ADV VP2主要抗原表位基因核酸疫苗与IL-12、IFN-γ细胞因子佐剂质粒的构建及鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 柏玲
作者: 柏玲;朱言柱;胡博;朱翔宇;张海玲;廉士珍;张蕾
作者机构:
关键词: 水貂阿留申病毒;VP2;抗原抗体复合物;IL-12;IFN-γ;核酸疫苗
期刊名称: 特产研究
ISSN: 1001-4721
年卷期: 2020 年 002 期
页码: 1-8,14
摘要: 为研制安全有效的水貂阿留申病毒(ADV)VP2核酸疫苗,本研究构建了不含有形成抗原抗体复合物表位的VP2核酸疫苗以及IL-12、IFN-γ细胞因子真核表达质粒,在体外细胞水平鉴定上述目的基因的表达情况.首先,以各克隆质粒为模板,PCR扩增获得ADV的VP2主要抗原表位M、鼠IL-12和IFN-γ的基因片段,连接至pVAX1载体,经酶切及测序鉴定后,确定构建正确;其次,将真核表达质粒转染入293T细胞,通过间接免疫荧光及Western Blot分析表达情况.结果显示:pVAX1-M可正常表达,并且目的蛋白可与ADV阳性血清结合,具有良好的反应原性.含细胞因子的真核表达质粒pVAX1-IL及pVAX1-IF转染293T细胞后,通过间接免疫荧光、Western Blot及ELISA分析证明,目的蛋白可在体外正常表达,且具有生物学活性.本研究可为水貂阿留申病核酸疫苗深入研究奠定基础.
分类号: S852.65
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