微小牛蜱Bm91基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王玙

作者： 王玙;罗建勋;马米玲;关贵全;李有全;刘爱红;任巧云;刘军龙;殷宏

作者机构：

关键词： 微小牛蜱;Bm91基因;分泌表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2008 年 38 卷 07 期

页码： 569-575

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从我国半饱血微小牛蜱雌性成蜱肠道和唾液腺中提取总RNA;参照GenBank中已发表的微小牛蜱Bm91基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物。采用RT-PCR技术扩增Bm91基因,测序正确后将其亚克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K的EcoRⅠ酶切位点,构建重组表达载体pPIC9K-Bm91。再次测序正确后将其用SacⅠ内切酶线性化,电转化毕赤酵母GS115并经G418抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,Bm91基因获得了成功表达,诱导表达的培养上清液中表达出具有反应活性的83ku的重组Bm91蛋白。

分类号： S852.746

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