科研产出
嗜水气单胞菌气溶素的纯化及其溶血特性分析
《中国人兽共患病学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:目的用亲和纯化法纯化嗜水气单胞菌气溶素,从单因子水平分析嗜水气单胞菌的溶血特性。方法用嗜水气单胞菌气溶素单克隆抗体McAb3C12B11为配体制备亲和层析柱,甘氨酸洗脱以获得纯化的嗜水气单胞菌ZN1气溶素。获得的纯化气溶素分别与1%欧洲鳗鲡血红细胞、1%兔血红细胞、1%羊血红细胞进行溶血特性分析,并利用单克隆抗体McAb3C12B11进行溶血抑制试验。结果经亲和纯化获得分子量约为51.7kDa的气溶素,该气溶素能在Western-blotting反应中被嗜水气单胞菌ZN1胞外产物(ECPs)免疫血清和McAb3C12B11所识别。溶血试验证实亲和纯化的ZN1气溶素和ZN1ECPs对兔血红细胞、欧洲鳗血红细胞和绵羊血红细胞的溶血效价分别为5.12×104HU/mg、3.20×103HU/mg、6.40×103HU/mg和2.56×104HU/mg、1.28×104HU/mg、3.20×103HU/mg。溶血抑制试验结果表明:当红细胞为1%兔血红细胞时,McAb3C12B11对气溶素和ZN1ECPs的溶血抑制效价均为1∶211;当红血细胞为1%欧洲鳗血红细胞时,McAb3C12B11对气溶素的溶血抑制效价为1∶210,对ZN1ECPs的溶血抑制效价仅为1∶23。结论嗜水气单胞菌气溶素在单因子条件下与嗜水气单胞菌ECPs的溶血特性存在一定的差异,嗜水气单胞菌ZN1ECPs中存在多种溶血性毒素,这些毒素对不同宿主的溶血能力存在差异,同一嗜水气单胞菌菌株对不同的宿主起主要作用的溶血性毒素不同。
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红肉蜜柚苗木快速繁育技术
《中国南方果树 》 2009 北大核心
摘要:采用薄膜冬季保温、苗地施足基肥、砧木苗早摘心、早嫁接、幼苗及时摘心、薄肥勤施、病虫害以防为主等技术,实现红肉蜜柚嫁接苗繁育1年即可出圃。
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大豆肽的研究进展
《中国粮油学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:本文综述了大豆肽的组成、生产工艺、功能特性及其应用研究,提出了大豆肽研究中存在的问题并展望了其发展前景,为大豆肽的开发利用提供理论参考。
关键词: 大豆肽生产工艺功能特性研究进展
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生防菌ANTI-8098A对青枯雷尔氏菌致病力的影响
《中国生物防治 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:经生防菌蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus菌株ANTI-8098A处理后,番茄青枯雷尔氏菌Ral-stoniasolanacearum强致病力菌株弱化为无致病力菌株,弱化指数由0.40转变为0.86,回接番茄苗发病率由100.0%转变为0。同时,生防菌处理后的无致病力菌株在培养24h以前菌体生长能力显著增加,其中在12h时生长速率增长最快,达到了5.6倍;紫外-可见光吸收值明显下降,OD450nm由0.5740降为0.2644;高效液相离子交换色谱的表征由前峰<后峰转变为前峰>后峰;对生防菌异源蛋白的吸附由2种蛋白质(97.4kD和116.0kD)转变为1种蛋白质(97.4kD)。结果表明:ANTI-8098A对青枯雷尔氏菌具有致弱作用,并使其生理生化特性产生显著的变化。
关键词: 青枯雷尔氏菌 生防菌ANTI-8098A 蜡状芽孢杆菌 致弱 致病力
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水禽源禽1型副黏病毒强毒RT-PCR方法的建立
《福建农业学报 》 2009
摘要:参照GenBank上登录的水禽源禽1型副黏病毒强毒株F基因序列设计引物,建立检测水禽源禽1型副黏病毒强毒株的RT-PCR方法。该方法能从水禽源禽1型副黏病毒强毒株扩增出1条400 bp的特异片段,从水禽源禽1型副黏病毒弱毒、鸭瘟病毒、鸭1型肝炎病毒、减蛋综合征病毒、传染性法氏囊病病毒、H9亚型禽流感病毒和禽多杀性巴氏杆菌等均不能扩增出目的片段。敏感性试验显示该RT-PCR方法最低可检测出10 pg的病毒核酸。因此,该RT-PCR方法可用于水禽源禽1型副黏病毒强毒的临床诊断。
关键词: 水禽源禽1型副黏病毒 强毒株 RT-PCR
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含嗜水气单胞菌气溶素的免疫刺激复合物的制备及其对欧洲鳗的免疫效果
《水产学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:将嗜水气单胞菌气溶素(AerA)基因定向连接到pET32a(+)表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析表明,硫氧还蛋白-气溶素融合蛋白(Trx-AerA)表达量占重组菌总蛋白量的65.5%。将上述融合蛋白与商品化的QuilA混合,分别添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇获得Trx-AerA ISCOMs。其中同时添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇组蛋白回收率最高为10.46%,仅添加QuilA组蛋白回收率为1.82%,两者差异显著(P<0.05)。分别采用Trx-AerA、Trx-AerA ISCOMs、Trx ISCOMs经腹腔注射免疫欧洲鳗,免疫30 d后,每个实验组取5尾实验鱼采集血清,按1∶200稀释通过ELSIA法检测抗体水平,同时采用菌数为2.0×106CFU的嗜水气单胞菌ZN1株进行攻击,测定免疫效力。结果显示:Trx-AerA免疫组相对保护率为0%(3/15),Trx-AerA ISCOMs免疫组为83.3%(13/15),Trx ISCOMs免疫组为50%(9/15);3个免疫组针对气溶素的特异性抗体水平OD450值分别为0.19,0.52,0.36,Trx-AerA ISCOMs免疫组、Trx-AerA免疫组显著高于Trx ISCOMs免疫组(P<0.05)。结果表明影响嗜水气单胞菌免疫效果的除了气溶素的抗体水平外,ISCOMs等也能够增强非特异性免疫保护应答。
关键词: 欧洲鳗 嗜水气单胞菌 重组气溶素 免疫刺激复合物 免疫
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工厂化生产双孢蘑菇栽培种关键工艺研究
《福建农业学报 》 2009
摘要:通过对不同透气膜的透气塑料袋、不同配方的原种进行比较试验,从麦粒基质含水量、麦粒基质表面理化性状以及抗菌素添加配比等研究适合工厂化生产的双孢蘑菇栽培种。结果表明:T型透气膜的透气塑料袋更适合现有工厂化生产工艺条件;矿物原种为生产双孢蘑菇大袋栽培种的理想用种;蒸煮后的小麦培养基含水量控制在42%~45%能保证栽培种较高成品率;小麦蒸煮时添加0.3%石灰、2%CaSO4、4%CaCO3与能使麦粒表面附着1层厚度适合的弱碱性包衣,其黏度、酸碱度等理化性质适合双孢蘑菇菌丝生长,比杂菌具有较强的竞争优势;添加0.02%苯骈咪唑44号、农用硫酸链霉素0.025%(干重浓度)能防止双孢蘑菇栽培种生长后期多种霉菌及细菌污染,且对双孢蘑菇菌丝影响微弱。
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