PMA-qPCR联用快速检测苹果中扩展青霉活菌

文献类型： 中文期刊

第一作者： 阳瑾

作者： 阳瑾;丁宇;于吕健;范盈盈;刘峰娟;赵雪祺;焦子伟;王成

作者机构：

关键词： 扩展青霉;叠氮溴化丙锭;实时定量聚合酶链式反应;苹果;活菌

期刊名称： 食品工业科技

ISSN： 1002-0306

年卷期： 2023 年 44 卷 016 期

页码： 331-338

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:为建立一种叠氮溴化丙锭(Propidium Monoazide,PMA)与实时定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time Polymerase Chain Reaction,qPCR)联用的快速检测扩展青霉活菌方法.方法:通过优化PMA处理浓度、黑暗孵育及曝光时间,筛选扩展青霉特异性引物,结合qPCR技术,建立一种基于PMA-qPCR联用快速检测扩展青霉活菌的方法,构建定量标准曲线,应用于人工污染的苹果样品中活菌的检测,与平板菌落计数比较评估该方法的可靠性.结果:PMA处理浓度 10 μg/mL、黑暗孵育 5 min、曝光 10 min为最佳PMA处理条件.4种引物中Pexp-patF对扩展青霉具有极强的特异性,可作为引物用于PMA-qPCR检测.构建的定量标准曲线的R2= 0.9948,最低检测限为 102.6 CFU/mL,方法检测结果与平板菌落计数无明显差异,并发现在苹果的未腐烂部分中可检测出扩展青霉活菌.结论:研究建立的PMA-qPCR技术可应用于苹果中扩展青霉活菌的检测,为扩展青霉精准防控提供一定技术支撑.

分类号： TS207.4

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