文献类型: 中文期刊
第一作者: 赵春林
作者: 赵春林;WANG Chuan;吴润;LI Fa-di;柳纪省
作者机构:
关键词: 绵羊;PRNP等位基因;聚合酶链式反应-单链构象多态性;正交试验;分析条件优化
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2008 年 38 卷 08 期
页码: 721-727
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为进行绵羊PRNP等位基因密码子136、154、171的多态性研究,建立适合于绵羊PRNP等位基因开放阅读框(ORF)内高变区PCR-SSCP分析方法,对凝胶浓度、交联度、甘油浓度、电泳电压、电泳时间、PCR产物与变性缓冲液比例、电泳缓冲液浓度、上样量等影响因素进行了优化试验。在优化中引入了正交试验法,以使优化过程简化,结果可靠。结果表明,交联度49∶1、甘油浓度0%、凝胶浓度12%、电泳电压200 V、PCR产物上样量≥2.0μL且<4.0μL、PCR产物与变性缓冲液比例1∶4、0.5×TBE缓冲液及4℃电泳45 h为最佳试验条件,据此建立了绵羊PRNP等位基因136、154、171密码子的PCR-SSCP分析方法。
分类号: S826
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