非洲猪瘟病毒解旋酶Q706L基因的生物信息学分析及原核表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王国超

作者: 王国超;张忠辉;白鸽;赵亚茹;吴奇强;王一望;孙华林;杨吉飞;关贵全;殷宏;罗建勋;牛庆丽

作者机构:

关键词: 非洲猪瘟病毒;Q706L基因;生物信息学;原核表达

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2022 年 012 期

页码: 1545-1551

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了解非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)解旋酶pQ706L的功能,通过生物信息学方法对GenBank中公布的不同基因型的ASFV解旋酶Q706L基因序列进行分析,运用在线软件ExPASy、GOR4、SWISS-MODEL对该蛋白的理化性质及结构进行了预测分析,并进一步构建原核表达载体进行诱导表达及纯化鉴定。结果显示:Q706L基因长度为2 121 bp,在不同毒株和基因型间高度保守;经ExPASy预测,pQ706L蛋白的分子式为C6440H10761N2121O2643S502,属于疏水性蛋白,稳定性差;GOR4预测的二级结构显示,α螺旋是其主要结构形式,占比为42.07%;三级结构预测报告QMQE值为0.38,覆盖率为66%。以ASFV-CN/SC/2019毒株基因组为模板,成功构建了原核表达质粒pET-30a-Q706L,进行诱导表达及SDS-PAGE分析,得到78.3 ku的蛋白。纯化后经Western-blot鉴定,获得了纯度较高的目的蛋白,该蛋白且能够与ASFV阳性血清发生特异性反应。上述研究结果为进一步解析该蛋白的功能奠定了基础。

分类号: S852.651

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