AP70抗病基因转化番茄的研究

周静亚; 徐忠传; 张保龙; 何晓兰; 《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：[目的]通过基因工程提高番茄抗病性。[方法]通过冻融法将含萝卜抗真菌蛋白基因的质粒AP70转入农杆菌LBA4404中,再用农杆菌介导法将AP70抗病基因对番茄进行遗传转化,研究预培养、侵染时间等因素对AP70转化番茄的影响。[结果]带柄子叶诱导番茄产生不定芽的效率比子叶块效率高。农杆菌浸染番茄子叶前预培养1 d,不仅能提高子叶存活率,而且可降低共培养时外植体的污染率。农杆菌对番茄子叶的侵染时间最好不超过5 min。外植体筛选培养基中Kam的浓度不宜太高或太低,可获得少量转AP70基因的抗性芽。[结论]农杆菌对番茄子叶侵染前要进行稀释,且侵染时间不宜超过5 min,共培养1 d时转化率较高。

关键词： 番茄 农杆菌 基因转化 抗性芽

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水稻条纹病毒不同地区分离物的致病性研究

程兆榜; 任春梅; 周益军; 范永坚; 谢联辉; 《植物病理学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：利用36个粳稻品种对来自江苏、云南、河北、山东等地的22个水稻条纹病毒(RSV)分离物进行致病性测定,根据各分离物在36个品种上的平均发病率,将参试分离物划分为HV、SH、MV、SL和LV 5个致病类型,致病力强弱为HV>SH>MV>SL>LV,其中MV和SL型占77%,表明RSV对粳稻的致病力中等偏弱。各致病型在地区间和年度间呈随机分布状态,暗示自然条件下特定地区的RSV为混合致病群。根据致病性测定结果同时将36个粳稻品种划分为免疫、抗、中抗、中感、感和高感6个抗感类型,其中中感和感病类型占70%,无高感和免疫类型,显示粳稻对RSV比较敏感但有一定程度的耐受性。根据试验结果筛选出11个具有鉴别能力的水稻品种,可对RSV分离物进行致病型鉴定。研究发现部分抗病品种对一些分离物表现为中抗~中感类型,接种量加大时可转为感病类型,由此提示各地在应用抗病品种防治水稻条纹叶枯病时应根据当地RSV致病型的差异,针对性地选用抗病品种,当灰飞虱超量发生时需及时做好治虫控病工作,并随时监测当地RSV致病型的变化,警惕品种抗性丧失。

关键词： 水稻条纹病毒 致病性 抗病性 鉴别品种

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玉米赤霉醇酶标抗原的制备及其直接和间接竞争ELISA检测方法的建立与比较

刘媛; 刘贤进; 余向阳; 张存政; 张晓; 刘蓉蓉; 龚振明; 《分析科学学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：采用活性酯法将半抗原玉米赤霉醇-16-羧丙基醚与辣根过氧化物酶连接,制备了三种结合比的酶标抗原。通过紫外吸收法和直接非竞争ELISA法对酶标抗原的偶联结果和抗原性进行鉴定。最终选择结合比为1.3∶1的酶标抗原建立直接竞争ELISA检测方法。并对建立的直接竞争ELISA(DC-ELISA)与间接竞争ELISA(IC-ELISA)方法在检出限、检测线性范围、检测时间和二抗的使用方面进行了比较。

关键词： 玉米赤霉醇 酶标抗原 酶联免疫吸附试验(ELISA)

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侗族发酵酸肉中乳酸菌的筛选及鉴定

章德法; 徐为民; 徐幸莲; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

关键词： 发酵酸肉 乳酸菌 分离 鉴定

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海雀稗幼穗离体培养植株再生技术

梁流芳; 佘建明; 吴瑛瑛; 叶晓青; 董民强; 倪万潮; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

关键词： 海雀稗 幼穗 离体培养 颗粒状愈伤组织 植株再生

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P1因子分子克隆的体外感染性分析

温立斌; 何孔旺; 杨汉春; 《畜牧兽医学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：利用脂质体分别将类猪圆环病毒2型的P1因子的单拷贝分子克隆和双拷贝串联分子克隆转染PK-15细胞,电镜检测可在转染P1因子双拷贝串联分子克隆的PK-15细胞的胞浆和胞核中发现包涵体。相比较而言,胞浆包涵体数量较多,基本呈圆形,直径0.1~0.3μm;胞核包涵体有2种类型:一种为小而圆的、直径约0.1μm的高电子密度的小体;一种是大小为0.4~0.8μm、略呈六角形的包涵体。将转染细胞连续传代5次,通过PCR可在转染P1因子双拷贝串联分子克隆的细胞传代物中检测到P1因子的DNA。这是首次报道P1因子的分子克隆在体外具有感染性,为进一步研究P1因子在体内的生物学意义奠定了物质基础。

关键词： P1因子 分子克隆 体外 感染性分析

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四个两系杂交水稻穗增重特性分析

吕川根; 胡凝; 相国根; 姚克敏; 邹江石; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：分析了以培矮64S为母本的4个两系法杂交籼稻的穗增重特性。4个组合的起始质量W0和终极质量A均明显大于三系杂交稻汕优63,表明这4个组合的穗型均较大,为重穗型杂交稻;起始增重势GR0/W0和最高增重速率GRpoi均明显小于汕优63;穗重活跃增重期为16~24 d,长于汕优63,完成穗增重需要35~53 d,而汕优63仅需27 d。为使两系杂交稻较早出现较高的穗增重高峰,并使活跃增重期延长,而完成整个穗增重的天数缩短,栽培上尤其要注意孕穗期增加茎秆中物质的积累,出穗后保证有充足的光合产物,并预防叶片光合功能早衰。

关键词： 两系法杂交稻 生长分析 穗增重特性

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食用大豆油中DNA的快速提取和转基因成分定性检测

王澎; 金丽晨; 耿志明; 刘蔼民; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：转基因生物(GMO)制品中转基因成分检测的难点在于深加工产品中DNA的提取。本试验以食用大豆油为研究对象,研究操作简单、费用低廉的大豆深加工产品DNA提取的新方法。利用大豆内源基因Lectin设计引物,对所获得的DNA进行PCR检测,结果证实通过本方法提取的DNA纯度足以进行PCR反应。利用转基因大豆转化载体序列设计引物,进一步对其转基因成分进行检测,结果表明,用本方法从转基因大豆油中提取的DNA含有转基因成分。

关键词： 大豆深加工产品 大豆油 PCR GMO检测

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斜纹夜蛾核型多角体病毒不同分离株基因序列的同源性分析

刘艳荷; 方继朝; 《昆虫学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：研究SpltMNPV不同分离株及SpltMNPV分离株与SpliNPV间基因序列的同源性,为SpltMNPV分离株的利用提供理论基础。根据已发表的斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltMNPV)中国株(Zh)基因组全序列(AF527603)和海灰翅夜蛾核型多角体病毒(SpliNPV)NotI-D片段序列(AF527603)设计引物,PCR方法扩增得到SpltMNPV日本福冈株(Fu)、埃及株(Eg)和小笠原株(Og)的ORF39～ORF42和ORF119～ORF124编码区全序列。SpltMNPV不同分离株及SpltMNPV分离株与SpliNPV间基因序列的相似性比较,Zh株和Og株,Eg株、Fu株和SpliNPV的相似性高,而Zh株和Eg株、Fu株或SpliNPV,Og株和Eg株、Fu株或SpliNPV的相似性都比较低。亦即SpltMNPV3种基因型,B型和C型的同源性高,A型与B型或C型的同源性比较低,但A型与SpliNPV的同源性高;同一基因型内不同分离株(Eg株和Fu株)的同源性高。ETG分子进化分析表明Eg株、Fu株和SpliNPV处于一个分支,而Eg株、Fu株和SpliNPV与Zh株和Og株则处于不同的分支。因此推断Eg株和Fu株为SpliNPV的分离株,而Og株为SpltMNPV的分离株。

关键词： 斜纹夜蛾核型多角体病毒 分离株 基因 序列分析 同源性 系统发育

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茄子黄萎病生防内生细菌29-12发酵条件的初步研究

孙义; 居正英; 林玲; 杨启银; 周益军; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：初步探讨茄子黄萎病生防内生性枯草芽孢杆菌29-12的发酵条件,通过培养条件优化及正交试验得出最佳培养基配方为:玉米粉15 g/L、甘薯淀粉5 g/L、豆粕粉15 g/L、蛋白胨8 g/L、MgSO40.01%、K2HPO40.05%。最佳培养条件为:起始pH值7.5,250 ml三角瓶装液量100 ml,摇瓶速度120 r/min,接种量10%,温度30℃。在此条件下培养29-12菌株84 h,抑菌圈大小为2.12 cm,1 ml含菌量为1.58×109,芽孢得率为100%。

关键词： 枯草芽孢杆菌 正交设计 发酵条件

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