重组鸡抗菌肽Gallinacin-9的原核表达及其抗菌活性的鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩宗玺

作者： 韩宗玺;马得莹;刘胜旺;李一经

作者机构：

关键词： Gallinacins-9;鸡;融合蛋白;抗菌活性

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2008 年 39 卷 10 期

页码： 1426-1431

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR方法,从鸡舌组织中扩增到Gallinacin-9(Gal-9)基因,测序表明Gal-9为201 bp,其成熟肽由67个氨基酸残基组成。进一步将克隆的Gal-9基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-Gal-9,经序列分析鉴定确证目的基因克隆入载体的预期位点。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃诱导培养不同时间,SDS-PAGE电泳表明该基因在大肠杆菌中高水平表达,表达的重组鸡Gal-9融合蛋白相对分子质量约为32 ku。重组蛋白占菌体总蛋白的40%。表达的重组鸡Gal-9融合蛋白以包涵体的形式存在。重组蛋白经纯化后,分别以对数生长中期的大肠杆菌BL21(DE3-)株与致病性链球菌CAB株为检测菌,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定了重组Gal-9蛋白的抗菌活性,结果表明,重组Gal-9对这2种细菌都具有抗菌活性。

分类号： S852.42

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