猫疱疹病毒Ⅰ型US3基因剪接异构体的鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙雪

作者： 孙雪;田进;刘大飞;吴红霞;祖少坡;曲连东

作者机构：

关键词： 猫疱疹病毒Ⅰ型;US3基因;剪接异构体

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2017 年 39 卷 02 期

页码： 103-106

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为鉴定猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)US3基因的编码产物,本研究以提取FHV-1感染细胞的总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增US3基因转录产物,测序结果显示除了全长US3基因(1 056 bp)外,还出现了一个825 bp的片段(US3-X1)。该片段是由全长US3基因在226 bp~458 bp位置发生了自我剪接,导致234 bp DNA缺失而产生,但ORF并没有改变。此外,通过重叠延伸PCR将US3基因226 bp处碱基"A"突变为"G"(m US3),改变自我剪接位点。将全长US3基因、m US3和US3-X1基因分别克隆至p3×Flag-CMV-10中,转染F81细胞,经western blot检测表明FHV-1 US3可以表达两种不同分子量的异构蛋白,大小约为45 ku和50 ku。这种US3基因的剪接异构体现象在猪伪狂犬病毒和人单纯疱疹病毒中已有报道,而FHV-1 US3基因的剪接异构体的鉴定尚属首次。该研究结果为进一步研究FHV-1 US3异构体蛋白的功能奠定了基础。

分类号： S852.65

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