科研产出
秦岭中龄华山松群落林窗特征初步研究
《西北林学院学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：对秦岭中龄华山松群落的林窗特征进行了分析。结果表明,秦岭华山松群落的林窗大小为25~160 m2;林窗形成方式中,人为采伐占63.5%;林窗制造者基部直径在10~20 cm的比例比较大,占50%;华山松群落的林窗内更新幼苗较多,林窗更新较林下更新好。
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红树林土壤细菌群落16SrDNAV3片段PCR产物的DGGE分析
《微生物学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：从土壤中抽提微生物总DNA ,直接扩增 16SrDNAV3片段 ,应用变性梯度凝胶电泳 (DGGE)和分子克隆技术分析 16SrDNAV3片段的多态性 ,发现地域因素和红树品种都是影响土壤细菌群落结构的因素。通过对杯萼海桑土壤 16SrDNAV3片段PCR产物两个DGGE条带进行分子克隆、序列测定和Blast分析 ,发现每个DGGE条带包含着许多不同的 16SrDNAV3片段 ,并且其中多数为NCBI未收录的序列。这表明DGGE和克隆技术相结合的方法是研究土壤微生物群落结构的一种可行方法。
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尿素在砖红壤中的淋失特征 Ⅰ.NH_4~+-N的淋失
《西南农业大学学报(自然科学版) 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：通过室内大型模拟土柱研究不同尿素施用量与砖红壤中NH4+-N的淋失关系。结果表明:各施肥处理渗漏液 中20 cm处NH4+-N的最高浓度值与施肥量大小成正相关,60 cm和120 cm处渗漏液中NH4+-N浓度值与施肥量关 系不大,但120 cm处渗漏液中NH4+-N浓度仍超过水体富营养化标准0.2 mg/L。在砖红壤中,尿素以NH4+-N形态 大量淋失的可能性不大。
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柱花草nptII、hpt和bar基因优化转化体系的建立
《生命科学研究 》 2005 CSCD
摘要：以热研5号柱花草(Stylosanthes guianensis cv.Ryan No.5)为材料,系统地研究了不同选择标记基因NptII,hpt和bar的柱花草转化体系.研究发现柱花草最适合基因转化的外植体是幼苗下胚轴.最佳愈伤组织形成和愈伤组织分化培养基为M S+NAA 1.0m g/L+6B-A4.0m gL/+3%蔗糖,pH6.最适宜外植体生根培养基是MS+N AA0mg/L+3%蔗糖(pH6).Glufosinate选择压力为0.15m g/L,Kanam ycin选择压力为20mg/L,Hygrom ycin选择压力为15m g/L.在以上的优化转化系统中,柱花草幼苗下胚轴分别侵染带NptII,hpt和bar基因的农杆菌(GV 3101)后,可获得30%愈伤组织具有kanamycin抗性,5%愈伤组织具有Hygromycin抗性,50%的愈伤组织具有Glufosinate抗性.
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香蕉Actin1启动子的分离及启动活性的分析
《热带作物学报 》 2005 CSCD
摘要：从香蕉基因组DNA中分离香蕉Actin1启动子序列,序列测定结果表明,该片段1253bp,包含完整的G-box和TATAbox,5'非翻译区和其下游的内含子,与文献报道序列的同源性达97.53%。以全长序列取代植物表达载体pCAMBIA3300上的35S启动子序列构建成瞬间表达载体pCAMBIA-Act1,以内含子序列HindⅢ和XbaⅠ双酶切片段(584bp)取代植物表达载体pBI121上的35S启动子,构建成瞬间表达载体pBI121-Act1-1。采用基因枪法对香蕉根、叶和果实的薄片进行转化,转化材料经培养3h,采用分光光度法测定各组织GUS的活性。结果表明,Actin1启动子在所转化的3种组织中均可启动报告基因的表达,表达活性与35S启动子接近,具有组成型表达的特点。内含子部分序列(584bp)也具有启动活性,但启动活性较低。
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ACS基因和HBsAg基因的克隆及瞬时表达分析(英文)
《分子植物育种 》 2005 CSCD
摘要：本研究通过SDS法从香蕉幼嫩叶片中提取基因组DNA,通过PCR的方法对ACS启动子2.5Kb的序列进行缺失改造,克隆到了长1185bp的ACS启动子片段,与GenBank报道序列相比较同源性为93.2%。经PlantCARE软件分析发现序列中含有多种调控元件,经预测ACS启动子可能被光、热、GA、乙烯或伤所诱导。为验证其果实特异表达活性,通过插入到pBI101.2中间表达载体上的GUS基因5'端前,构建了含GUS基因的瞬时表达载体pBACS。用基因枪法将pBACS转化到香蕉果实中,结果表明:用pBACS包被的金粉轰击的果实经GUS组织化学染色后,都出现兰色斑点,对照没有出现兰色斑点。因此认为GUS基因在香蕉果实成功实现瞬时表达。同时,通过改进的酚-氯仿提取法从乙肝病毒感染者的血清中提取总DNA,然后根据报道的序列设计特异性引物,同时在上游引物中引入了Kozak序列,经PCR克隆到HBsAg基因序列,长度为681bp。NCBIBLAST分析的结果表明,获得的HBsAg基因序列及推导的氨基酸序列与GenBank中所报道的序列的同源率分别为97.2%和97.4%。将经过改造的HBsAg基因替代pBACS中的GUS基因,成功构建了含有ACS启动子和HBsAg基因的香蕉树果实表达载体,为下一步转化香蕉,获得在果实中表达HBsAg蛋白的转基因植株奠定了基础。
关键词： ACS启动子 HBsAg基因 瞬时表达 香蕉果实表达载体
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海洋放线菌HSL-6抗菌物质的发酵优化与性质研究
《微生物学杂志 》 2005 CSCD
摘要：海洋放线菌HSL-6能产生对金黄色葡萄球菌有强烈抑制作用的活性物质。对其发酵条件和理化性质进行了研究,正交实验证明,其产生抗菌活性物质的最佳条件:发酵培养基pH6.5、培养温度为28℃、振荡频率300r/min、发酵培养基配方为蔗糖2%、黄豆粉1.5%、酵母浸粉0.15%、CaCO30.05%、甘油0.20%;菌龄为36h,接种量为10%,发酵时间为96h;该抗菌活性物质具有较好的热稳定性、pH稳定性,易溶于氯仿,经薄层层析展开后在紫外光下具有发荧光的特点,纸电泳实验证实该物质是一种弱酸性物质。
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利用柱花草为受体表达口蹄疫病毒外壳蛋白VP1的研究
《云南植物研究 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：将口蹄疫病毒外壳蛋白VP1基因克隆到植物表达载体pBI121,并转化到根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)菌株LBA4404中,采用叶盘转化法转化柱花草(Stylosanthesspp.)栽培品种热研二号柱花草(S.guianensiscv.ReyanⅡ),获得了转基因植株,经PCR、PCR-Southern blot和Southern blot分析表明VP1基因已整合到转基因柱花草植株的核基因组中。经RT-PCR、Northern blot分析表明VP1基因已在转基因柱花草中获得转录。
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