科研产出
检测PCV_2、PPV、PRV疫苗株与野毒株的多重PCR方法
《中国病毒学 》 2005 CSCD
摘要:本文建立了一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、细小病毒(PPV)、及伪狂犬病毒(PRV)疫苗株与野毒株 的多重PCR方法。根据GenBank上发表的PCV2、PPV和PRV gB、gE基因序列,针对各自保守区各设计一对特 异性引物,用这四对引物对同一样品中的PCV2、PPV和PRV gB、gE进行检测,结果可同时扩增出269bp(PCV2)、 581bp(PPV)、372bP(PRV gB)及147bp(PRV gE)四条特异性片段。对JEV、PRRSRV、大肠杆菌和双蒸水的PCR 扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重PCR能检出10pg PCV2、PPV和PRV gB、gE检测敏感度分别为 106.2、103.8、10-5.8 TCID50的模板。该方法的建立对临床上进行这三种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测具有重要 意义。
关键词: 多重聚合酶链式反应 伪狂犬病毒(PRV) 细小病毒(PPV) 猪圆环病毒2型(PCV2)


不同佐剂对兔出血症灭活冻干疫苗免疫效果的影响
《中国兽医学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要:健康新西兰成年兔 2 0只 ,随机分成 4组 ,在接种兔出血症灭活冻干苗的同时 ,各组分别注射左旋咪唑 (L MS,2mg/ kg)、黄芪多糖 (APS,2 .4 mg/ kg)、亚硒酸钠 (Se,0 .1 mg/ kg)和生理盐水 ,于免疫后 8、1 4、2 1、2 8d无菌心脏采血 ,应用间接 EL ISA和 MTT比色法检测机体抗体水平和淋巴细胞转化功能。结果显示 ,L MS组抗体和淋巴细胞转化水平在 1周后即可明显上升 ,与对照组差异显著 (P<0 .0 5 ) ;APS组 ,第 2周抗体水平达到最高 ,淋巴细胞转化功能显著增高 ,与对照组比较差异显著 (P<0 .0 5 ) ;Se组 ,抗体上升的过程较慢 ,第 3周达到峰值 ,与对照组和 L MS组相比 ,差异显著 (P<0 .0 5 )。结论 :L MS短期效果明显 ,但持续时间短 ;Se的作用缓慢 ,第 2 1天抗体水平才明显上升 ;APS调节效果最好 ,免疫后 8d即迅速刺激体液免疫和细胞免疫 ,且可较长时间维持较高水平
关键词: 兔出血症 左旋咪唑 黄芪多糖 硒 抗体 淋巴细胞转化


猪传染性胸膜肺炎放线杆菌转铁结合蛋白2基因克隆、序列分析及表达
《农业生物技术学报 》 2005 CSCD
摘要:参照猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae)血清5型菌株序列Z46774设计1对特异性引物,用PCR方法扩增转铁结合蛋白2(Tbp2)基因,得到1条1624bp的片段,然后克隆到pMD18-T载体中,经测序比较,与参考序列的核苷酸同源性达99.8%,从T-载体中切下目的片段后,定向克隆到pET32a(+)中,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),经诱导后,SDS-PAGE电泳,Tbp2高效表达,Western-blotting鉴定呈阳性。
关键词: 胸膜肺炎放线杆菌 转铁结合蛋白2 克隆 序列分析 表达


Milbemycin Oxime半抗原设计及其抗体制备
《农药学学报 》 2005 CSCD
摘要:通过m ilbemycin oxime A4、A3(M ILO)肟羟基与琥珀酸酐反应,合成了半抗原M ILO-5-琥珀酰半酯,采用碳化二亚胺法将其与载体蛋白BSA偶联制备人工抗原。以此人工抗原免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,抗体效价达1∶12 800;用此抗体建立的间接竞争酶联免疫吸附(CI-ELISA)检测方法,线性范围在16.00~4 394.18 ng/mL,最低检测限(I10)为6.28 ng/mL。
关键词: milbemycin oxime 半抗原 酶联免疫吸附法(ELISA)


玉米胚乳突变基因ae的遗传效应
《江苏农业学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要:以16个引进和自选的常规玉米自交系及其ae近等基因系为基础材料,测定了自交系本身及其组配杂交组合的直链淀粉含量。结果表明,简单回交转育成的品种ae基因能显著提高其直链淀粉含量,但只有ae基因籽粒的直链淀粉含量仅为50%左右,缺乏商业应用价值。遗传背景对直链淀粉含量的影响主要表现为非加性效应,注重正向修饰基因的积聚,通过轮回选择等手段提高育种群体直链淀粉含量,是高直链淀粉玉米育种的有效途径。


蛇床子素对小麦赤霉病菌葡萄糖、钙吸收和三磷酸腺苷酶活性的抑制
《农药学学报 》 2005 CSCD
摘要:蛇床子素可抑制小麦赤霉病菌菌丝生长干重;含有14C标记的葡萄糖培养基中培养小麦赤霉病菌,以100μg/mL蛇床子素处理,其菌体内14C放射强度比对照降低43%,表明蛇床子素能抑制小麦赤霉病菌对葡萄糖的吸收;以100μg/mL蛇床子素处理小麦赤霉病菌12h,菌体内总钙含量仅为对照的60%,表明蛇床子素能抑制菌体对钙的吸收;蛇床子素处理对β-1,6葡聚糖酶活性没有显著影响;离体条件下,蛇床子素能抑制小麦赤霉病菌三磷酸腺苷(ATP)酶活性。
关键词: 蛇床子素 小麦赤霉病菌 葡萄糖吸收 钙吸收 三磷酸腺苷酶活性

