新型Resilin-R5融合蛋白的大肠杆菌表达和纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 毛争争

作者： 毛争争;柳永;孙燕;周曼;刘子铎;汤江武

作者机构：

关键词： Resilin-R5;融合表达;蛋白纯化

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2014 年 01 期

页码： 141-147

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了获得兼具"高弹性"和"硅沉积"性能的新型功能生物材料,将具有高弹性的Resilin蛋白与具有硅沉积作用的R5肽进行了融合,研究其在大肠杆菌中的表达,建立了简易的纯化方法。首先,将果蝇弹性蛋白基因CG15920序列与硅藻R5肽基因序列进行拼接,经过稀有密码子优化后合成重组基因resilin-r5。然后将其插入原核表达载体pET28a,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS获得表达菌株,并通过IPTG进行诱导表达。最后以盐析加热法和Ni离子柱亲和层析法纯化带组氨酸标签的重组融合蛋白。最终实现Resilin-R5融合蛋白的高效表达,产量达到120 mg·L-1发酵液,为"高弹性-硅沉积"融合蛋白Resilin-R5的性能表征和创新应用奠定了基础。

分类号： Q78

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