科研产出
鼠疫多重荧光定量PCR内标检测方法的建立与应用评价
《疾病监测 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：目的 建立一种鼠疫多重荧光定量PCR内标检测方法,并进行应用效果评价.方法 选择鼠疫菌染色体YPO0393基因与pMT1质粒caf1基因为靶基因,设计合成YPO0393-内标模板、特异性引物和TaqMan荧光探针,构建鼠疫多重荧光定量PCR内标检测体系;对非鼠疫菌DNA、不同稀释浓度鼠疫菌DNA、野外监测样本进行检测,评价该方法的特异性、灵敏性、重复性和应用效果.结果 采用多重荧光定量PCR内标方法,8株鼠疫菌DNA均出现明显的扩增曲线,12株非鼠疫菌DNA未显示扩增曲线,提示该方法特异性良好.不同浓度的鼠疫EV76疫苗株DNA,检测最低限为22.5×10-4 ng/μL,变异系数为0.99~3.42,提示灵敏性、重复性较好.105份野外监测样本中,荧光定量PCR内标方法检测阳性的6份,与普通PCR方法检测结果一致,4份样本分离培养出鼠疫菌且采用PCR方法检测阳性.结论 通过设置双靶基因与内标对照,本研究建立的鼠疫多重荧光定量PCR内标方法可降低检测假阳性率,特异性、灵敏性和重复性理想,可用于鼠疫快速检测.
关键词： 鼠疫耶尔森菌 多重荧光定量PCR方法 内标对照 评价
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不同矿化度(微)咸水膜下滴灌棉田土壤水盐分布及棉花生长特性研究
《干旱地区农业研究 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：(微)咸水资源运用于农业灌溉为缓解干旱半干旱地区淡水资源紧缺问题提供了关键途径,适宜矿化度水质灌溉棉田可有效增加作物产量且在短期内不会加重土壤盐渍化.为探明不同矿化度水质膜下滴灌对棉田土壤水盐运移及棉花生长的影响,于2018—2020年开展测坑试验,设置1、2、3、4、5、6 g·L-1等6个不同矿化度灌溉水源情景,分析土壤水盐、八大离子、水化学类型变化及棉花生长特性.结果表明:(1)(微)咸水灌溉下土壤含水率在花铃期达到峰值,矿化度5、6 g·L-1处理下土壤含水率明显高于其他处理,窄行处灌后12 h各处理土壤含水率在60 cm土层处达到峰值,各处理土壤平均含水率峰值为20.61%;土壤盐分随着棉花生育期的推进及灌溉水矿化度的增加而增大,并逐年增加.(2)离子含量随着灌溉水矿化度增加而增加;(微)咸水灌溉下各处理盐分被滴灌水淋洗至60~100 cm土层,土壤溶液水化学类型主要为Cl·SO4-Na·Ca型.(3)灌溉水矿化度>4 g·L-1时,棉花株高、茎粗、叶面积和叶绿素含量受到不同程度的抑制;4 g·L-1处理下产量高出淡水处理0.02%,矿化度≤4 g·L-1的水源灌溉下土壤积盐较少,是适宜的灌溉水源.
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六种蚜虫对多异瓢虫生长发育和繁殖的影响
《中国生物防治学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：多异瓢虫是新疆地区的优势捕食性天敌，可取食蚜虫、粉蚧、木虱等多种害虫。开展多异瓢虫的大规模扩繁对于推进害虫的绿色防控具有重要意义，选择适合多异瓢虫生长发育和繁殖的食物，是保证其人工扩繁的重要基础。本研究通过室内比较饲喂6种蚜虫（麦长管蚜、棉黑蚜、棉蚜、玉米蚜、豌豆蚜、桃蚜）后多异瓢虫的生命参数，筛选适合用于其人工扩繁的活体饲料。结果表明：多异瓢虫取食6种蚜虫显著影响幼虫的发育历期、存活率、成虫寿命、繁殖力以及世代历期。其中，多异瓢虫幼虫取食麦长管蚜（7.70 d）和玉米蚜（7.67 d）的发育历期明显短于取食其他4种蚜虫的；取食麦长管蚜发育成的雌、雄成虫均较重（雌11.02 mg、雄8.54 mg）；取食棉黑蚜时蛹期（3.80 d）和卵期（2.52 d）均较短；多异瓢虫取食麦长管蚜（20.02 d）、棉黑蚜（21.14 d）、棉蚜（20.07 d）和玉米蚜（20.37 d）的世代历期均较短；多异瓢虫幼虫取食麦长管蚜（96.33%）、棉黑蚜（96.50%）和棉蚜（90.67%）的存活率均明显高于取食其他3种蚜虫的。同时，多异瓢虫雌、雄成虫分别在取食棉黑蚜（44.67 d）和麦长管蚜（59.13 d）时寿命最长。在繁殖力方面，多异瓢虫成虫取食麦长管蚜（3.53 d）和棉蚜（3.68 d）时产卵前期均较短；取食棉黑蚜（1044.02粒）和棉蚜（1084.45粒）时单雌产卵量较高。综合来看，在6种蚜虫中，麦长管蚜、棉黑蚜和棉蚜均相对适合多异瓢虫的生长发育和繁殖，是饲养与人工扩繁多异瓢虫较为理想的活体饲料。
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牛源无乳链球菌耐药性与毒力基因的表达量差异分析
《新疆农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究无乳链球菌对抗菌药物的耐药性,分析无乳链球菌毒力基因与耐药基因的携带情况.[方法]分别采用微量肉汤稀释法和普通PCR的方法,检测牛源无乳链球菌对16种抗菌药物的耐药性和相关耐药基因及毒力基因,并且采用荧光定量PCR技术对不同菌株的8种毒力基因的表达量差异进行分析.[结果](1)无乳链球菌对11种药物的敏感性达到了65%以上,其中敏感性最高的是氟苯尼考(92.4.%)和头孢噻呋(88.4%),对氨苄西林、红霉素、克林霉素的耐药率均达到了50%以上,对磺胺异恶唑的耐药率也达到了45%以上.(2)无乳链球菌耐药基因gyrA、sul1、ermB、ermC的检出率分别为100%、86.67%、93.3%、33.3%,而ermA、sul2、sul3及parC 4种耐药基因未检出.(3)无乳链球菌毒力基因pavA、cfb、fbsA、bibA、cspA、sip、iagA、hylB的检出率为100%,rib检出率为13.3%,bca的检出率为53.3%,cyl E检出率为73.3%;未检测到bac、lmb、scp B这三种毒力基因.(4)不同菌株之间毒力基因的表达量有显著性差异(P<0.05).[结论]无乳链球菌对红霉素和克林霉素的耐药率较高,无乳链球菌毒力因子是宿主感染疾病的重要因素.
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不同水氮处理对冬播春小麦产量和水氮利用效率的影响
《麦类作物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为探明春麦冬播高产、高效水氮运筹模式,2019-2021年在田间进行两因素三水平裂区试验,灌水量设 3 150(W1)、3 600(W2)和 4 200 m3·hm-2(W3)三个水平;施氮量设 0(N0)、135(N1)和 210 kg·hm-2(N2)三个水平,研究了 9种水、氮处理组合对春小麦品种新春48号0~100 cm 土层耗水量、群体叶面积指数、干物质积累量、产量及水、氮利用效率的影响.结果表明,增加灌水量提高了 0~40 cm 土层含水量,减少了 40~100 cm 土层储水消耗量,增加了总耗水量;同一灌水量条件下,施氮量对总耗水量影响不显著;水、氮协同增产效应大于其单因素效应,增加滴水量或氮肥量均增加小麦群体叶面积指数、总光合势和干物质积累量,水分利用效率(1.12~1.23 kg·m-3)和氮肥农学利用效率(7.58~11.17 kg·kg-1)呈先增后降趋势.水、氮协同增产是叶面积指数、总光合势和干物质积累量提高的结果.北疆春麦冬播适宜的水、氮运筹模式为总灌水量3 600~4 200 m3·hm-2、总施氮量135~210 kg·hm-2.
关键词： 春麦冬播 土壤含水量 干物质积累 产量 水氮利用效率
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一氧化氮熏蒸工艺对鲜杏制干品质的影响
《食品科学 》 2022 EI 北大核心 CSCD
摘要：针对硫化方法易导致杏干果实发生漂白、异味及二氧化硫(sulfur dioxide,SO2)残留量高等问题,本研究以新疆吊干杏为材料,利用NO对杏果实进行制干前、后熏蒸工艺处理;研究在常温((25±1)℃)贮藏条件下,杏干生理指标、NO残留情况及感官品质的变化.结果表明,NO熏蒸能较好维持杏干的水分质量分数和水分活度(water activity,aw),抑制杏干贮藏期褐变度和总色差的升高,减缓可溶性固形物(total soluble solids,TSS)、可滴定酸(titratable acid,TA)、抗坏血酸(vitamin C,VC)和还原糖(reducing sugars,Rs)水平的下降,显著抑制杏干表面微生物的生长,较好地维持杏干的色泽和营养品质,其中NO-NO处理能更好地保持杏干的贮藏品质.杏干中NO3-和NO2-残留量均低于GB 2762—2017《食品安全国家标准食品中污染物限量》要求.本研究可为NO气体熏蒸技术在杏干贮藏产业化应用提供理论和技术支撑.
关键词： 一氧化氮;熏蒸;鲜杏制干;贮藏品质
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大丽轮枝菌外切葡聚糖酶VdCBH1在毕赤酵母中的表达与酶活分析
《植物病理学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为了探究大丽轮枝菌外切葡聚糖酶VdCBH1(exoglucanase)的酶活与催化机理,本研究在生物信息学分析的基础上,以大丽轮枝菌V991菌株为材料克隆了 VdCBH1基因,进一步构建了 pPIC9-VdCBH1重组质粒并转入毕赤酵母中进行表达,测定了重组VdCBH1蛋白的外切葡聚糖酶活性;将预测的VdCBH1催化残基位点进行突变,随后通过SDS-PAGE分析了重组VdCBH1蛋白及其催化残基位点突变蛋白的表达情况,并检测了 VdCBH1催化残基位点突变前后的酶活变化.结果表明,VdCBH1基因编码区全长1 356 bp,编码451个氨基酸,蛋白理论分子量大小为48.574 kDa,理论等电点为4.29,N端前17个氨基酸为信号肽序列.保守结构域和进化树分析表明,VdCBH1蛋白含有GH7_CBH_EG保守结构域,该结构域是糖基水解酶7家族(Glycosyl hydrolase family 7,GH7)所特有的,与尖端赛多孢子菌(Scedosporium apiospermum)的外切葡聚糖酶蛋白亲缘关系最近.重组VdCBH1蛋白具有典型的外切葡聚糖酶活性,而G1u233催化残基单突变与Glu228、Asp230和G1u233催化残基三突变蛋白的酶活明显下降.这表明催化残基Glu233在外切葡聚糖酶活性中发挥更为重要的作用,Glu228、Asp230则可能在其中起协同作用.本研究为进一步揭示VdCBH1蛋白的催化机制奠定了理论基础.
关键词： 大丽轮枝菌 外切葡聚糖酶 基因克隆 毕赤酵母 酶活
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大肠埃希菌异质性耐药的研究进展
《生物技术通报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：大肠埃希菌(Escherichia coli)是人类和动物中常见细菌病原体,E.coli已对多种抗菌药物产生耐药,且由于抗菌药物选择压力越来越大,致使菌株的适应性和致病性更强,耐药的传播更快、定植率更高,给全球流行病学和临床治疗带来极大的挑战.近年来,E.coli的异质性耐药(heteroresistance,HR)相关研究相继被报道,异质性耐药是指细菌中的同源亚群对某种抗菌药物表现出不同的敏感性,是敏感菌进化为耐药菌的中间阶段,不同于完全耐药,异质性耐药在临床上不易及时检出,常导致临床抗菌药物治疗失败.因此,为有效防控E.coli感染及耐药的演变,深入剖析E.coli异质性耐药的流行特征及可能的机制尤为重要,本文就E.coli的异质性耐药研究进行了梳理,并对异质性耐药从表型特征、检测方法和可能的机制等方面进行了概述.旨在加强对E.coli异质性耐药的认识和研究,以期为全面了解E.coli耐药过程及发生机制、优化抗菌药物使用策略、减缓完全耐药菌种的出现提供参考.
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金花菜与苜蓿属主要物种基因组SSR分布特征的比较分析
《新疆农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]分析金花菜基因组SSR序列的分布特征,并与苜蓿属主要物种进行比较,为金花菜SSR分子标记的开发提供理论依据.[方法]利用MISA软件对金花菜、蒺藜苜蓿和紫花苜蓿的高质量基因组进行搜索,比较分析搜索到的SSR序列分布特征.[结果]在金花菜、蒺藜苜蓿和紫花苜蓿的基因组中,分别筛选到195753个,242434个和390496个完整的SSR序列,相对密度分别为428、564和478个/Mb,SSR序列的总长度分别为3611698、3657503和6307211 bp,占各自基因组序列总长度的0.79%、0.85%和0.77%.在1~6个不同核苷酸重复单元中,金花菜和蒺藜苜蓿的SSR序列均是单核苷酸重复单元最多,依次是二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸,而紫花苜蓿的六核苷酸重复单元多于五核苷酸重复单元.A、T、AT、TA、AG和TC是3种苜蓿共有的常见重复单元类型,金花菜基因组低片段长度的SSR比例高于蒺藜苜蓿和紫花苜蓿.[结论]金花菜基因组SSR的分布密度低于蒺藜苜蓿和紫花苜蓿,重复单元类型较丰富,具有较大的多态性标记开发潜力.
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有机-无机液体复合肥功能菌筛选及对设施番茄品质、生理活性的影响
《新疆农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]筛选在有机-无机液体复合肥高渗环境下稳定性好的不同功能性微生物,分析不同浓度菌液与有机-无机复合肥配施后,对番茄果实品质和生理活性的影响,为基于生物有机-无机复合肥的番茄有机种植和提质保鲜提供理论依据.[方法]将不同功能芽孢杆菌以芽孢形式分别接入等量有机-无机液体复合肥摇瓶,室温保存,采用平板计数法定期检测菌落总数,筛选出耐受性好、稳定性高的菌株,将此菌株按不同浓度比例制备生物有机-无机液体复合肥.在番茄两穗时期开始,每隔10 d分别施用生物有机-无机液体复合肥与常规肥料,49 d后检测番茄果实品质与生理活性的差异.[结果]贝莱斯芽孢杆菌LYT-5(Bacillus velezensis LYT-5)在有机-无机液体复合肥中稳定性最强,在高渗环境下具有较强的抗逆性,可有效与有机-无机液体复合肥复配.与对照(常规肥料,300 kg/hm2)相比,T3(有机-无机液体复合肥,300 kg/hm2+菌液,15 L/hm2)处理后番茄果实品质综合提升最高,49 d后番茄单果均重增加15%,果形指数增大13%,可溶性多糖含量显著提高43%,糖酸比增大13%,可溶性蛋白增加6%,适宜短期内食用和加工等;且有机-无机液体复合肥功能菌处理49 d后,番茄果实苯丙氨酸解氨酶活性最高增加220%,抗坏血酸过氧化物酶活性最高增加21%,有效提高了番茄果实抗逆性与耐储能力.[结论]筛选出一株可在有机-无机液体复合肥中稳定存在且活性较高的功能菌株,且浓度在T3(有机-无机液体复合肥,300 kg/hm2+菌液,15 L/hm2)时施用后能明显提高番茄果实产量和品质,减少摘后损失.
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