科研产出
可可体细胞胚胎发生及植株再生体系的构建
《热带作物学报 》 2005 CSCD
摘要:以可可(TheobromaCacaoL.)的子叶为外植体,通过体胚发生途径,诱导再生可可植株。各培养阶段的优化培养基和培养条件为:(1)愈伤组织诱导培养基(PCG):改良DKW+2,4-D3.0mg/L+KT1.0mg/L+TDZ0.01mg/L,在(28+2)℃(以下培养温度均同)温度条件下,暗培养20d,诱导率为96.67%;(2)愈伤组织增殖培养基(SCG):改良DKW+2,4-D3.0mg/L+KT1.0mg/L,暗培养20d;(3)胚状体诱导培养基(ED):改良DKW+Sucrose30g/L,暗培养60 ̄150d,胚状体诱导产生并发育成熟,胚状体的诱导率为33.33%;(4)成熟胚诱导成苗:①PEC培养基为:改良DKW+Glucose20g/L+Sucrose10g/L,光照为16h/d,培养60d;②采用RD培养基:改良DKW+IBA1.5mg/L+IAA0.5mg/L,光照为16h/d,培养30 ̄90d后,可得到完整的植株,再生植株的诱导率为42%。


超干贮藏对柱花草种子的影响
《热带作物学报 》 2005 CSCD
摘要:以热研5号柱花草为材料,研究超干贮藏对柱花草种子的生理生化变化及超干保存技术指标。结果表明,含水量降至3.17%的柱花草超干种子,经50℃15d人工加速老化后,表现出较强的抗老化能力。贮藏2a后,超干种子与分别在5℃和-20℃贮藏下的含水量为8.10%的种子相比,它们的发芽率、活力指数等方面均无显著性差异;超干种子与室温贮藏下的对照相比,其电导率降低43.0%、脱氢酶活性增强33.5%、丙二醛积累减少50.0%、幼苗的吸氧量高33.0%。经超干处理的柱花草种子能显著提高其耐藏性。


热带地区拟南芥栽培技术及基因转化体系的构建
《热带作物学报 》 2005 CSCD
摘要:由于气候、温度、湿度等原因,拟南芥在热带地区的应用一直受到限制。笔者结合海南气候特点,在培养介质、播种、湿度、光照条件及转化方法等方面进行了探索,摸索出拟南芥栽培、实验室培养和基因转化的条件,为在海南利用模式植物拟南芥进行重大基础研究提供了详实的数据资料。


平菇产植酸酶菌株的筛选及植酸酶基因区域的克隆
《生命科学研究 》 2005 CSCD
摘要:从平菇(Pleurotus ostreatus)8个菌株中筛选出3株高产植酸酶菌株,并根据GenBank中植酸酶基因的保守区设计并合成一对特异性引物,以平菇菌丝的总DNA为模板,通过PCR扩增,获得了一条长约920bp的片段.DNA序列测定结果表明,该片段长度为919bp.采用blast进行序列比对,结果表明:该片段与曾报道的源于Tram etes pubescens的植酸酶phyA(GenBank Accession:AJ310700)基因相比较,其DNA序列同源性为93%.该片段含有3个内含子,含有植酸酶基因的活性位点保守序列(Actives-ite sequence)RHGARYPT.


海南黄灯笼辣椒顶死病病原病毒的分离鉴定
《热带作物学报 》 2005 CSCD
摘要:从海南省黄灯笼辣椒顶死病株上分离纯化得到一个病毒分离物。研究结果表明,该病毒分离物能通过汁液磨擦接种侵染供试植物中的4科11种植物,可由桃蚜传播;提纯病毒粒子呈球形,直径28 ̄30nm,外壳蛋白分子量约为28ku;分离物与CMV抗血清在ELISA测定中呈阳性反应;提取病毒分离物RNA,应用RT-PCR方法克隆了病毒外壳蛋白(CP)基因。CP基因675bp,编码218个氨基酸。对CP基因序列分析表明,该病毒分离物的CP基因核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ分离物的同源性均在92.1%以上,所推导的氨基酸序列同源性在96.3%以上,而与亚组Ⅱ分离物的核苷酸序列同源性均低于77.3%,所推导的氨基酸序列同源性均低于80.7%。据此将该病毒分离物鉴定为黄瓜花叶病毒,归属于亚组Ⅰ。


刚果12号桉离体组织的多倍体诱导
《热带作物学报 》 2005 CSCD
摘要:以刚果12号桉(Eucalyptus12ABL)下胚轴诱导出的愈伤组织及丛生芽为材料,采用浸渍法、点滴法、混培法等3种秋水仙碱处理法对其进行多倍体诱导。结果表明:在诱导愈伤组织时,浸渍法以处理时间为10h与药液处理浓度为7500mg/L、处理时间为22h与药液处理浓度为2500mg/L的2个组合变异率最高,达到40%,点滴法以药液处理浓度为2500mg/L变异率最高,达到42.9%;在诱导不定芽时,混培法以药液浓度为40mg/L处理10d的变异率最高,达到22.5%,点滴法以药液浓度为2500mg/L的处理变异率最高,达到26.7%。多倍体植株形态特征表现为叶片肥厚宽大,叶色浓绿,茎较粗壮、气孔较大且数目较少,其染色体数目变为2n=4X=44。


香蕉果实SMART cDNA文库的构建及利用PCR方法筛选香蕉Actin2基因
《热带亚热带植物学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要:利用SMART(switching mechanismat5’end of RNA transcript)技术,提取果实少量总RNA,经15-25轮LD-PCR扩增获得全长ds-cDNA,构建了海南主栽的食用香蕉巴西蕉(Musa AAA Group Cavendish)果实的cDNA文库。所构建的文库容量为5×106Pfuml-1,重组率93%。利用此cDNA文库,采用96孔板PCR法筛选香蕉Actin2基因,测序结果显示,序列全长1723bp,编码区长1134bp,编码378个氨基酸,与蝴蝶兰Actin2基因序列同源率达83%,已递交GenBank,接受号692696。
关键词: 香蕉 果实 SMARTcDNA文库 96孔板PCR Actin2基因

