猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 史平玲
作者: 史平玲;邬成业;乔松林;张改平;王爱萍;肖治军;祁艳华;卜丹
作者机构:
关键词: 猪FcγRⅠ受体;共转染;Marc-145细胞
期刊名称: 畜牧兽医学报
ISSN: 0366-6964
年卷期: 2010 年 41 卷 07 期
页码: 909-914
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)和G418(400μg.mL-1)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪FcγRⅠ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系,且表达于转染细胞表面的poFcγRⅠ受体分子能与猪IgG特异结合。本研究为进一步研究奠定了基础。
分类号: S828
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