鸡传染性支气管炎病毒在鸡肾上皮细胞中培养条件的优化研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 姜逸

作者： 姜逸;周生;唐梦君;俞燕;程旭;沈欣悦;李建梅;高明燕

作者机构：

关键词： 鸡传染性支气管炎病毒;鸡肾上皮细胞;培养条件

期刊名称： 中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2016 年 38 卷 10 期

页码： 16-20

收录情况： 北大核心

摘要： 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)具有严格的上皮细胞嗜性。由于缺乏可供IBV复制的传代细胞系,从而阻碍了从细胞水平研究其复制、致病等分子机制。掌握鸡肾上皮细胞等原代细胞的制备、纯化及培养技术显得尤为关键。本项目组通过选择不同日龄的SPF鸡胚或雏鸡进行肾上皮细胞的制备,同时对消化酶、纯化方式及培养条件进行筛选优化,进一步采用具有EGFP标签的r H120-EGFP/5a重组病毒鉴定培养的鸡肾上皮细胞。结果表明:选择1日龄雏鸡,通过胶原酶Ⅰ消化制备的鸡肾上皮细胞的活力最佳;采用多次离心法能有效去除大量单细胞,从而达到纯化上皮细胞的目的;3%胎牛血清足够提供上皮细胞生长所需的营养,并能抑制CEF的生长。试验探索并优化了鸡肾上皮细胞制备及培养的条件,为禽源上皮细胞系的建立和IBV分子致病机制的研究奠定了基础。

分类号： S852.65

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