科研产出
具血型转换功能的咖啡α-半乳糖苷酶基因的克隆与表达
《遗传 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：从大粒种咖啡(Coffea liberica)和中粒种咖啡(Coffea canephora)中分离克隆到了α-半乳糖苷酶(α-D-galactosidase)cDNA的开放阅读框架即编码区,分别记为Gal-D与Gal-Z,长度与已发表的小粒种咖啡cDNA编码序列相同均为1 089 bp,同源性与已发表的小粒种咖啡cDNA编码序列相比分别为98.7%和99.27%。将克隆到的Gal-D与Gal-Z用巴斯德毕赤氏酵母Pichia pastoris表达载体pPICZαA(分泌甲醇诱导型)和pGAPZαA(分泌组成型)成功地构建了如下酵母表达载体:pPICZαA/Gal-Z,pPICZαA/Gal-D和pGAPZαA/Gal-D,并转入酵母宿主菌GS115进行了发酵表达研究。实验得出工程菌株pPICZαA/Gal-D/GS115的重组表达产物酶活最高可达48.22(U/mL),对发酵产物进行了SDS-PAGE电泳,得到一条清晰的主条带。
关键词： α-半乳糖苷酶 cDNA克隆 咖啡豆 B→O血型转换 P.pastoris
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灰树花gpd-GF启动子的克隆与表达载体的构建
《热带作物学报 》 2005 CSCD
摘要：根据已经报道有强启动子活性的香菇gpd启动子设计引物,从灰树花基因组PCR扩增获得大小分别为1018,615bp的2个片段gpd-GF1和gpd-GF2。通过DNA序列测定得知二者的大小分别为1018,615bp。经NCBI中的BLASTN比较,gpd-GF1,gpd-GF2与已报道的香菇中克隆的gLeGPD基因上游序列的同源性分别为96%,98%。通过启动子预测软件分析,结果表明,gpd-GF1和gpd-GF2含有多个顺式作用元件如TATAbox,GATAbox,CAATbox等,初步证实gpd-GF1,gpd-GF2可能有较强的启动子活性。将gpd-GF1,gpd-GF2分别与切除CaMV35S启动子的pCAMBIA1301大片段进行亚克隆,构建成表达载体pCBgpdGF1和pCBgpdGF2。
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中国农业科技园的建设模式及特点
《贵州农业科学 》 2005 CSCD
摘要：中国农业科技园自1994年首次在北京建立了以展示以色列农业和节水技术为主体的示范园中示范农场及上海建立了以荷兰全套玻璃温室和工厂生产技术为主体的孙桥现代农业科技园区以来，经过10年的努力、创新，目前已形成了具有中国特色的农业科技园。至2003年全国已建立国家级农业科技园区36个，省（市）级农业科技园400多个，这些国家及省（市）级农业科技园区的建成，又进一步引导着全国近4000个中小农业科技园的发展，已初步形成了具有中国特色区域农业集成创新的主体，成为国家农业创新体系的重要组成部分。
关键词： ~~
玉米钾素营养临界期试验研究
《种子 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：利用缺钾土壤盆栽玉米,在玉米不同生育时期供给充足 的钾营养,研究各生育时期供钾对玉米生长的影响。通过对全 生育期均不施钾和第一次施钾处理所取样品的干物质积累状 况分析,不同处理生育末期收获样品的最终生物学产量、钾含 量、钾吸收与钾利用效率的分析及不同处理生育末期收获样品 的多指标聚类分析,可知出苗后30d左右是玉米钾营养临界 期,此时玉米处于5～6叶期。
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锡兰肉桂丙酮粗提物对皮氏叶螨的毒力及其代谢酶活性的影响
《中国生态农业学报 》 2005 CSCD
摘要：试验研究锡兰肉桂丙酮粗提物对皮氏叶螨的毒力及其代谢酶活性的影响结果表明,锡兰肉桂丙酮粗提物对皮氏叶螨具有较强的毒杀作用,处理后24h LC50值为3.5642mg/mL,其6.67mg/mL、4.44mg/mL、3.34mg/mL对皮氏叶螨的48h和72h校正死亡率分别为95.45%和98.84%、85.23%和90.70%、81.82%和87.21%;5.0μg/mL、4.0μg/mL、3.0μg/mL、2.0μg/mL和1.0μg/mL浓度下锡兰肉桂丙酮粗提物对皮氏叶螨酯酶、羧酸酯酶、碱性磷酸酯酶、酸性磷酸酯酶活性均有抑制作用,且其作用大小均随处理浓度的增加而增强。
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用RAPD和ISSR检测的橡胶树野生种质和栽培品种的遗传多样性(英文)
《热带亚热带植物学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：用19个RAPD引物和12个ISSR引物对14份野生橡胶树种质和我国的37份栽培品种进行了遗传多样性分析.RA PD 引物共产生132条带, 多态性带占88.6% ,相似系数变化范围在0.432-0.947,ISSR引物共产生101条带,多态性带占87.1% ,相似系数为0.505-0.941。平均基因杂合度分析表明野生种质比栽培品种具有较高的遗传多样性。根据UPGM A 法对51份材料进行聚类分析,结果表明,ISSR分析中所有材料可分为2类:第一类为野生种质,第二类为栽培品种;而RAPD分析中野生种质和栽培品种不能被分为明显的两大类。虽然ISSR和RAPD的聚类分析结果存在差异,但对两种方法进行的相关分析表明,他们之间仍存在极显著相关性,相关系数为0.574。品种PR107、热研217等一些栽培品种可以通过特异带在51份供试材料中被区分开。这些结果可以对橡胶树的育种工作起到一定的指导作用,同时RAPD和ISSR 技术也是进行橡胶树品种鉴定和遗传多样性研究的有效手段。
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巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)微管相关蛋白全长cDNA克隆及表达分析
《热带亚热带植物学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：从巴西橡胶树Heveabrasiliensis差减cDNA文库中分离到微管相关蛋白(Microtubule-associatedprotein,MAPs)基因片段,根据该基因片段序列信息,设计特异引物,采用cDNA末端快速扩增技术RACE(RapidAmplificationofcDNAEnds)进行差异片段的5’和3’端的扩增,获得了长度为788bp的全长cDNA,该基因在GenBank中的登录号为AY461412。序列分析表明该基因包含完整的开放阅读框,编码144个氨基酸,与微管相关蛋白基因家族具有很高的同源性,推测该基因是微管相关蛋白基因。半定量RT-PCR检测证实它在胶乳中的表达强于叶中,胁迫处理(伤害及乙烯处理)使其表达上调。
关键词： 巴西橡胶树 微管相关蛋白 cDNA末端快速扩增技术 RT-PCR
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海南近海30株抗B16细胞活性放线菌的16SrDNA多样性分析
《微生物学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：从海南近海 ,包括文昌红树林、海口红树林以及洋浦港等地采集样品 ,经苯酚、SDS、加热等预处理 ,稀释涂布麦芽汁_酵母膏琼脂 (YE)、淀粉酪素琼脂 (SC)、葡萄糖天冬氨酸琼脂 (GA) ,或者直接将样品稀释涂布加有重铬酸钾的高氏一号琼脂 (Gause)和麦芽汁_酵母膏琼脂等进行平板分离。共获得 35 4株放线菌 ,其中有 76株具有不同程度的抗B16细胞毒活性。比较发现加热预处理法和重铬酸钾选择培养法对于广泛分离筛选抗肿瘤活性放线菌不失为一种快速、简便、行之有效的方法。YE、Gause培养基无论在分离到的放线菌总数 ,还是细胞毒活性菌株的比例上都显示了良好的效果。对 30株具有较强抗B16细胞活性的链霉菌进行了扩增性 16SrDNA限制性酶切片段多样性分析 (16SARDRA) ,表明这 30株链霉菌之间有较大的基因差异性。 0 5 0 6 4 2、0 6 0 386和 0 6 0 5 2 4等 3株菌序列分析进一步证明这 3株菌属于链霉菌属 ,其中菌株 0 5 0 6 4 2与其亲缘关系最近的Streptomycescattleya的相似性仅为 95 % ,因此可能是一个新种。
关键词： 链霉菌 抗肿瘤活性 16SrDNA 16SARDRA
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类黄酮3',5'羟基化酶基因的克隆及转化铁炮百合
《园艺学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：利用RT-PCR技术从矮牵牛的紫色花瓣中克隆了两个控制花色的类黄酮3,5羟基化酶基因Hf1和Hf2,并构建了植物表达载体,利用农杆菌介导法对铁炮百合进行了遗传转化,获得了转基因植株。
关键词： 铁炮百合 类黄酮3,5羟基化酶基因 转化
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