基于量子点技术的猪伪狂犬病病毒gB抗体免疫层析试纸研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 杨苏珍
作者: 杨苏珍;刘运超;邢云瑞;孙亚宁;尚延丽;张改平
作者机构:
关键词: 猪;伪狂犬病病毒(PRV);量子点;抗体;试纸
期刊名称: 中国畜牧兽医
ISSN: 1671-7236
年卷期: 2023 年 010 期
页码: 4160-4167
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】建立一种基于量子点(quantum dots, QDs)技术的猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)gB抗体免疫层析试纸,为PRV疫苗免疫效果评估提供一种快速、简便的检测技术。【方法】选用昆虫细胞表达系统表达的gB蛋白,采用羧基修饰的水溶性QDs,在偶联剂1-乙基-3[3-二甲基氨基丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)的作用下制备gB-QDs荧光标记物。将金黄色葡萄球菌蛋白A(Staphylococcus aureus protein A,SPA)和抗gB蛋白的单克隆抗体分别固定在硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,将样品垫、标记垫、吸水垫、支撑底板按生产工艺组装成基于QDs的荧光免疫层析试纸。检测该试纸的特异性、敏感性及与商品化ELISA试剂盒的符合率。【结果】敏感性试验结果显示,该试纸的敏感性为1∶6 400。特异性试验结果显示,该试纸与猪瘟病毒(CSFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性血清均无交叉反应,特异性为100%。通过检测田间猪血清样品,对比商品化ELISA检测试剂盒,结果显示,113份田间猪血清样品中,两种方法检测结果不一致的血清有11份,结果一致的血清有102份,该试纸与商品化ELISA试剂盒的符合率为90.3%。【结论】本研究制备的试纸检测线紫外灯下显色清晰可见,辨识度高,具有较高的特异性和敏感性,可用于PRV gB抗体的检测。
分类号: S858.28
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