小鼠胚胎成纤维细胞饲养层、Matrigel及贴附因子包被培养板培养小鼠胚胎干细胞的对比研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵芳

作者： 赵芳;陈坤琳;邢光东;钱勇;曹少先;李隐侠;孟春花;张建丽;张俊;桂红兵;仲跻峰;王慧利

作者机构：

关键词： 小鼠;胚胎干细胞;细胞外基质;克隆集落;多能性因子

期刊名称： 黑龙江动物繁殖

ISSN： 1005-2739

年卷期： 2020 年 005 期

页码： 1-7

摘要： 为进一步优化细胞外基质,建立胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)稳定的体外培养体系,试验分别采用小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)饲养层、基质胶(Matrigel)和贴附因子(attachment factor,AF)细胞培养板,以N2B27为基础培养基,评估和比较不同处理对小鼠ESCs(mESCs)自我更新及多能性维持的影响.结果表明:在KSR浓度为5%的N2B27培养基中,MEFs饲养层的mESCs形态立体,边缘清晰,呈规则的圆顶状; Matrigel、AF细胞培养板培养的mESCs形态立体,呈集落样生长.MEFs饲养层培养的mESCs传代后黏附快,集落形成显著快于Matrigel、AF细胞培养板,AF细胞培养板培养的mESCs黏附少,集落形成慢.免疫荧光染色结果显示,3种处理的mESCs均表达Oct4和Sox2蛋白,但AF细胞培养板培养的mESCs中Oct4、Sox2和Nanog的转录表达水平低于Matrigel细胞培养板,其中Sox2和Nanog差异显著或极显著(P <0.05或P <0.01).说明AF可用于mESCs培养,但在细胞黏附、增殖速率及多能因子表达上与MEFs、Matrigel有差异.

分类号： Q813.11

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