文献类型： 中文期刊

作者： 龚晖 ¹ ; 林天龙 ² ; 张晓佩 ² ; 罗土炎 ³ ; 吴宗福 ² ; 宋铁英 ² ; 杨先乐 ¹ ;

作者机构： 1.上海海洋大学农业部渔业动植物病原库

2.福建省农业科学院生物技术研究所

3.福建省农业科学院中心实验室

关键词： 欧洲鳗;嗜水气单胞菌;重组气溶素;免疫刺激复合物;免疫

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2009 年 33 卷 02 期

页码： 303-310

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将嗜水气单胞菌气溶素(AerA)基因定向连接到pET32a(+)表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析表明,硫氧还蛋白-气溶素融合蛋白(Trx-AerA)表达量占重组菌总蛋白量的65.5%。将上述融合蛋白与商品化的QuilA混合,分别添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇获得Trx-AerA ISCOMs。其中同时添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇组蛋白回收率最高为10.46%,仅添加QuilA组蛋白回收率为1.82%,两者差异显著(P<0.05)。分别采用Trx-AerA、Trx-AerA ISCOMs、Trx ISCOMs经腹腔注射免疫欧洲鳗,免疫30 d后,每个实验组取5尾实验鱼采集血清,按1∶200稀释通过ELSIA法检测抗体水平,同时采用菌数为2.0×106CFU的嗜水气单胞菌ZN1株进行攻击,测定免疫效力。结果显示:Trx-AerA免疫组相对保护率为0%(3/15),Trx-AerA ISCOMs免疫组为83.3%(13/15),Trx ISCOMs免疫组为50%(9/15);3个免疫组针对气溶素的特异性抗体水平OD450值分别为0.19,0.52,0.36,Trx-AerA ISCOMs免疫组、Trx-AerA免疫组显著高于Trx ISCOMs免疫组(P<0.05)。结果表明影响嗜水气单胞菌免疫效果的除了气溶素的抗体水平外,ISCOMs等也能够增强非特异性免疫保护应答。