小桐子基因组DNA的提取及ISSR-PCR反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 欧文军

作者： 欧文军;李开绵;王文泉

作者机构：

关键词： 小桐子;DNA提取;ISSR反应体系;正交设计;优化

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2008 年 24 卷 05 期

页码： 409-413

收录情况： 北大核心

摘要： 为从小桐子嫩叶中提取高质量的基因组DNA,采用改良CTAB法提取的基因组DNA通过OD260/OD280比值测定,琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增检测,结果表明改良CTAB法提取的DNA纯度高,可作为ISSR分子标记的模板。同时,采用正交设计的方法,对影响小桐子ISSR-PCR反应体系中的4个因素(引物、Taq DNA Polymerase、10×Buffer(含Mg2+)、dNTPs)在3个水平上进行优化试验。建立了适合小桐子的既稳定又能扩出最多数量谱带的ISSR最优反应体系,即20μl的反应体系中含有30ng模板DNA、0.2mmol/L dNTP、0.3 U Taq酶Polymerase、0.8μmol/L Primer、3.0mmol/L10×Buffer(含Mg2+)。

分类号： S794.9

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