铁蟹过敏原的分离、鉴定和快速纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张明琦

作者： 张明琦;支玉香;吕淑霞;李淑荣;董晓颖;潘家荣;高美须

作者机构：

关键词： 铁蟹肉;过敏原;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳;免疫印迹;蛋白质纯化

期刊名称： 核农学报

ISSN： 1000-8551

年卷期： 2009 年 23 卷 05 期

页码： 117-120

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 应用免疫印迹(Western blot)的方法鉴定铁蟹过敏原组分,然后利用电泳洗脱的方法快速纯化主要过敏原。取磷酸盐缓冲液制备的铁蟹肉浸出液,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,测定各组分的相对分子量,然后利用18例蟹过敏患者的血清进行免疫印迹,鉴定出主要和次要过敏原,利用普通垂直电泳槽快速洗脱主要过敏原蛋白,并鉴定活性。结果显示,SDS-PAGE显示铁蟹肉可辨条带有16条,相对分子质量在16.5～168kD之间。Western blotting结果表明,铁蟹肉浸出液共有10条过敏条带,其中相对分子质量为76kD的蛋白条带,阳性反应率为100%,纯化后获取了76kD的主要过敏原,经过免疫印迹鉴定其具有免疫活性。表明相对分子质量76kD的组分为铁蟹主要过敏组分,快速电洗脱可以纯化相对分子量为76kD的过敏原组分。

分类号： S917.4

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