猪瘟病毒E2基因与报告基因lacZ双表达质粒的构建及体外表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 冯霞

作者： 冯霞;刘湘涛;孙世琪;尹双辉;尚佑军;刘在新;谢庆阁

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;E2基因;lacZ基因;真核双表达质粒;BHK21细胞

期刊名称： 中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2005 年 35 卷 05 期

页码： 363-367

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用反转录和套式PCR技术,从猪瘟病毒(CSFV)石门血毒中扩增出了E2 基因,将其用NotⅠ和XhoⅠ双酶切后,与同样处理的真核表达载体pBudCE4.1 相连,获得了pBudCE Es2 22的阳性质粒。对后者再以HindⅢ和XbaⅠ双酶切,并与来自质粒pBudCE lacZ/CAT的lacZ基因片段连接,获得了含CSFV E2基因与lacZ报告基因的真核双表达质粒pBudCE lacZ/Es2 22。该质粒转染BHK21细胞后,用βGal Staining试剂盒原位染色可见许多着染蓝色的细胞;用CSFVAntigen试剂盒检测转染细胞的上清液和细胞沉淀,均可检测到含CSFV E2 抗原。结果表明,构建的真核质粒pBudCE lacZ/Es2 22实现了2个外源基因的共表达。

分类号： S852.651

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