微小牛蜱Bm86基因的原核表达与表达条件的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马米玲

作者： 马米玲;关贵全;李有全;刘爱红;任巧云;牛庆丽;殷宏;罗建勋

作者机构：

关键词： 微小牛蜱;Bm86基因;表达

期刊名称： 中国寄生虫学与寄生虫病杂志

ISSN： 1000-7423

年卷期： 2009 年 27 卷 06 期

页码： 531-533

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据微小牛蜱Bm86基因序列设计引物,在重组质粒pMD18-T-Bm86中克隆,并将其定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)株,用不同浓度异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在不同时间进行诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测结果表明,37℃条件下经1mmol/LIPTG诱导8h后,目的重组蛋白表达量最大,表达相对分子质量(Mr)约为94000的包涵体蛋白,与预期大小一致,目的蛋白约占蛋白总量的29%。蛋白质印迹(Western blotting)分析表明,该重组蛋白可被兔抗微小牛蜱全蜱阳性血清所识别。

分类号： S852.7

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