嵌合OVA多肽的水貂肠炎病毒VP2病毒样颗粒的表达及鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 吕甜甜
作者: 吕甜甜;郭晓芹;曹海旭;朱言柱;宋显晶;张蕾
作者机构:
关键词: 病毒样颗粒;水貂肠炎病毒;VP2基因;OVA257-264
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2022 年 006 期
页码: 712-719
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为探究水貂肠炎病毒(MEV)VP2病毒样颗粒(VLPs)作为嵌合载体携带外源抗原的能力,通过PCR技术将鸡卵清蛋白(OVA)第257~264位氨基酸短肽(SIINFEKL)插入到MEV VP2的N末端获得OVA257-264-VP2,通过克隆重组和蓝白斑筛选分别获得重组质粒Bacmid-VP2、Bacmid-OVA257-264-VP2,转染到昆虫细胞表达获得VP2、OVA257-264-VP2蛋白的重组杆状病毒;通过间接免疫荧光和Western-blot分析蛋白反应原性,透射电镜观察VLPs形态,血凝试验检测其血凝特性。间接免疫荧光和Western-blot结果表明,重组蛋白VP2和OVA257-264-VP2都具有良好的反应原性。透射电镜观察结果表明,VP2与OVA257-264-VP2都可以形成病毒样粒子,颗粒直径均约为22 nm。血凝试验结果表明,重组蛋白VP2和OVA257-264-VP2与天然病毒的凝集特性相同,均可达到1∶16 384。结论:在MEV VP2的N端插入OVA257-264,不影响VP2病毒样颗粒的组装,VP2和外源多肽都保持有良好的反应原性,MEV VP2可以作为疫苗载体递呈外源抗原。
分类号: S852.65
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