特布他林杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨艳艳

作者： 杨艳艳;职爱民;刘庆堂;李靓;李青梅;柴书军;胡骁飞;邓瑞广;张改平

作者机构：

关键词： 特布他林;杂交瘤;单克隆抗体;鉴定

期刊名称： 核农学报

ISSN： 1000-8551

年卷期： 2012 年 26 卷 02 期

页码： 149-153

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,用BSA-TBL免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-TBL包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原进行冲击免疫;无菌手术取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合建立分泌TBL单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备TBL mAb,并对TBL mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果显示,免疫的6只小鼠血清抗体效价均达到10-4;融合后筛选出4C08-G5和3H3-A02共2株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1∶800和1∶1600,腹水效价分别为1∶2.56×105和1∶1.02×106;4C08-G5株分泌的抗体对TBL的IC50为5.25ng/ml,与瘦肉精、莱克多巴胺等其他β2激动剂交叉反应性小于3%。本试验获得了抗TBL mAb,为TBL残留免疫检测方法的建立奠定了坚实的基础。

分类号： S859.84

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