植物乳杆菌WU146-磷酸-β-葡萄糖苷酶的基因克隆、蛋白表达及生物信息学分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 缪婷婷

作者： 缪婷婷;沈风飞;张晓晓;邱胡林;徐波;尹爱国;石鹏君

作者机构：

关键词： 植物乳杆菌WU14;6-磷酸-β-葡萄糖苷酶;基因克隆;蛋白表达;生物信息学分析

期刊名称： 中国食品学报

ISSN： 1009-7848

年卷期： 2022 年 22 卷 006 期

页码： 62-71

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 植物乳杆菌是一类兼性异养,兼性厌氧的同型发酵乳酸菌,其在改善食品风味和发酵特性等方面发挥着重要作用,而这种功能特征与其具有糖苷酶活性密切相关.为了挖掘植物乳杆菌糖苷酶的应用价值,以植物乳杆菌WU14为研究对象,利用聚合酶链式反应(PCR)技术成功克隆了8个WU14的糖苷水解酶,生物信息学分析表明均为糖苷水解酶1家族(GH1)的6-磷酸-β-葡萄糖苷酶基因.鉴于植物乳杆菌中该类糖苷酶鲜有报道,采用原核异源表达展开研究.序列分析表明8个酶蛋白氨基酸序列具有GH1家族的6-磷酸-β-葡萄糖苷酶典型的2个保守催化位点,序列一致性在32%~74%之间.经SDS-PAGE,8个蛋白均在大肠杆菌中表达,其中BglAW14、BglCW14、BglFW14为部分可溶性表达,其余为蛋白表达,形成包涵体.生物信息学分析显示:8个基因的编码蛋白都无信号肽和跨膜结构,疏水性较强.由亚细胞定位预测可知,除BglEW14主要存在于分泌结构内和BglHW14主要存在于细胞膜外,其余6个基因都存于细胞质内.对8个6-磷酸-β-葡萄糖苷酶基因的克隆表达及生物学序列分析,为进一步探究植物乳杆菌来源的6-磷酸-β-葡萄糖苷酶的分子机理研究奠定了基础.

分类号： TS201.3

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