鸡宿主限制因子SAMHD1单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 俞燕

作者: 俞燕;李建梅;周生;徐步;高明燕;姜逸;程旭;沈欣悦;韦玉勇

作者机构:

关键词: chSAMHD1;单克隆抗体;间接免疫荧光;蛋白免疫印迹

期刊名称: 中国家禽

ISSN: 1004-6364

年卷期: 2020 年 42 卷 012 期

页码: 36-41

收录情况: 北大核心

摘要: 为探讨鸡源宿主限制因子SAMHD1(chSAMHD1)的功能及作用机制,研究将前期制备并纯化的chSAMHD1原核表达蛋白免疫8周龄BALB/c小鼠,应用细胞融合技术筛选单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备抗chSAMHD1单克隆抗体.结果显示:经间接ELISA筛选和2次亚克隆最终获得了5株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1A8-2-1、1A12-1-8、2B9-7-6、1F5-1-4、1F7-7-7,小鼠腹水效价较高的1A8-2-1和2B9-7-6抗体亚型均为IgG1;间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定结果均表明,单克隆抗体1A8-2-1可特异性识别293T细胞和DF-1细胞过表达的chSAMHD1蛋白.该研究成功获得了特异性抗chSAMHD 1单克隆抗体,可用于ELISA、IFA和Western blot检测,为鸡源SAMHD1蛋白生物学功能的研究奠定基础.

分类号: S855.3

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