牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因在大肠杆菌中的融合表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李伟

作者： 李伟;陈松林

作者机构：

关键词： 牙鲆;抗菌肽;HEPCIDIN;大肠杆菌;表达;活性

期刊名称： 高技术通讯

ISSN： 1002-0470

年卷期： 2007 年 17 卷 007 期

页码： 765-770

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据从实验室克隆的牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因(GENBANK登陆号DQ129693)的序列,设计了特异性引物,PCR扩增其成熟肽片段.重组至融合表达载体PGEX-4T-1中,构建成牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因融合表达载体PGEX-FHEP,转化至大肠杆菌BL21(DE3)PLYS中,筛选得到的阳性克隆用IPTG进行诱导.SDS-PAGE电泳显示在29KD处有特异性的蛋白条带出现,WESTERN-BLOTTING 检测表明已经成功表达了融合蛋白,表达的融合蛋白最高占总蛋白的21%.纯化得到的GST-FHEP用凝血酶切割后,用亲合层析得到牙鲆的抗菌肽HEPCIDIN.抑菌实验结果表明抗菌肽对大肠杆菌(ATCC25922)有一定程度的抑制作用.

分类号： S9

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