离体再生体系。结果表明,茎段愈伤组织适宜的诱导培养基BI为MS+0.5 mg/L IAA+2.5 mg/L 6-BA,叶片愈伤组织适宜的诱导培养基BN为MS+1 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA,愈伤的平均诱导率均达95%以上,甚至可以全部诱导愈伤形成;愈伤组织分化不定芽适宜的培养基BZ为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT,分化率也达到90%左右。

关键词: 马铃薯 双单倍体 愈伤组织诱导 再生体系

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氮、磷、钾及微量元素肥料配施对蚕豆养分吸收利用的影响

湖北农业科学 2015 北大核心

摘要:对蚕豆(Vicia faba L.)进行了氮、磷、钾、硼、钼肥料配施试验。结果表明,氮、磷、钾、硼、钼肥配合施用对蚕豆子粒产量、地上部分生物量和收获指数均有明显影响,按肥料增产率由高到低的顺序依次是磷>氮>钾>钼>硼。氮、磷、钾、硼、钼肥合理配施,能够促进蚕豆地上部养分的累积,增加氮、磷、钾养分的含量。同时氮和磷在子粒中分配比例也相应提高,钾在茎秆和角果壳中分配比例较高,子粒中较低。

关键词: 蚕豆(Vicia faba L.) 肥料 配施

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西北地区蚕豆苗期干旱胁迫下表型差异性与抗旱性研究

东北农业大学学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:采用盆栽人工控水方法,选择西北地区7份蚕豆主栽品种为材料,研究不同水分胁迫(轻度LS和重度WS)下蚕豆苗期地上部、地下部及叶片生理生化指标与抗旱性的关系。结果表明,干旱胁迫对蚕豆幼苗地上、地下部分均有不同程度影响,幼苗株高、茎粗、叶面积、侧根数量及蚕豆主根长度生长受到抑制,且随干旱胁迫程度加剧,抑制作用明显(P<0.05),临蚕9号株高、茎粗、叶面积、主根长度均表现显著抑制作用,为干旱敏感性蚕豆品种;超氧化物歧化酶(SOD)活性和叶绿素含量(Chl)在水分胁迫下总体呈先升后降趋势,青海13号SOD活性上升幅度较大,抗旱性较强。叶片可溶性糖含量(WSS)和细胞质膜相对透性(REC)随干旱胁迫加重均有明显增加,WSS增加越快,抗旱性越强,REC则相反,抗旱性越强的品种,细胞质膜透性增加越少,而蚕豆叶片组织相对含水率(RWC)比正常供水的下降明显,且下降幅度小的品种抗旱性越强;通过隶属函数法综合评价苗期抗旱性大小为:青海13号>临蚕6号>青蚕14号>青海12号>马牙>临蚕9号>临蚕8号;通过主成分分析和灰色关联分析,筛选出WSS、REC、RWC、SOD等生理指标和株高、叶面积、根长等形态指标,可作为蚕豆品种苗期抗旱能力评价必不可少的指标。

关键词: 蚕豆 苗期 抗旱性 形态指标 生理生化指标

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干旱胁迫下菊芋可溶性碳水化合物的积累及分配规律

江苏农业科学 2015 北大核心

摘要:以青芋1号、青芋2号2个菊芋品种为试验材料,采用不同的聚乙二醇PEG-6000胁迫浓度(0、10%、20%、30%)及不同控水胁迫强度(轻度、中度、重度)2种人工模拟干旱胁迫的方式对其不同部位可溶性碳水化合物在处理不同时间后的含量变化进行研究。结果表明,在PEG胁迫下,青芋1号、青芋2号叶片中可溶性碳水化合物含量均随着胁迫时间增加而增加;青芋1号茎中随着胁迫时间增加变化趋势不同,青芋2号在PEG浓度为30%、胁迫24 h时效果最明显;青芋1号、青芋2号根中可溶性碳水化合物含量随着胁迫时间增加均增加;在不同控水强度胁迫下,青芋1号叶片中呈现先上升后下降的趋势,青芋2号叶中呈上升趋势;青芋1号、青芋2号茎中均随着控水时间的增加而增加;青芋1号根中随着控水时间的增加呈现下降的趋势,青芋2号根中变化不同,但差异不大。

关键词: PEG 干旱胁迫 控水胁迫 菊芋 可溶性碳水化合物 积累 分配

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低温产甲烷菌厌氧消化研究进展

江苏农业科学 2015 北大核心

摘要:低温产甲烷菌对于自然界的碳素循环具有非常重要的作用,近年来引起了国内外学者的广泛关注。利用低温产甲烷菌实现低温厌氧消化过程,可从本质上突破低温厌氧工艺的技术瓶颈,进而拓展厌氧生物处理技术的应用范围,并降低处理成本。从低温产甲烷菌的资源与分布、冷适应性机制和分子生物学研究现状几个方面,对低温产甲烷菌的研究进展进行了综述,并对其在低温厌氧消化中的应用进行了分析。

关键词: 低温产甲烷菌 种类 分布 冷适应性机制 分子生物学技术 低温厌氧消化 研究进展 应用现状

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马铃薯T-DNA插入拷贝数的检测及对农艺性状的影响研究

中国农业大学学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:以转基因马铃薯株系为材料,采用Real-time PCR方法,以SYBR Green I为荧光染料,以马铃薯块茎贮藏蛋白基因(Patatin)作为内参基因,以植物表达载体上的潮霉素抗性基因(HPT)为筛选标记基因,建立目的基因CT值与起始模版的相关性标准曲线,通过实时荧光定量PCR分别获得每个样品中内参基因和外源基因的CT值,根据Pfaffl法计算获得了T-DNA在转基因马铃薯中的拷贝数,且与Southern blot方法进行了比较,并结合田间农艺性状,分析了外源基因拷贝数马铃薯株高及薯块产量的影响。结果表明,内参基因和外源基因标准曲线的相关系数分别为R2=0.996、R2=0.995和R2=0.990。在所测的23株转基因株系中,12株为单拷贝插入,6株为双拷贝,5株为多拷贝。Real-time PCR比Southern blot方法结果更准确、操作更简便快捷、成本更低。且插入拷贝数的多少与马铃薯田间农艺性状变化有一定的关系,发现2拷贝以上的T-DNA插入较容易引起部分性状的改变。

关键词: 马铃薯 实时荧光定量PCR 拷贝数 农艺性状

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干旱调控下马铃薯抗旱相关性状的遗传变异分析

种子 2015 北大核心 CSCD

摘要:以敏感型品种大西洋和耐旱型品种定薯1号为亲本构建的185个F1分离群体为材料,研究了正常灌溉和干旱胁迫2种环境条件下,该群体株高、茎粗、主茎数、分枝数、单株结薯数、单株薯重共6个数量性状的遗传特点。结果表明:2种环境条件下,分离群体各性状分离明显,且基本符合正态分布,表现为数量性状遗传特点,是一个较为理想的QTL作图群体。分离群体在干旱胁迫和正常灌溉条件下相关性状的差异主要是由于环境条件引起的。

关键词: 马铃薯 分离群体 干旱胁迫 遗传分析

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黄绿卷毛菇生长规律的初步研究

江苏农业科学 2015 北大核心

摘要:为探究黄绿卷毛菇的野外生长规律,于2014年7月在青海省玉树藏族自治州对黄绿卷毛菇的野外生长进行观测。结果表明,根据黄绿卷毛菇菌盖直径,结合其生长速度与鳞片状态,将黄绿卷毛菇的生长发育过程分为5个阶段,即菌核期(菌盖直径<1 cm)、初生期(菌盖直径1.0~<2.5 cm)、幼年期(菌盖直径2.5~<4.5 cm)、开伞期(菌盖直径4.5~6.5 cm)和衰败期(菌盖直径>6.5 cm);黄绿卷毛菇的生长周期为18~22 d;降水对黄绿卷毛菇的生长具有明显的促进作用。本研究首次调研了野生条件下黄绿卷毛菇的生长发育规律,对于解释蕈菌的生长发育机制具有指导意义。

关键词: 黄绿卷毛菇 生长规律 菌盖直径 降雨

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藏药马尿泡茎段快繁体系及分化过程体内生物碱变化研究

中草药 2015 北大核心 CSCD

摘要:目的以马尿泡Przewalskia tangutica种子无菌苗带腋芽茎段为材料,建立了马尿泡的茎段快速繁殖体系。方法在无菌条件下,将生长30 d左右的马尿泡种子无菌苗剪成2~3 cm长的带腋芽的茎段接种在不同的芽增殖培养基和生根培养基上,筛选出最适合芽增殖培养基和生根培养基,并利用HPLC法测定组培苗不同部位和愈伤组织的4种托烷类生物碱的量。结果筛选出最适合芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率最高为96.67%,最适合不定芽生根培养基为MS+NAA 0.5mg/L,根的诱导率最高,为71.67%。利用HPLC法测定试管苗不同部位4种生物碱量的结果表明,根中总生物碱量最高,高达141.25μg/g。愈伤组织中总生物碱的量低于根、茎、叶中总生物碱的量。结论马尿泡组培苗不同部位总生物碱的量和不同种类生物碱占总生物碱的比例不同,表明器官建成或脱分化过程可能影响马尿泡组培苗植株体内生物碱的合成和积累。

关键词: 马尿泡 组织培养 分化 托烷类生物碱 诱导率

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